Моноциты в крови норма у детей: Повышенные моноциты у взрослых и детей. Причины и симптомы

Моноциты (MONO — monocytes)

Самые крупные клетки периферической крови. Моноциты обладают выраженной фагоцитарной функцией (являются макрофагами), участвуют в защитных реакциях организма путем продукции цитокинов, в процессах обмена веществ.

Референсные значения (вариант нормы)

Моноциты (MONO — monocytes) — %

Возраст	Мужчины	Женщины
<2 нед	5,0–15,0
2 нед – 1 год	4,0–10,0
1–2 года	3,0–10,0
2 года – 15 лет	3,0–9,0
>15 лет	3,0–11,0

Моноциты (MONO — monocytes) -абсолютное содержание, 10⁹ клеток /л

Возраст	Мужчины	Женщины
3 мес – 17 лет	0,37 – 1,26
> 17 лет	0,29 – 0,95	0,25 – 0,84

Увеличение значений (моноцитоз)	Уменьшение значений (моноцитопения)
Реактивный: вирусные, паразитарные, бактериальные и вызванные простейшими инфекции; воспалительные заболевания; аутоиммунные заболевания; гранулематозные процессы; злокачественные новообразования Опухолевой: острый монобластный и миеломонобластный лейкоз хронический моноцитарный миеломоноцитарный лейкоз	Гипоплазия и аплазия костного мозга Волосатоклеточный лейкоз Острый лейкоз Острые инфекции Прием некоторых лекарственных препаратов

что это значит и что делать?

Повышенные моноциты в крови у ребенка — это показатель активного иммунного ответа детского организма. Незначительное повышение допускается, а резкий рост указывает на интоксикацию и патологические процессы.

Моноциты производятся костным мозгом. Это один из видов лейкоцитов, кровяных телец. Они защищают организм ребенка от паразитов, микробов и опухолей. Очищают кровь и обновляют ее.

Как определяют уровень моноцитов в крови

Уровень моноцитов можно узнать, сдав общий анализ крови. В этом анализе указывают общее количество лейкоцитов и процентное содержание в этом количестве отдельных их видов.

Норма моноцитов у детей.

Возраст	Процентное содержание моноцитов в общем количестве лейкоцитов, %
Новорожденные	12
С 5 по 14 день с рождения	14
От месяца до года	12
4-5 лет	10
От 5 до 15	4-6
Подростки	7

Для процентного соотношения всех видов лейкоцитов к их общему количеству в крови используют понятие — лейкоцитарная формула. Если она изменяется, это может быть показателем развивающегося заболевания.

Как правильно подготовиться к анализам:

• кровь лучше сдавать натощак;
  
• стресс искажает показатели анализа, так же как и активные физические нагрузки;
  
• за день до анализа исключают из рациона ребенка жирную пищу;
  
• врачу сообщают обо всех лекарствах, которые принимает ребенок, — наличие медикаментов в крови способно исказить результаты анализа;
  
• на бланке анализа должен быть указан верный возраст ребенка.

И в здоровом состоянии могут быть повышены моноциты в крови у ребенка, например когда у малыша прорезываются зубки. Но это повышение незначительно. Резкий рост наблюдается при патологических процессах.

Причины повышения моноцитов в крови

Если моноциты повышены у ребенка, о чем это говорит:

• об активности паразитов в организме;
  
• о пищевом отравлении;
  
• об ослабленном иммунитете;
  
• о ситуации длительной реабилитации после заболеваний;
  
• о том, что произошло заражение

Моноциты повышены у ребенка, что это значит?

Инфекционный мононуклеоз	Болезнь поражает миндалины, лифмоузлы, селезенку и печень.
Туберкулез	На начальной фазе заболевания моноциты снижаются, но с течением болезни их число увеличивается.
Ревматизм, аутоиммунные заболевания	Такие заболевания приводят к чрезмерному увеличению всех видов лейкоцитов.
Бруцеллез	Передается от больных животных.
Лейкоз	При монобластном лейкозе наблюдается повышение лейкоцитов (редко при миелобластном лейкозе).
Полицитемия	Болезнь поражает костный мозг, моноциты увеличиваются выше нормы.
Малярия	Болезнь приводит к лейкоцитозу и снижению гемоглобина.
Паразиты, простейшие, грибковые инфекции	Для уточнения паразитарной или грибковой инфекции ребенка направляют на дополнительные анализы.
Отравление фосфором, тетрахлорэтаном или хлором	Эти вещества подавляют нейтрофилы, из-за чего уровень моноцитов повышается.
Врожденный сифилис	Ребенок может получить болезнь от мамы во время внутриутробного развития.
Также наблюдается при инфекционном эндокардите, язвенном колите, любых воспалениях ЖКТ, сепсисе, хирургическом лечении

Симптомы моноцитоза

Моноцитоз — это и есть повышенное количество моноцитов в крови ребенка. Различают абсолютный и относительный моноцитоз.

Относительным моноцитозом называют состояние, когда повышен только уровень моноцитов, а общее количество лейкоцитов не изменено (моноцитов больше в общем количестве за счет того, что снижается уровень других лейкоцитов). Это наблюдается в период восстановления после инфекционных болезней.

Абсолютным моноцитозом называют состояние, когда повышаются и моноциты, и общая концентрация лейкоцитов. Такое может наблюдаться при высокой активности патогенных микроорганизмов.

Моноцитоз — это не отдельное заболевание, а проявление реакции организма на патологические процессы.

Некоторые из симптомов, появляющихся при моноцитозе:

• высокая температура;
  
• слабость в теле;
  
• кашель;
  
• быстрая утомляемость;
  
• боли в желудке, тошнота;
  
• заложенность носа;
  
• увеличенные лимфатические узлы;
  
• боль в суставах.

Если в крови ребенка обнаружили высокое содержание моноцитов, педиатр назначит дополнительные анализы для выяснения причин заболевания. При моноцитозе нужно действовать быстро, потому что причина увеличения моноцитов — активный патологический процесс, который нужно распознать и остановить.

0

0

35957

Facebook

Twitter

Мой мир

Вконтакте

Одноклассники

у ребенка повышены моноциты — 25 рекомендаций на Babyblog.ru

ОБЩИЙ АНАЛИЗ КРОВИ: чем болеет ребенок?
Обязательно сохрани себе на стену!

Чтобы с вами ни случилось, врачи назначают одно и то же — общий анализ крови. Болят почки — общий анализ крови, болит в груди — общий анализ крови, поднялась температура — опять общий анализ крови, а там посмотрим. Мы-то хоть с вами взрослые люди, а если болеет ребенок? Ему-то для чего почем зря пальцы колоть — он же плачет!

К тому же врачи, глубокомысленно в этот анализ взглянув, назначают всегда одно и то же — антибиотики. Тридцать лет тому назад назначали олететрин, десять лет назад — оспен, сейчас вот в моде аугментин и супракс. Скажу по секрету — оспен, супракс и аугментин хотя и разные по химическому составу, но работают абсолютно одинаково, да еще и против одних и тех же бактерий.

Можно конечно сколь угодно возмущаться по этому поводу, но давайте посмотрим немножко с другой стороны. Предположим, что анализ крови мы с вами уже сдали, малышу укололи пальчик, на следующий день, отстояв длиннющую очередь, вы забрали анализ в лаборатории. Пора в другую очередь, чтобы показать анализ врачу? Не спешите. Давайте сами заглянем туда и попробуем разобраться, что значат все эти латинские слова и загадочные цифры.

КРАСНАЯ КРОВЬ: ЧТО ЭТО ТАКОЕ?

Анализ крови делится на две части. Первая часть — так называемая красная кровь, то есть гемоглобин, эритроциты, тромбоциты и цветовой показатель. Вся эта шатия отвечает за перенос кислорода в клетки и при инфекции не шибко-то и страдает. Нам с вами нужно лишь бегло пробежаться по нормам и убедившись, что все хорошо, переходить ко второй части.

Нормы.

Гемоглолбин (он же Hb), измеряется в граммах на литр (!) крови и отвечает за перенос кислорода.

У месячного ребенка норма гемоглобина 115-175 (это вам не взрослый, тут все сложнее), в полгода — 110-140 — так же, как и у нас с вами, и так собственно, аж до 10-12 лет. 110-140 (145 по другим данным) грамм на литр крови.

Эритроциты, они же RBC — клетки, в которых гемоглобин и плавает в крови. Ага, это как раз они при помощи гемоглобина кислород и переносят. В месяц у ребенка нормой будет 3,8-5,6 — внимание! — триллионов эритроцитов на литр крови. У годовалого ребенка (как и у взрослого) этих самых триллионов уже поменьше — 3,5-4,9 на литр крови. Что делать — если выкачивать кровь для анализа литрами, все приходится считать в триллионах. Ничего, дальше будет попроще, вот увидите.

Ретикулоциты, они же RTC, измеряется их количество, слава Богу, в процентах. Это так сказать, юные эритроциты, их не должно быть более 15% у детей до года и не более 12 % у детей старше года или у взрослых. Нижний предел нормы для ретикулоцитов — 3%. Если их меньше, ребенок находится на пороге анемии, и меры необходимо принимать как можно скорее.

Тромбоциты. Английская аббревиатура PLT. Их существенно меньше, чем эритроцитов — их количество измеряют «всего лишь» в миллиардах на литр крови, норма от 180 до 400 для детей до года и от 160 до 360 для детей старше года или у взрослых. Тромбоциты — это собственно и не клетки вовсе, а так — обломки гигантской клетки-предшественника, из этих обломков, в случае чего, формируются тромбы — например, чтобы прекратить кровотечение, если малыш, не дай Бог, поранится.

СОЭ (ESR). Это даже и не клетки вовсе, а показатель скорости оседания эритроцитов — чем быстрее эта самая скорость («быстро» это не как едет автомобиль, здесь скорость измеряется в мм в час), тем активнее воспалительный процесс, по поводу которого вам возможно и порекомендовали сдать анализ крови. Нормы СОЭ в 1 месяц — 4-10, в 6 месяцев 4-8, а вот от года и до 12 лет — от 4 до 12 мм в час. Потом нормы той самой СОЭ будут отличаться еще и в зависимости от пола, но это уже совсем другая история.

Кроме этих показателей, есть еще множество других — гематокрит (НСТ), ширина распределения эритроцитов (RDWc), средний объем эритроцита (MCV), среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH) и даже средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC). Все эти показатели служат для диагностики анемий, поэтому нам с вами (мы ведь разговариваем об инфекциях, помните?) будет лучше отложить их обсуждение на потом.

Для нас гораздо важнее не система переноса кислорода, а система защиты организма от инфекций. Это так называемая белая кровь, лейкоциты. Вот на ней мы остановимся очень и очень подробно.

ЛЕЙКОЦИТЫ ИЛИ БЕЛАЯ КРОВЬ: ЭВОЛЮЦИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ

Лейкоциты бывают разные. Одни отвечают за борьбу с бактериями, другие расправляются с вирусами, третьи «специализируются» по вовсе уж крупным супостатам — например по растительным клеткам (такое бывает чаще, чем вы думаете — я имею в виду аллергию на пыльцу растений) или даже по многоклеточным мерзавцам-глистам.

Поэтому посмотреть общее число лейкоцитов при острой инфекции — это хорошо, но чертовски мало. В лучшем случае доктор определит, что инфекция есть. Но чтобы понять, что именно эту инфекцию вызвало, нужно смотреть, какие именно лейкоциты повышены. Называется такое исследование лейкоцитарной формулой.

Вот о ней мы и поговорим.

Нормы.

Основные изменения в красной крови у детей происходят не то что до года — до месяца, и связано это с тем, что в течение первого месяца жизни у ребенка еще сохраняются в крови следы перехода на дыхание легкими. С иммунной системой все гораздо сложнее — она изменяется непрерывно в течение первых шести лет жизни, причем крайне неравномерно. Так что приготовьтесь. Цифр будет побольше.

Лейкоциты. Они же WBC. Их количество измеряется в миллиардах на литр крови (что по сравнению с эритроцитами выглядит как-то даже и несерьезно). А поскольку при рождении ребенок переходит из стерильной среды (утроба матери) в среду крайне нестерильную — что ж тут поделать, никакие уборки и кварцевания в комнатке малыша не обеспечивают гибели ВСЕХ находящихся там микробов, количество лейкоцитов даже в норме у детей гораздо выше, чем у взрослых. Правда, это количество с возрастом снижается. У ребенка одного месяца от роду норма лейкоцитов в крови составляет от 6,5 до 13,8, в полгода от 5,5 до 12,5, с года до шести лет (ага, в то самое время когда ребенок чаще всего болеет) от 6 до 12. И лишь когда иммунитет ребенка становится достаточно стойким, чтобы противостоять многочисленным инфекциям, количество лейкоцитов приближается к количеству их у взрослых — от 4,5 до 9 (некоторые почему-то считают нормой 12, но это не совсем так).

Нейтрофилы, они же NEU. Их количество считают не в абсолютных единицах (сколько на литр крови) а в процентах от общего числа лейкоцитов. Задача этих клеток — борьба с бактериями. Это довольно честная драка: нейтрофилы просто поедают зазевавшиеся бактериальные клетки и переваривают их. Правда, кроме бактериальных клеток нейтрофилы еще выступают и в роли своеобразных уборщиков — точно таким же образом они убирают из организма любой клеточный мусор, а не только микробов.

Нейтрофилы бывают разные: есть палочкоядерные нейтрофилы (это своего рода юниоры среди клеток-пожирателей), но их в крови не очень-то и много — такие дела, как уничтожение инфекций — задача не детская. Их количество почти не меняется с возрастом — и у месячного, и у годовалого и даже у шестилетнего ребенка их от 0,5 до 4.5 %. И только у детей старше семи лет (как впрочем и у взрослых) верхняя граница нормы палочкоядерных нейтрофилов поднимается аж до 6%. Иммунитет готов к вторжениям, ага.

Но настоящие «рабочие лошадки» иммунной системы — это сегментоядерные нейтрофилы — кстати, именно они являются основной и почти единственной защитой для детей моложе 2 лет. У детей до года в норме их от 15 до 45%, а с года до шести лет (когда работы существенно прибавляется) то количество нейтрофилов существенно вырастает — от 25 до 60 %. Наконец, к семи годам, количество сегментоядерных нейтрофилов добирается таки до взрослой нормы. Правда, норма эта весьма размыта — от 30 до 60%. То есть и тридцать процентов — норма, и шестьдесят — норма тоже.

Моноциты, они же MON. Это — «младшие братья» нейтрофилов. До поры до времени они сидят в тканях, а в кровь выплывают исключительно редко. В норме их количество не превышает от 2 до 12% у детей до года или от 2 до 10% у детей старше года. Взрослые от детей по этому показателю не отличаются ничуть — все те же 2-10%. Правда, когда нейтрофилов в крови начинает катастрофически не хватать, им на помощь приходят как раз моноциты и число моноцитов в крови хоть и не сильно, но увеличивается.

Эозинофилы, они же EOS. Поговаривают, что эозинофилы ответственны за аллергические реакции. Мягко говоря, это не совсем так. Эозинофилы не производят иммуноглобулинов класса Е, уровень которого как раз и повышен у аллергиков. Эозинофилы, если хотите, — «высшая каста» клеток-пожирателей (до этого как о клетках-пожирателях мы говорили о нейтрофилах и моноцитах). Они способны сожрать все, что не способно сожрать их самих. Даже многоклеточные агрессоры (глисты, ага) и весьма крупные чужеродные клетки (например кишечные амебы) отчаянно боятся эозинофилов. Дело в том, что эозинофилы не заглатывают клетки — они присасываются к ним, впрыскивают внутрь клеток свои пищеварительные ферменты и затем высасывают содержимое этих клеток, как ребенок высасывает двухлитровый пакет сока. Только отвернись — и от пакета (в нашем случае от небольшого глиста, например) остается лишь пустая оболочка. В норме эозинофилов в крови немного — от 0,5 до 6%

Лимфоциты, они же LYM. Это — основные клетки зрелой иммунной системы. Их специализация — борьба и с вирусами и с бактериями. Но особенно азартно лимфоциты расправляются или с вирусами или со своими же собственными клетками, по наивности этих вирусов приютивших. В норме в крови ребенка моложе года лимфоцитов от 40 до 72%, хотя работают они, право слово, вполсилы. А вот когда иммунная система малыша начинает таки развиваться (напоминаю, развитие иммунной системы после года и заканчивается в основном к 6-7 годам), число лимфоцитов в крови достаточно резко падает — до 26-60%. Наконец, после 7 лет лимфоциты «устаканиваются» на отметке в 22-50%.

Базофилы, BAS. Просто юные лимфоциты. Их число никогда не превышает 1%.

Все. Уф-ф-ф-ф…

НУ И КТО ВИНОВАТ В ИНФЕКЦИИ?

Когда знаешь, какие клетки крови за что отвечают, разобраться по анализу крови что за инфекция на этот раз у ребенка не просто, а элементарно просто. Высокая СОЭ и высокие лейкоциты — значит, инфекция в разгаре и лечить ее необходимо просто немедленно (в довесок к этим показателям чаще всего имеется температура хорошо за 38). Высокие нейтрофилы — значит, мы с вами познакомились с очередными бактериями, а высокие лимфоциты означают очередную вирусную инфекцию.

Все просто, как видите. А теперь давайте посмотрим примеры. И чтобы не заморачиваться цифрами, будем просто говорить «много» или «мало». Попробуем?

Острая вирусная инфекция.

Признаки. Лейкоциты и СОЭ выше нормы, в лейкоцитарной формуле превышение количества лимфоцитов, снижение количества нейтрофилов. Моноциты и эозинофилы могут незначительно повыситься.

Что делать? Чаще всего врачи назначают препараты, содержащие интерферон — виферон, кипферон или генферон.

ВАЖНО! Точно так же как вирусы, ведут себя так называемые внутриклеточные паразиты — хламидии и микоплазмы. Отличить их можно по клиническим проявлениям заболевания — «визитная карточка» и тех и других — длительный сухой кашель при крайне невнятной внешней картине — ребенок выглядит активным, в легких хрипов нет. Кашель, тем не менее, может долиться неделями.

Хроническая вирусная инфекция

Признаки. Ребенок часто болеет, в крови нормальная СОЭ и нормальные же (а то и пониженные) лейкоциты. В лейкоцитарной формуле на верхней границе нормы плавают лимфоциты и моноциты. Нейтрофилы на нижней границе нормы или даже еще ниже.

Что делать? Обследовать ребенка на антитела к вирусам Эпштейна-Бар и цитомегаловирусу. Скорее всего, виноваты эти двое.

ВАЖНО! Если ребенок только что переболел вирусной инфекцией, анализ крови будет точно таким же. Так что если ребенок болеет два раза в год и только что перенес вирусный насморк, бежать сдавать анализы на хронические вирусные инфекции несколько преждевременно.

Острая бактериальная инфекция.

Признаки. Лейкоциты и СОЭ выше нормы, в лейкоцитарной формуле превышение количества нейтрофилов (а то и моноцитов вместе сними) на фоне снижения количества лимфоцитов. Внешне видны такие признаки воспаления как температура, гнойные выделения из носа, хрипы в легких или влажный кашель.

Что делать? Наиболее частые врачебные назначения с таким анализом крови — это антибиотики пенициллиновой группы (аугментин, флемоклав солютаб, супракс), реже — антибиотики группы азалидов (вильпрофен, сумамед).

Хроническая или местная бактериальная инфекция

Признаки. Все те же — повышенные нейтрофилы (не выше верхней границы нормы) и пониженные лимфоциты (тоже в границах нормы, только ближе к нижней). Если в анализах крови есть такие изменения, придется искать локальный не очень активный очаг инфекции (Осмотр ЛОР-врача или снимок околоносовых пазхух, при подозрении на инфекцию мочевыводящих путей — общий анализ мочи).

ВАЖНО! Точно так же выглядит анализ крови после недавно перенесенной бактериальной инфекции.

Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ (с обязательной «ручной» микроскопией мазка крови*)

Исследуемый материал Смотрите в описании

Метод определения См. в описании

Кровь — это жидкая ткань, выполняющая различные функции, в том числе, транспорта кислорода и питательных веществ к органам и тканям и выведения из них шлаковых продуктов. Состоит из плазмы и форменных элементов: эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.

Общий анализ крови в лаборатории ИНВИТРО включает в себя определение концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, величины гематокрита и эритроцитарных индексов (MCV, RDW, MCH, MCHC). Общий анализ — см. тест № 5, Лейкоцитарная формула — см. тест № 911, СОЭ — см. тест № 139.

Лейкоцитарная формула — это процентное соотношение различных видов лейкоцитов (нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты, базофилы).

Лейкоцитарная формула в Независимой лаборатории ИНВИТРО включает в себя определение (в %) нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов, базофилов, моноцитов. Общий анализ — см. тест № 5, Лейкоцитарная формула — см. тест № 911, СОЭ — см. тест № 139. 

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) — неспецифический показатель воспаления.

СОЭ — показатель скорости разделения крови в пробирке с добавленным антикоагулянтом на 2 слоя: верхний (прозрачная плазма) и нижний (осевшие эритроциты). Скорость оседания эритроцитов оценивается по высоте образовавшегося слоя плазмы (в мм) за 1 час. Удельная масса эритроцитов выше, чем удельная масса плазмы, поэтому в пробирке при наличии антикоагулянта (цитрата натрия) под действием силы тяжести эритроциты оседают на дно.

Процесс оседания (седиментации) эритроцитов можно разделить на 3 фазы, которые происходят с разной скоростью. Сначала эритроциты медленно оседают отдельными клетками. Затем они образуют агрегаты — «монетные столбики», и оседание происходит быстрее. В третьей фазе образуется очень много агрегатов эритроцитов, их оседание сначала замедляется, а потом постепенно прекращается.

Показатель СОЭ меняется в зависимости от множества физиологических и патологических факторов. Значения СОЭ у женщин несколько выше, чем у мужчин. Изменения белкового состава крови при беременности ведут к повышению СОЭ в этот период.

Снижение содержания эритроцитов (анемия) в крови приводит к ускорению СОЭ и, напротив, повышение содержания эритроцитов в крови замедляет скорость седиментации. В течение дня возможно колебание значений, максимальный уровень отмечается в дневное время. Основным фактором, влияющим на образование «монетных столбиков» при оседании эритроцитов является белковый состав плазмы крови. Острофазные белки, адсорбируясь на поверхности эритроцитов, снижают их заряд и отталкивание друг от друга, способствуют образованию «монетных столбиков» и ускоренному оседанию эритроцитов.

Повышение белков острой фазы, например, С-реактивного белка, гаптоглобина, альфа-1-антитрипсина, при остром воспалении приводит к повышению СОЭ. При острых воспалительных и инфекционных процессах изменение скорости оседания эритроцитов отмечается через 24 часа после повышения температуры и увеличения числа лейкоцитов. При хроническом воспалении повышение СОЭ обусловлено увеличением концентрации фибриногена и иммуноглобулинов.

Определение СОЭ в динамике, в комплексе с другими тестами, используют в контроле эффективности лечения воспалительных и инфекционных заболеваний. Общий анализ — см. тест № 5, Лейкоцитарная формула — см. тест № 911, СОЭ — см. тест № 139.

Биоматериал – 2 пробирки:

Обращаем внимание, что при выполнении клинического анализа крови (№1515) и подсчете лейкоцитарной формулы (№119), если в пробах выявлены значимые отклонения и результат требует проведения ручной микроскопии, ИНВИТРО дополнительно бесплатно проводит ручной подсчет лейкоцитарной формулы с подсчетом молодых форм нейтрофилов (в том числе точным подсчетом палочкоядерных нейтрофилов) и количественной оценкой всех патологических форм лейкоцитов (при их наличии).

*просмотр мазка крови под микроскопом врачом-гематологом с дополнительным уточнением лейкоцитарной формулы и описанием морфологии клеток.

Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой сдать платно в Воронеже

Описание

Состав крови человека постоянно меняется, реагируя на происходящие с организмом изменения. Причиной этих изменений могут быть как естественные процессы, например взросление, так и патологии разного характера.

Клинический или общий анализ крови – одно из основных лабораторных исследований, направление на него получает пациент практически при любом обращении к врачу. Этот анализ необходим для того, чтобы специалист мог сделать первичные выводы о состоянии организма, понять, какие еще диагностические тесты понадобятся, назначить лечение или оценить его эффективность. Расширенный вариант исследования включает расчет лейкоцитарной формулы – соотношения между разными типами лейкоцитов.

Какие показатели и измеряют в рамках ОАК

В результатах теста пациент получит данные по основным параметрам:

• гемоглобин
• эритроциты
• лейкоциты
• тромбоциты
• СОЭ

И дополнительным параметрам:

• MCH (среднее содержание гемоглобина в эритроците)
• MCHC (средняя концентрация гемоглобина эритроците)
• MCV (средний объем эритроцитов)
• RDW (анизоцитоз эритроцитов)
• Гематокрит, плюс процентное соотношение различных видов лейкоцитов (лейкоцитарная формула)

С точки зрения выполнения и подготовки, общий анализ крови – это рядовая процедура, максимальная простая для пациента. Формирование результатов занимает минимум времени, при высокой срочности данные могут быть получены в течение нескольких часов.

Лейкоформула представляет собой соотношение таких видов клеток как лимфоциты, нейтрофилы, моноциты, базофилы, эозинофилы. В зависимости от особенностей строения белых клеток крови, они делятся на гранулоциты и агрунолоциты. Каждый из типов клеток отвечает за определенный набор функций, например, они помогают вырабатывать антитела, поглощают чужеродные микроорганизмы, принимают участие в воспалительных и аллергических реакциях. Подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется вручную – врач-лаборант использует для этого микроскоп. Преимущество такого метода перед автоматическим анализатором в том, что возможности аппарата ограничены, он не все патологии может дифференцировать. Отклонения в лейкоцитарной формуле расскажут врачу о существующих проблемах со здоровьем.

Когда назначают анализ с лейкоформулой

Кроме случаев, когда данный диагностический тест проводится в профилактических целях, например в рамках регулярной диспансеризации, поводом для обращения в лабораторию может стать:

• подозрение на инфекционное заболевание
• проблемы с иммунитетом
• диагностика паразитарных инвазий
• подготовка к операции
• диагностика аллергии
• подозрение на анемию
• диагностика заболеваний крови

Анализ назначается пациентам любого пола и возраста, и детям, и взрослым.

Подготовка к анализу

Лабораторная диагностика показывает достоверные результаты при условии правильной подготовки пациента к процедуре. Несоблюдение правил может стать причиной искажения показателей крови, что в свою очередь повлияет на выводы врача относительно состояния организма. Запланировать визит в лабораторию лучше на первую половину дня. Если это невозможно, то следует выдержать 8-ми часовой промежуток с последнего приема пищи. Из напитков допустима только чистая негазированная вода, от кофе и чая придется отказаться. За сутки до исследования следует исключить алкоголь, а за 30 минут – не курить.

Для детей правила менее строгие. Грудничкам делают анализ непосредственно перед приемом пищи, спустя хотя бы полчаса после последнего кормления. Детям от года до 5 лет достаточно не есть до процедуры 2-3 часа.

Кроме ограничений в еде, алкоголе и табаке, перед анализом рекомендуется избегать стрессов как физического, так и эмоционального характера. Обязанность родителей – настроить ребенка на процедуру, помочь преодолеть страх, объяснить важность и необходимость сохранять спокойствие. Если вам предстоит пройти и другие типы диагностики, например, сделать рентген или УЗИ, оптимально будет сначала сдать кровь, а уже потом – все остальное. Исказить результаты могут различные лекарственные препараты. Поэтому лучше всего будет поставить в известность врача, о том, какие препараты вы принимаете. Это поможет правильно истолковать результаты.

Интерпретация результатов

Расшифровка полученных данных – задача для специалиста. Готовый анализ выдается на бланке, где указана информация по проверенным показателям. Для каждого из них установлены референсные значения, определяющие норму, характерную для здорового человека. Для взрослого и ребенка норма отличается, потому что иммунная система и кроветворение работают по-разному. Коррелирует состав крови и с полом, опять же в силу естественных отличий в работе организма.

В Воронеже сдать ОАК с лейкоцитарной формулой предлагает специализированный центр для всей семьи «Детский доктор». У нас доступны исследования для детей с рождения и взрослых.

Общий анализ крови – узнать об услуге, записаться на приём. Сеть клиник МЕДСИ в Брянске

В рамках исследования изучается целый ряд параметров биологической жидкости. Их уровень и отклонения от норм могут показывать не только общее состояние организма, но и работу отдельных систем и органов.

Гемоглобин

Данный белок является важной частью эритроцита. Он связывается с кислородом и углекислым газом для доставки первого из легких в ткани всего организма. В составе гемоглобина присутствует железо. Насыщенность крови этим белком является важным параметром здоровья человека. Если количество гемоглобина сокращается, организм не получает достаточного количества кислорода. Низкий уровень показателя свидетельствует об анемии или повышенном потреблении жидкости. Если гемоглобин в анализе крови превышает норму, можно судить о ее сгущении (обезвоживании). Оно может быть как физиологическим (по причине повышенных физических нагрузок), так и патологическим (при нарушениях процесса кроветворения).

Эритроциты

Эти вещества представляют собой красные кровяные тельца, которые делают кровь красной. Снижение содержания эритроцитов свидетельствует о кровотечениях, анемии, гипергидратации. Также количество веществ сокращается при беременности. Повышенный уровень эритроцитов позволяет заподозрить у пациента водянку почечных лоханок, кисты почек, опухолевые образования и др.

Ретикулоциты

Данные вещества представляют собой молодые формы эритроцитов. Так как кроветворение – процесс непрерывный, то и ретикулоциты всегда присутствуют в составе биологической жидкости. Если показатель их содержания превышает нормативный, можно заподозрить кровопотерю. Понижение уровня ретикулоцитов может свидетельствовать об анемии, онкологических процессах, некоторых почечных патологиях и лучевой болезни.

Тромбоциты

Данные вещества отвечают за процесс свертываемости крови. При пониженном уровне тромбоцитов можно заподозрить у пациента аутоиммунное заболевание или тяжелый воспалительный процесс. При понижении показателя врач может выявить кровопотерю, снижение функции селезенки или раковую патологию.

Лейкоциты

Эти вещества являются белыми кровяными тельцами, обеспечивающими защиту нашего организма от агрессивных внешних воздействий. Зачастую лейкоциты повышаются при инфекционных заболеваниях, аллергических реакциях и воспалительных процессах. Также высокий уровень может характеризовать стрессовую нагрузку, недавно перенесенное кровотечение, опухоль. Количество лейкоцитов в организме в общем анализе крови снижается при угнетении иммунной системы при вирусных инфекциях, тяжелых токсикозах у беременных женщин, лучевой болезни и др.

Важно! Значение для врача при диагностике имеет не только общий показатель лейкоцитов, но и число его отдельных видов: базофилов, нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов и лимфоцитов. Соотношение различных лейкоцитов в общем объеме называют лейкоцитарной формулой.

• Нейтрофилы – клетки неспецифического иммунного ответа. Они отвечают за связывание возбудителя инфекции (грибка, бактерии и др.). Если в организме возникает очаг воспаления, нейтрофилы двигаются к нему, увеличиваясь в числе. Поэтому повышенное количество таких клеток свидетельствует о наличии инфекции. Также показатель повышается при интоксикации, раковых заболеваниях и стрессах
• Эозинофилы. Эти клетки обеспечивают нейтрализацию в основном иммунных комплексов, которые являются ответом на аллерген, проникший в организм. При повышенных показателях эозинофилов врач может заподозрить у пациента аллергию или заражение глистами и иными паразитарными инфекциями
• Базофилы. Эти клетки обеспечивают кровоток в мелких сосудах, нормальный рост капиллярных сетей, решают другие задачи. Их уровень в организме повышается при аллергической реакции, воспалениях органов желудочно-кишечного тракта, онкологических новообразования в легких и др. Сниженное количество базофилов характерно для воспаления легких, начала менструального цикла, патологий надпочечников и др.
• Лимфоциты. Эти клетки являются основными для иммунной системы. Именно они способны распознать и уничтожить чужеродные агенты, проникшие в организм. Лимфоциты помогают нам бороться с вирусами. Увеличение их числа может свидетельствовать о вирусной инфекции, сифилисе, туберкулезе и ряде других заболеваний. Число лимфоцитов снижается при угнетении иммунной системы
• Моноциты. Эти вещества находятся в крови примерно 30 часов и переходят в макрофаги в тканях. Их назначение – уничтожение бактерий и погибших клеток, очистка места воспаления. Их повышенный показатель может свидетельствовать о длительных вялотекущих заболеваниях

Также при исследовании общего анализа крови у женщин, мужчин и детей оценивается такой параметр, как СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Она возрастает при сильном склеивании веществ между собой и может свидетельствовать о заболеваниях желчевыводящих путей и печени, аутоиммунных процессах, эндокринных заболеваниях, инсультах и инфарктах и др.

Важно! При необходимости врач может направить пациента на развернутый общий анализ крови. В этом случае он покажет, какие показатели нужно включить в исследование дополнительно. Как правило, такая диагностика проводится в случае, если специалист уже подозревает у пациента определенные патологии, и обследование требуется с целью подтверждения имеющегося предположения о заболевании.

упражнения для увеличения потенции видео

упражнения для увеличения потенции видео

упражнения для увеличения потенции видео

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое упражнения для увеличения потенции видео?

Технология мгновенного расширения Biomanix доставляет компоненты, стимулирующие рост пещеристого тела прямо в пенис, позволяя МАКСИМАЛЬНО увеличить его размер.

Эффект от применения упражнения для увеличения потенции видео

Biomanix — действительно эффективный, но только если пропить курс хотя бы продолжительностью в месяц, чтобы еще и закрепить результат. Состав натуральный, только внимательно нужно читать аллергикам. Способствует повышению тестостерона и как положительный момент могу отметить еще и увеличение мужского достоинства. Выносливость повышается в разы, могу рекомендовать.

Мнение специалиста

Biomanix хорошее средство! Эффект моментальный, все работает стоит жестко и надежно! побочек нет и стоит недорого.

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ упражнения для увеличения потенции видео необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Даша

Уже не так остро чувствовал сексуальное желание. Поделился с другом, он и посоветовал, рассказав о таблетках для потенции Biomanix. Насколько я понял они не влияют на здоровье, но восстанавливают потенцию. Я их купил, принимал по 2 капсулы каждый день и пройдя курс ощутил прилив мужских сил. Причем никаких побочек от таблеток нет. Всё стало как прежде, даже лучше.

Ия

С помощью Biomanix член увеличивается за счет усиления кровотока и расширения гладких мышц. Компоненты препарата специально разработаны и собраны в комплекс, для комбинированного воздействия на организм. Именно это делает член больше и тверже.

Пользуюсь периодически Biomanix. Капсулы абсолютно безвредны плюс натуральный состав. Пару раз они меня буквально спасали, когда нужно было быть на высоте. Очень нравится то, что они мгновенного действия. Раньше пробовал другие препараты, но такого восторга они у меня не вызывали. Ну и, конечно же, тот факт что они помогают даже в профилактике венерических заболеваний повышает к ним доверие. Где купить упражнения для увеличения потенции видео? Biomanix хорошее средство! Эффект моментальный, все работает стоит жестко и надежно! побочек нет и стоит недорого.
Потенция. Топ-20 отличных упражнений для повышения потенции у мужчин и . В этой статье собрано целых 20 физических упражнений для повышения потенции у . Наши рекомендации на видео и советы из статьи нужно будет обязательно. Лучшие упражнения для потенции направлены на прокачку РС-мышцы. Она имеет протяженность от лобковой кости до крестца, а её функция заключается в поддержании в надлежащем положении ануса и смежных с ним внутренних органов. Мышца подчинена нерву, контролирующему активность половых. Упражнения для повышения потенции – один из основных способов решения проблемы полового бессилия у мужчин . 30 основных упражнений для повышения потенции. Врачи-физиотерапевты рекомендуют выполнять упражнения не менее 2 раз в день, утром и вечером перед едой. Количество подходов здесь. Упражнения для повышения потенции в домашних условиях. Ниже приведены упражнения, для выполнения которых не нужны . Утренние пробежки способствуют повышению вязкости крови за счет увеличения количества тромбоцитов. Вечерний бег, наоборот, снижает вязкость крови и уменьшает риск. Немного найдется мужчин, которые не были бы озабочены сохранением мужской силы на долгие годы. Половой инстинкт — один из самых мощных инстинктов, повышающих самооценку. Однако, он очень уязвим. Ежедневные упражнения для повышения потенции у мужчин рекомендовано начинать с вращения тазом. . Упражнения для увеличения мужской силы под названием Лук нужно выполнять лежа на животе. Упражнения для увеличения потенции отражаются на уровне тестостерона – главного мужского гормона. . Упражнения для улучшения потенции – это не силовые нагрузки, они не изматывают. По этой причине их выполнение подходит даже абсолютно нетренированным мужчинам и лицам.
http://дши-элегия.рф/upload/tabletka_dlia_chlen_tsena4171.xml
http://www.haiyang.co.kr/uploaded/uvelichenie_polovoi_potentsii7470.xml
http://dongkinhtourhue.com/upload/samyi_bezvrednyi_preparat_dlia_povysheniia_potentsii9834.xml
http://www.spinningtop.org.uk/uploads/nedorogie_preparaty_dlia_povysheniia_potentsii8778.xml
http://www.drapikowski.pl/uploaded/fck_files/file/otzyvy_o_preparatakh_dlia_povysheniia_potentsii4054.xml
Biomanix — действительно эффективный, но только если пропить курс хотя бы продолжительностью в месяц, чтобы еще и закрепить результат. Состав натуральный, только внимательно нужно читать аллергикам. Способствует повышению тестостерона и как положительный момент могу отметить еще и увеличение мужского достоинства. Выносливость повышается в разы, могу рекомендовать.
упражнения для увеличения потенции видео
Технология мгновенного расширения Biomanix доставляет компоненты, стимулирующие рост пещеристого тела прямо в пенис, позволяя МАКСИМАЛЬНО увеличить его размер.
Повышенный уровень моноцитов в крови у взрослого человека может свидетельствовать о том что в организме протекает инфекция. Помимо этого повышенные моноциты могут также обозначать болезни кроветворной системы, наличие опухолей, ревматизма и т.д. Однако, в ряде случаев. Моноциты – большие белые кровяные клетки, которые . Увеличение моноцитов в крови у взрослого человека обусловлено широким спектром заболеваний. . Как таковых, симптомов повышения моноцитов у взрослого человека не существует. Причины повышения моноцитов. У мужчин. . Моноциты – одноклеточные зрелые лейкоциты, образовываются в костном мозге, продолжительность их жизни . Нормы содержания моноцитов в крови у детей в сравнении со взрослыми завышены, самый высокий наблюдается у новорожденных. Однако волноваться не о. Моноцитоз: повышенные моноциты в результатах анализа крови. Что означает превышение норм моноцитов у . Моноциты – что это? Анализы на моноциты и нормы моноцитов крови. Показания для назначения теста на моноциты. Повышенные моноциты – что могут означать? Что еще вызывает высокий. Что значат моноциты в анализе крови, их норма. Причины повышения или снижения результата у детей и . Моноциты – это дворники человеческого организма. Самые крупные клетки крови обладают способностью захватывать и поглощать чужеродные вещества практически без вреда для себя. При каких болезнях моноциты повышены. Увеличение показателя моноцитов в крови является тревожным признаком. . Другие причины, по которым могут быть повышены моноциты в крови, подразделяются на несколько групп 2 Если моноциты повышены у взрослого, о чем это говорит? 2.1 При каких болезнях повышаются моноциты у взрослых и детей? . Примеры заболеваний, при которых обнаруживается повышение моноцитов в крови у женщин и мужчин Сдала общий анализ крови с лейкоформулой. Повышены моноциты-12,8,а СОЭ . Моноциты в вашем анализе совершенно в невоспалительной крови могут быть . Здравствуйте, повышение моноцитов признак больше бактериальной инфекции чем вирусной. Но у Вас абсолютное количество моноцитов в порядке. Причины повышения моноцитов в крови у взрослых и детей. Нормы количества моноцитов в крови и что может вызывать моноцитоз. . Как я уже сказала, моноцит — это представитель клеток белой крови. Если переводить с древнегреческого языка, то моно – один, а цитос – клетка. Это достаточно крупная. Моноциты повышены – превышение допустимого уровня данных компонентов крови, что может свидетельствовать о развитии той или иной . Норма в крови у женщин или у мужчин составляет не больше 8% от общего количества лейкоцитов. О превышении говорят тогда, когда показатели выше отметки в 9%, так. Повышенный уровень моноцитов. Моноцитоз – это состояние, при котором количество циркулирующих в крови моноцитов . Он вырабатывается у мужчин и женщин, но в разном количестве. Тестостерон выполняет разнообразные функции в организме, например, оказывает. Ашвагандха (Ashwagandha): 25.

Определение

, абсолютные диапазоны и причины

1. Определение моноцитов
2. Что такое абсолютное количество моноцитов и как оно измеряется?
3. Каков нормальный диапазон для моноцитов?
4. Что вызывает высокое количество моноцитов?
5. Различия между моноцитами и макрофагами

Определение моноцитов

Моноциты

Моноциты — один из крупнейших типов лейкоцитов. Каждый тип лейкоцитов имеет уникальную роль .Моноциты несут ответственность за атак и разрушение микробов и бактерий , которые попадают в организм.

Моноциты — это фагоцитарные клетки . Это означает, что они уничтожают инфекции, «поедая» их. Они используют свою плазматическую мембрану, чтобы поглощать и разрушать мертвые клетки или вредные инородные частицы и бактерии.

Когда им исполнилось несколько часов, моноцитов попадают с кровотоком в органы и ткани, такие как печень, легкие, селезенка и костный мозг.Попадая туда, они прилипают к ткани и превращаются в клетки другого типа: макрофаги.

Эти клетки ведут себя так же, как моноциты, но остаются на органах или тканях. Они удаляют мертвые ткани, могут убивать раковые клетки и регулировать иммунитет организма против посторонних веществ.

Некоторые моноциты не превращаются в макрофаги, а вместо этого становятся дендритными клетками. Они отвечают за работу с Т-лимфоцитами, часто называемыми Т-клетками. Дендритные клетки представляют Т-клеткам остатки разрушенных клеток, вирусов, бактерий и других чужеродных веществ.Эта информация помогает Т-клеткам сформировать план борьбы с захватчиком.

Что такое абсолютное количество моноцитов и как оно измеряется?

Абсолютное количество клеток крови является частью результатов анализа крови. Это когда количество ячеек выражается как абсолютное число, а не в процентах.

Абсолютное количество моноцитов можно вычислить, умножив общее количество лейкоцитов в организме на процент лейкоцитов, которые являются моноцитами.Например, если количество лейкоцитов составляет 8000, и 5% этих лейкоцитов являются моноцитами, то абсолютное количество моноцитов будет 400 (8000 x 0,05).

Каков нормальный диапазон для моноцитов?

Моноциты составляют от 1 до 10%, циркулирующих белых кровяных телец, хотя для большинства людей они составляют от 2 до 8%. У мужчин обычно немного больше моноцитов, чем у женщин.

Нормальный диапазон абсолютных моноцитов составляет от 1 до 10% лейкоцитов в организме.Если в организме 8000 лейкоцитов, то нормальный диапазон абсолютных моноцитов составляет от 80 до 800.

Наличие абсолютного количества моноцитов , которое выше или ниже типичного, само по себе не опасно, но может указывать на необходимость дальнейшего обследования человека. Абсолютное количество моноцитов может быть ценным способом оценки общего состояния иммунной системы организма.

Что вызывает высокое количество моноцитов?

Высокое количество моноцитов может указывать на другие заболевания.Инфекция, вызванная бактериями, вирусом или грибком, может вызвать повышение уровня моноцитов. Это потому, что организм создает больше моноцитов для борьбы с захватчиком. Абсолютный высокий уровень моноцитов также может быть реакцией на стресс, хронические инфекции или аутоиммунные нарушения.

Иногда подсчет за пределами нормального диапазона абсолютных моноцитов может указывать на то, что существует проблема с тем, как организм производит новые клетки крови. Это может указывать на определенные типы состояний крови. В редких случаях высокое количество может быть связано со злокачественным новообразованием, например, лейкозом.

Различия между моноцитами и макрофагами

Макрофаги — это моноциты, которые завершили свою работу в кровотоке, переместились в другие органы или ткани тела и созрели.

Эти два типа клеток похожи: и моноциты, и макрофаги отвечают за уничтожение вредных веществ. Ключевые отличия заключаются в том, что размер макрофагов примерно в два раза больше моноцитов. Макрофаги остаются неподвижными во внеклеточной жидкости, но моноциты перемещаются по кровотоку.

Автоматический анализатор CBC Discover Sight

Подсчет моноцитов — обзор

2.4.2 Моноциты новорожденных

Моноциты — самые крупные лейкоциты в кровотоке. Они могут дифференцироваться на ДК и макрофаги. Высокое количество моноцитов указывает на хроническую инфекцию или воспаление. При рождении количество моноцитов у новорожденных значительно выше, чем у взрослых. В зависимости от срока беременности (от 22 недель до 42 недель) среднее значение количества моноцитов линейно увеличивалось, а референсный диапазон на 40 неделе составлял 300–3300 мкл ^–1 (Christensen et al., 2010). Количество моноцитов постепенно увеличивалось в течение первых 2 недель жизни. В крови человека есть несколько популяций моноцитов, классифицированных в соответствии с их экспрессией антигенов, например: CD14 _⁺⁺ CD16 _^— классические моноциты, CD14 _⁺ CD16 _⁺ провоспалительные моноциты и моноциты, экспрессирующие лейкоцитарный антиген человека (HLA-DR). У недоношенных и доношенных новорожденных уровень моноцитов CD14 ++ CD16- и CD14 + CD16 + был значительно повышен, но у недоношенных была снижена экспрессия HLA-DR (Schefold et al., 2015). Уровень экспрессии CD16 (Fc gamma R III) в моноцитах пуповинной крови был снижен, а процент CD14-тусклых моноцитов, экспрессирующих HLA-DR, также был меньше среди моноцитов пуповинной крови (Murphy and Reen, 1996). Экспрессия Toll-подобного рецептора 4 (TLR4) (основной рецептор для передачи сигналов врожденного иммунитета) и экспрессия HLA-DR в неонатальных моноцитах показали увеличение в зависимости от гестационного возраста (Wisgrill et al., 2016). У инфицированных младенцев процент моноцитов HLA-DR + был ниже, чем у неинфицированных младенцев (Juskewitch et al., 2015). Экспрессия HLA-DR в неонатальных моноцитах варьирует в зависимости от аллерген-специфических иммунных ответов (Upham et al., 2004). В стимулированных LPS и IFN-γ неонатальных моноцитах доношенных и недоношенных детей экспрессия костимулирующих молекул CD80 увеличивалась, тогда как CD86 снижалась (Pérez et al., 2010). Неонатальные моноциты экспрессировали дефектную презентацию антигена MHC II, снижали поверхностную экспрессию MHC II и Т-клеточные ответы, но снижение экспрессии MHC II на неонатальных моноцитах не коррелировало с дефектной презентацией антигена (Canaday et al., 2006). Экспрессия бета-хемокинового рецептора CCR5 снижена в неонатальных моноцитах и ​​постепенно увеличивается во время дифференцировки моноцитов в макрофаги.

Способность моноцитов к фагоцитозу у новорожденных не отличается от способности взрослых при рождении, хотя у недоношенных было меньше фагоцитов (Filias et al., 2011). Интересно, что экспрессия CD64 и фагоцитарная способность новорожденных с очень низкой массой тела при рождении были выше, чем у недоношенных или доношенных детей (Hallwirth et al., 2004).Предварительная обработка неонатальных моноцитов GM-CSF значительно увеличивала продукцию супероксид-аниона O2 в ответ на PMA, но M-CSF не мог усилить противогрибковую активность неонатальных моноцитов против Candida albicans (Gioulekas et al., 2001). Обработка неонатальных моноцитов полиненасыщенными жирными кислотами (ПНЖК) индуцировала активацию каспаз 3, 8 и 9 и усиление апоптоза моноцитов (Sweeney et al., 2007). ПНЖК оказывали дозозависимый эффект на выживаемость моноцитов пуповинной крови и при более высоких концентрациях (> 100 мкМ) вызывали глубокую гибель клеток (Sweeney et al., 2001). Это говорит о том, что питание матери, включая ПНЖК, может влиять на иммунный ответ у новорожденных. Удаление иммунных эффекторных клеток после устранения патогенов имеет решающее значение для предотвращения устойчивого воспаления и связанных с ним нарушений. Гибель клеток, индуцированная фагоцитами (PICD), объясняет это эффективное удаление иммунных эффекторов. При инфицировании E. coli в моноцитах пуповинной крови наблюдалось снижение PICD, которое характеризовалось сниженной экспрессией каспазы 8, каспазы 9 и CD95L после фагоцитоза (Gille et al., 2008). В моноцитах пуповинной крови новорожденных была обнаружена повышенная регуляция антиапоптотических белков Bcl-XL, что уменьшало PICD и поддерживало воспаление у новорожденных (Leiber et al., 2014).

Опосредованный TLR воспалительный ответ по-разному регулируется разными патогенами. Дифференциальная экспрессия TLR2 и TLR4 наблюдалась в стимулированной пуповинной крови и периферической крови с различными патогенами (Sugitharini et al., 2014). После стимуляции TLR-лигандами, такими как LPS и бактериальные липопротеины, неонатальные моноциты вырабатывали сниженный уровень TNF-α по сравнению со взрослыми, но в ответ на TLR7 / 8-лиганд R-848 (резиквимод) высвобождение TNF-α было одинаковым из новорожденных и взрослых моноцитов (Levy и другие., 2004). Продукция IL-10 мононуклеарными лейкоцитами крови новорожденных человека была снижена после стимуляции LPS / TNF-α, и это может быть связано со снижением рецепторов TNF-α и продукции TNF-α неонатальными моноцитами (Chheda et al., 1996). Напротив, стимулированные LPS / IFN-γ клетки линии моноцитов от новорожденных жеребят продуцируют больше IL-10, чем взрослые особи, и не было значительной разницы в уровнях IL12p35 и IL12p40 (Sponseller et al., 2009). Экзогенный IL-10, добавленный к LPS-стимулированным моноцитам, ингибировал высвобождение провоспалительных цитокинов и активность связывания ДНК активаторного белка-1, одновременно увеличивая ядерное фосфорилирование STAT-3 (Chusid et al., 2010). Другое исследование показало, что мононуклеарные клетки пуповинной крови новорожденных продуцируют сопоставимые уровни IL-6, IL-1β, IL-10, IL-13, меньшего количества IL-23, MCP-1 и более высокого уровня IL-8, чем взрослые клетки (Sugitharini et al. ., 2014). Агонисты TLR8, имидазохинолины, индуцировали активацию транскриптома пути TLR и продукцию цитокинов TNF-α и IL-1β Th2-типа из неонатальных моноцитов и MoDC через резистентные к аденозину и зависимые от каспазы 1 пути (Philbin et al., 2012). Активация ERK1 / 2 и NF-κβ была нарушена в субпопуляциях неонатальных моноцитов после стимуляции агонистами TLR.Внутриклеточный TNF в неклассических моноцитах недоношенных новорожденных был подавлен, и это функциональное подавление неклассических моноцитов способствует повышенной восприимчивости к бактериальным инфекциям (Wisgrill et al., 2016). Фосфорилирование STAT-6 с помощью IL-4 было сопоставимым в моноцитах новорожденных и взрослых (Nupponen et al., 2013). В ответ на R-848 фосфорилирование киназы p38 MAP также было сходным между новорожденными и взрослыми моноцитами (Levy et al., 2004). В ответ на TNF-α или бактериальную стимуляцию фосфорилирование NF-κβ было выше у недоношенных новорожденных, чем у доношенных.Фосфорилирование p38 было выше у всех новорожденных, тогда как фосфорилирование STAT-1 с помощью IFN-γ или IL-6, STAT-3 с помощью IL-6 и STAT-5 с помощью GM-CSF было снижено у всех новорожденных по сравнению со взрослыми (Nupponen et al. ., 2013). Это показывает глубокую активацию воспалительных путей у недоношенных и доношенных новорожденных, что может способствовать неоправданному воспалению и повреждению тканей.

Экспрессия генов, регулируемых регуляторным фактором-3 интерферона (IRF-3) или IFN типа I, в моноцитах пуповинной крови, стимулированных LPS или Listeria monocytogenes , была подавлена ​​по сравнению с взрослыми моноцитами (Lissner et al., 2015). Дефицит активности IRF-3 у новорожденных приводит к снижению экспрессии IFN-зависимых генов и ослабляет врожденный иммунный ответ против инфекций. Инфекция неонатальных моноцитов респираторным синцитиальным вирусом (RSV) стимулирует синтез IRF-1 и усиливает транскрипцию и трансляцию IL-1β, секретируя больше растворимого белка (Takeuchi et al., 1998). В ответ на различные типы вируса денге моноциты новорожденных вырабатывали меньшие уровни цитокинов TNF-α, IL-6 и IL-1β по сравнению со взрослыми (Valero et al., 2014). Параметры окислительного стресса, такие как NO, MDA и SOD, также были снижены в неонатальных моноцитах, что свидетельствует о снижении антиоксидантного ответа неонатальных моноцитов (Valero et al., 2013). Экспрессия рецептора CCR5 соответствовала повышенной восприимчивости неонатальных моноцитов / макрофагов к ВИЧ-инфекции (Zylla et al., 2003). Вакцинация БЦЖ улучшила жизнеспособность моноцитов и способствовала поглощению Mycobacterium tuberculosis , но не смогла повысить уничтожение проглоченного патогена (Sepulveda et al., 1997). Анализ экспрессии генов в первые 45 минут стимулирования LPS пуповинной крови и взрослых моноцитов показал дифференциальную экспрессию 168 генов, из которых 95% были сверхэкспрессированы у взрослых (Lawrence et al., 2007). Эта картина изменилась через два часа, поскольку несколько дифференциально экспрессируемых генов были более активными в моноцитах пуповинной крови, чем у взрослых. Это говорит о том, что экспрессия нескольких генов в неонатальных моноцитах задерживается, но быстро улучшается в течение короткого времени и достигает взрослого уровня (Lawrence et al., 2007).

Что такое белые кровяные тельца?

Ваша кровь состоит из эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов и плазмы.

Лейкоциты составляют лишь около 1% вашей крови, но их влияние велико. Лейкоциты также называют лейкоцитами. Они защищают вас от болезней и недугов.

Думайте о белых кровяных тельцах как о клетках иммунитета. В каком-то смысле они всегда находятся в состоянии войны. Они проходят через ваш кровоток, чтобы бороться с вирусами, бактериями и другими чужеродными захватчиками, которые угрожают вашему здоровью.Когда ваше тело находится в бедственном положении и определенная область подвергается атаке, белые кровяные тельца устремляются внутрь, чтобы помочь уничтожить вредное вещество и предотвратить болезнь.

Лейкоциты производятся в костном мозге. Они хранятся в вашей крови и лимфатических тканях. Поскольку некоторые белые кровяные тельца, называемые нейтрофилами, живут недолго, менее суток, ваш костный мозг всегда их производит.

Типы лейкоцитов

Среди ваших лейкоцитов:

• Моноциты. Они имеют более продолжительный срок жизни, чем многие белые кровяные тельца, и помогают разрушать бактерии.

• Лимфоциты. Они создают антитела для борьбы с бактериями, вирусами и другими потенциально опасными захватчиками.

• Нейтрофилы. Они убивают и переваривают бактерии и грибки. Это самый многочисленный тип белых кровяных телец и ваша первая линия защиты при поражении инфекции.

• Базофилы. Эти маленькие клетки, кажется, бьют тревогу, когда инфекционные агенты проникают в вашу кровь. Они выделяют химические вещества, такие как гистамин, маркер аллергического заболевания, которые помогают контролировать иммунный ответ организма.

• Эозинофилы. Они атакуют и убивают паразитов и раковые клетки, а также помогают при аллергических реакциях.

Проблемы, влияющие на лейкоциты

Количество лейкоцитов может быть низким по ряду причин.Это включает в себя случаи, когда что-то разрушает клетки быстрее, чем организм может их восполнить. Или когда костный мозг перестает вырабатывать достаточно белых кровяных телец, чтобы поддерживать ваше здоровье. Когда у вас низкий уровень лейкоцитов, вы подвергаетесь большому риску любого заболевания или инфекции, которые могут перерасти в серьезную угрозу для здоровья.

Ваш лечащий врач может сделать анализ крови, чтобы проверить, в норме ли у вас количество лейкоцитов. Если ваш показатель слишком низкий или слишком высокий, у вас может быть нарушение лейкоцитов.

На уровень лейкоцитов может влиять ряд заболеваний и состояний:

• Слабая иммунная система. Это часто вызвано такими заболеваниями, как ВИЧ / СПИД, или лечением рака. Лечение рака, такое как химиотерапия или лучевая терапия, может разрушить лейкоциты и подвергнуть вас риску заражения.

• Инфекция. Уровень лейкоцитов выше нормы обычно означает, что у вас какой-либо тип инфекции.Лейкоциты размножаются, чтобы уничтожить бактерии или вирус.

• Миелодиспластический синдром. Это состояние вызывает аномальное производство клеток крови. Это включает лейкоциты в костном мозге.

• Рак крови. Раковые заболевания, включая лейкоз и лимфому, могут вызывать неконтролируемый рост клеток крови аномального типа в костном мозге.Это приводит к значительному увеличению риска инфицирования или серьезного кровотечения.

• Миелопролиферативное заболевание. Это заболевание относится к различным состояниям, которые вызывают чрезмерное производство незрелых клеток крови. Это может привести к нездоровому балансу всех типов клеток крови в костном мозге и к слишком большому или слишком малому количеству белых кровяных телец в крови.

• Лекарства. Некоторые лекарства могут повышать или понижать количество лейкоцитов в организме.

Такие состояния, как экстремальный физический стресс, вызванный травмой или эмоциональным стрессом, также могут вызывать высокий уровень лейкоцитов. То же самое может быть с воспалением, родами или окончанием беременности, курением или даже экстремальными упражнениями.

Ювенильный миеломоноцитарный лейкоз (JMML) (для родителей)

Что такое ювенильный миеломоноцитарный лейкоз?

Ювенильный миеломоноцитарный лейкоз (ЮММЛ) — это редкий детский рак.Это происходит, когда незрелые клетки крови (так называемые бласты) производят слишком много миелоцитов и моноцитов (два типа белых кровяных телец). Эти миелоциты, моноциты и бласты переполняют нормальные клетки костного мозга и других органов тела, вызывая симптомы JMML.

Кто заболевает ювенильным миеломоноцитарным лейкозом?

Ювенильный миеломоноцитарный (mye-eh-low-mah-nuh-SIT-ik) лейкоз обычно встречается у детей младше 4 лет.

Каковы признаки и симптомы ювенильного миеломоноцитарного лейкоза?

JMML развивается с течением времени.Сначала у ребенка может быть очень мало симптомов, потому что на их развитие могут уйти месяцы.

Ребенок с ювенильным миеломоноцитарным лейкозом:

• развивается анемия, когда костный мозг не производит достаточного количества эритроцитов
• часто заражаются инфекциями (например, тонзиллитом), потому что белые кровяные тельца не борются с микробами, как обычно
• чувствовать усталость и слабость из-за анемии и инфекций
• имеют увеличенные лимфатические узлы из собранных раковых клеток
• имеют лихорадку от инфекций
• имеют легкие синяки или кровотечения, потому что костный мозг не производит достаточного количества тромбоцитов (клеток, которые помогают свертыванию)
• имеют боли в костях и суставах, потому что костный мозг полон аномальных клеток
• имеют боль в животе и отек, если аномальные клетки крови накапливаются в таких органах, как почки, печень и селезенка

Что вызывает ювенильный миеломоноцитарный лейкоз?

У многих детей с диагнозом «ювенильный миеломоноцитарный лейкоз» изменение генов (мутация).Изменение происходит в моноцитах (MAH-nuh-сайтах), которые являются частью иммунной системы.

Некоторые заболевания, такие как нейрофиброматоз 1 типа и синдром Нунана, могут повысить вероятность развития JMML у ребенка.

Как диагностируется ювенильный миеломоноцитарный лейкоз?

Врачи используют специальные тесты при подозрении на лейкоз. К ним относятся:

• Анализы крови. Такие анализы, как общий анализ крови, анализ функций печени и почек и биохимический анализ крови, могут дать важную информацию о количестве нормальных клеток крови и о том, насколько хорошо работают органы.Форму и размер клеток крови проверяют под микроскопом.
• Визуальные исследования. Они могут включать рентген, компьютерную томографию, МРТ или ультразвук. Они могут увидеть, есть ли в грудной клетке масса лейкозных клеток, которые могут повлиять на дыхание или кровообращение. Они также могут исключить другие возможные причины симптомов у ребенка.
• Аспирация и биопсия костного мозга. Врач вводит иглу в большую кость, обычно в бедро, и удаляет небольшое количество костного мозга.Затем лаборатория проводит эти тесты на образце костного мозга:
  • Проточная цитометрия. Врачи изучают раковые клетки и определяют тип лейкемии. Это важно, потому что лечение различается в зависимости от типа.
  • Генетические тесты. С помощью анализа крови или костного мозга врачи проверяют наличие изменений в генах. Изменения могут помочь врачам выбрать лучшее лечение.
• Спинальная пункция (люмбальная пункция). Врач с помощью небольшой полой иглы извлекает небольшое количество спинномозговой жидкости (жидкости, окружающей головной и спинной мозг) для исследования в лаборатории.
• Типирование тканей или HLA (человеческий лейкоцитарный антиген) типирование. Если ребенку нужна трансплантация стволовых клеток (пересадка костного мозга), этот тест помогает врачам найти подходящего донора стволовых клеток. Он работает путем сравнения белков на поверхности клеток крови ребенка с белками клеток потенциального донора. Чем больше маркеров HLA используется у ребенка и донора, тем выше шансы на успех трансплантации.

Как лечится ювенильный миеломоноцитарный лейкоз?

Химиотерапия (использование препаратов для уничтожения раковых клеток) может использоваться для временного контроля ювенильного миеломоноцитарного лейкоза.

Но самое эффективное лечение — это трансплантация стволовых клеток (костного мозга). Для этого врачей:

• Проведите высокодозную химиотерапию для уничтожения раковых клеток и нормальных клеток костного мозга и иммунной системы.
• Поместите в организм здоровые донорские стволовые клетки.Новые стволовые клетки могут восстановить здоровое кровоснабжение и иммунную систему.

Исследователи изучают возможность использования альтернативных методов лечения, таких как:

• Молекулярно-направленная терапия: эти лекарства замедляют рост раковых клеток, блокируя определенные молекулы или белки, которые помогают раковым клеткам расти.
• Иммунотерапия: эти лекарства маркируют раковые клетки, чтобы иммунная система организма могла их найти и удалить из организма.

Что еще мне следует знать?

Лечение ребенка от рака может стать стрессом для любой семьи.Но вы не одиноки. Чтобы получить поддержку, поговорите со своим врачом или социальным работником больницы. Доступно множество ресурсов, которые помогут вам пережить это трудное время. Вы также можете найти информацию и поддержку в Интернете по адресу:

Низкое количество лейкоцитов (нейтропения)

Лейкоциты борются с инфекцией. Нормальное количество лейкоцитов составляет от 5000 до 10000 клеток. Количество лейкоцитов ниже 1000 увеличивает риск заражения. В некоторых случаях вашему ребенку могут дать лекарство, такое как «G-CSF ( гранулоцитарно-колониестимулирующий фактор )», чтобы увеличить количество лейкоцитов в костном мозге.

Дифференциал

Различные типы лейкоцитов выполняют разные функции. «Дифференциал» — это часть отчета об анализе крови, который показывает распределение различных типов лейкоцитов в анализе крови вашего ребенка.

Нейтрофилы помогают бороться с бактериальными инфекциями.

Лимфоциты вырабатывают антитела для борьбы с инфекциями.

Моноциты помогают бороться с инфекцией, убивая и удаляя бактерии.

Базофилы и эозинофилы отвечают во время аллергической реакции.

Термин «АНК», что означает «Абсолютное количество нейтрофилов», означает общее количество нейтрофилов в количестве лейкоцитов вашего ребенка. Мы часто называем ANC подсчетом «борющихся с инфекциями». Чем ниже падает АНК, тем выше риск заражения. Когда АНК опускается ниже 500, риск заражения высок.

Значение ANC	Риск заражения
Меньше 500	Самый высокий
от 500 до 1000	Умеренная
Более 1000	Нижний

В большинстве отчетов по анализу крови вы увидите, что АНК уже рассчитана для вас.Вы также можете попросить своего поставщика медицинских услуг сообщить вам ANC. Чтобы рассчитать ANC самостоятельно, используйте эту формулу:

ANC = (% сегментов +% диапазонов) x WBC

Посмотрите на дифференциал вашего ребенка. Сложите процент сегментов (иногда называемых полисами или PMN) и полос (вместе они составляют количество нейтрофилов). Умножьте количество нейтрофилов на количество лейкоцитов (WBC).

Пример: WBC = 1000% сегментов = 20%% диапазонов = 1%

ANC = (% сегментов +% диапазонов) x WBC

ANC = (20% + 1%) x 1000

ANC = (0.21 х 1000)

ANC = 210 (высокий риск заражения)

Признаки инфекции

Хотя нет никаких внешних признаков низкого количества лейкоцитов, важно знать время, когда низкие показатели крови после химиотерапии. Каждый раз, когда ваш ребенок получает химиотерапию, вы должны поговорить с медсестрой о сроках низких показателей.)

Немедленно позвоните своему врачу, если вы заметили какие-либо признаки инфекции, в том числе:

• Лихорадка
• Озноб
• Кашель
• Проблемы с дыханием
• Диарея
• Боль

Если у вашего ребенка есть центральное венозное устройство доступа (центральная линия или порт), проверьте, нет ли в этом месте покраснения, отека, боли или гноя.У ребенка с низким уровнем ДРП может не быть покраснения или гноя, но инфекция все равно может быть обнаружена.

Иммунные ответы на SARS-CoV-2 у трех детей родителей с симптоматическим обнаружением COVID-19

SARS-CoV-2

РНК была извлечена вручную из 140 мкл мазков NP и слюны, 280 мкл мочи и плазмы и 140 мкл 20% (мас. / Об.) Фекальной суспензии ²⁴ , а затем элюировали в 50-60 мкл стерильной молекулярной воды (Life Technologies, Австралия) с использованием набора вирусной РНК QIAamp (QIAgen GmbH, Хильден, Германия) в соответствии с инструкции производителя.Ранее опубликованный протокол ОТ-ПЦР, нацеленный на ген RdRp, был использован на ABI 7500 ²⁵ . Нуклеотидные последовательности праймеров и зонда показаны в дополнительной таблице 2. Стандарт SARS-CoV-2 (Exact Diagnostic, США) использовали в качестве положительного контроля для ПЦР. Респираторная панель была проведена диагностической вирусной панелью.

Плазма S1 и RBD ELISA

Метод ELISA, используемый для измерения уровней IgG, IgM и IgA к SARS-COV-2 S1 и белку RBD, был основан на Amanat et al. ²⁶ . Вкратце, 96-луночные планшеты с высоким уровнем связывания (Thermo Fisher Scientific) покрывали S1 или RBD (Sino Biological), разведенными в PBS при 2 мкг / мл, а затем инкубировали при 4 ° C в течение ночи. На следующий день планшеты промывали PBS, содержащим 0,1% (об. / Об.) Tween20 (PBS-T), и блокировали PBS, содержащим 0,1% Tween и 10% (мас. / Об.) Обезжиренного молока (PBS-TSM), в течение 1 ч при температуре комнатная температура (RT). Серийные разведения (3-кратные) образцов плазмы готовили в PBS-TSM, начиная с 1:50. Во всех анализах использовали положительный контроль (образец выздоравливающего) и отрицательный контроль (препандемический).Блокирующий раствор удаляли и в планшеты добавляли по 100 мкл каждого серийного разведения на 2 ч при комнатной температуре. Затем планшеты промывали трижды по 200 мкл на лунку PBS-T. Вторичное антитело, конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козьих антител против человеческого IgG- (1:10 000) или IgM- (1: 5 000) (Southern Biotech), получали в PBS-TSM, и 50 мкл этого вторичного антитела добавляли в каждую лунку. за 1 ч. Для IgA 50 мкл биотинилированного IgA (1: 5000) разводили в PBS-T и добавляли в каждую лунку на 1 час с последующим добавлением стрептавидин-HRP в каждую лунку на 30 минут.Планшеты промывали PBS-T, затем дистиллированной водой и добавляли 50 мкл раствора субстрата 3,3 ‘, 5,5’-тетраметилбензидина (TMB, Sera Care) на 9 мин. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл 1 М фосфорной кислоты и измеряли оптическую плотность с использованием считывающего устройства для микропланшетов (Bio-Tek) при 450 нм (эталонный фильтр 630 нм). Конечные титры рассчитывали после коррекции фона соответствующей реактивности отрицательного контроля в каждом анализе.

Белок S1 слюны ELISA

Слюну, собранную под языком, слили в пробирку на 50 мл и хранили при -80 ° C до анализа.96-луночные планшеты для ELISA Immuno MaxiSorp (Thermo Fisher Scientific) покрывали в течение ночи при 4 ° C 2 мкг / мл рекомбинантного белка SARS-CoV-2/2019-nCoV S1 (Sino Biologicals), разведенного в PBS. Лунки блокировали 10% обезжиренным молоком в PBST (PBS + 0,1% Tween 20) при комнатной температуре в течение 1 часа. Двухкратные серийные разведения образцов слюны в PBST переносили в планшеты для ELISA (в двух экземплярах) и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа. В качестве отрицательного контроля использовалась слюна бессимптомного человека, у которого клинические испытания подтвердили отрицательный результат на SARS-CoV-2.Слюна выздоравливающего человека, недавно инфицированного SARS-CoV-2, использовалась в качестве положительного контроля. Связывание антител детектировали с помощью биотинилированного античеловеческого IgA (1: 5000; Sigma-Aldrich) и IgG (1: 10 000; аналитическая матрица) в течение 1 часа при комнатной температуре, затем стрептавидин-HRP (1: 5000; Life technologies) в PBST. в течение 45 мин при комнатной температуре. Цвет проявляли с помощью раствора TMB (Sigma-Aldrich) и H ₂ O ₂ с остановкой реакции с использованием 2 M H ₂ SO ₄ .Поглощение при 450 нм считывали на считывающем устройстве для микропланшетов. Примеры титрований показаны на дополнительном рисунке 2. Значения OD для слюны отрицательного контроля вычитали из тестируемых образцов при каждом разведении, затем рассчитывали конечные титры.

Анализ микронейтрализации

Изолят SARS-CoV-2 CoV / Australia / VIC01 / 2020 ²⁷ , пассированный в клетках Vero, хранили при -80 ° C.

Серийные двукратные разведения инактивированной нагреванием плазмы инкубировали с 100 TCID ₅₀ SARS-CoV-2 в течение 1 ч и оценивали остаточную вирусную инфекционность в четырехкратных повторностях лунок клеток Vero; вирусный цитопатический эффект определяли на 5-й день.Титр нейтрализующих антител рассчитывают с использованием метода Рида / Мюнча ^28,29 .

Системная серология

Здоровые участники . Детей соответствующего возраста, перенесших плановую тонзиллэктомию (возраст 5–9), набирали в больницу общего профиля в Лонсестоне (Тасмания), и, помимо соответствия критериям тонзиллэктомии, они считались в остальном здоровыми и не демонстрировали признаков иммунного нарушения. Здоровые взрослые доноры (возраст 36–48) были привлечены через Мельбурнский университет.Все здоровые доноры были набраны до пандемии SARS-CoV-2. Гепаринизированную кровь центрифугировали в течение 10 мин при 300 g для сбора плазмы, которую замораживали при -20 ° C до тех пор, пока она не потребуется.

Соединение карбоксилированных шариков . Был разработан заказной мультиплексный анализ CoV ³⁰ с SARS-CoV-2 Spike 1 (Sino Biological), SARS-CoV-2 Spike 2, SARS-CoV Spike 1 (ACRO Biosystems, США) и hCoV (229E, NL63). , OC43) (Sino Biologicals), а также SARS-CoV-2 RBD (произведенный в соответствии с HHSN272201400008C и полученный через BEI Resources, NIAID, NIH USA), SARS-CoV RBD (подарок от Дейла Годфри) и оба SARS-CoV- 2 и тримерные шипы HKU1 (подарок Адама Уитли).Столбнячный анатоксин (Sigma Aldrich) и гемагглютинин гриппа (h2Cal2009; Sino Biological) также были добавлены в анализ в качестве положительного контроля. Антигены ковалентно связывали с магнитными карбоксилированными шариками (Bio Rad) с использованием двухступенчатой ​​карбодиимидной реакции и блокировали 0,1% BSA перед ресуспендированием и хранением в 0,05% азиде натрия PBS для использования.

Мультиплексный анализ на основе шариков Luminex . Изотипы и подклассы патоген-специфических антител, присутствующих в собранной плазме, оценивали с использованием описанного выше мультиплексного анализа ³⁰ .Вкратце, 20 мкл рабочей смеси шариков (1000 шариков на область шариков) и 20 мкл разбавленной плазмы (конечное разведение 1: 100) добавляли на лунку и инкубировали в течение ночи при 4 ° C на шейкере. Патоген-специфические антитела выявляли с помощью 14 различных детекторов. Одноэтапное обнаружение проводили с использованием конъюгированных с фикоэритрином (РЕ) мышиных антител к человеческому pan-IgG, IgG1-4, IgA1-2 (Southern Biotech; 1,3 мкг / мл, 25 мкл / лунку), при этом детекторы добавляли к шарикам. , промытый, затем прочитанный MagPix. Белок C1q (MP Biomedicals, США) сначала был биотинилирован (Thermo Fisher Scientific, США), затем тетрамеризован стрептавидином R-PE (SAPE; Thermo Fisher Scientific) перед тем, как димеры или тетрамерный C1q-PE использовались в одноэтапной детекции.Для обнаружения связывания FcγR проводили двухэтапное обнаружение, сначала добавляя растворимые рекомбинантные димеры FcγR (полиморфизмы с более высоким сродством FcγRIIa-h231, полиморфизмы с более низким сродством FcγRIIa-R131, FcγRIIb, полиморфизмы с более высоким сродством FcγRIIIa, аффинные полиморфизмы FcγRIIIa-V158 с более низким сродством. F158; 1,3 мкг / мл, 25 мкл / лунка; подарок от Bruce Wines и Mark Hogarth) на шарики, промывание с последующим добавлением SAPE. Аналогичным образом, для IgM было выполнено двухэтапное обнаружение с использованием биотинилированного мышиного антитела против человеческого IgM (mAb MT22; MabTech; 1.3 мкг / мл, 25 мкл / лунка;), а затем SAPE. Анализы повторяли в двух экземплярах.

Предварительная обработка данных для системного серологического анализа . В многофакторном анализе были удалены антигены положительного контроля (столбняк и h2Cal2009). Все дни посещения использовались для каждого человека. Данные были сдвинуты вправо, а затем логарифмически преобразованы (log10 (x + 1)). Сдвиг вправо выполнялся для каждого признака (пара детектор-антиген), который содержал отрицательные значения индивидуально, путем добавления минимального значения для этого признака ко всем образцам внутри этого признака.Для всего многомерного анализа данные были центрированы по среднему значению, а дисперсия масштабирована для каждой функции с использованием функции z-score в Matlab.

Выбор функций . Чтобы определить минимальный набор признаков (сигнатур), необходимых для классификации различных когорт, был использован трехэтапный процесс на основе ³¹ . Сначала данные были отобраны случайным образом без замены для генерации 2000 подмножеств. Все классы были повторно выбраны по размеру самого маленького класса для категориальных исходов, что позволило скорректировать любые потенциальные эффекты дисбаланса размера классов во время регуляризации.Затем регуляризация Elastic-Net была применена к каждому из 2000 повторно выбранных подмножеств, чтобы выбрать функции, наиболее связанные с классификациями когорт. Гиперпараметр Elastic-Net, альфа, был установлен так, чтобы иметь равные веса между нормой L1 и нормой L2, связанной с функцией штрафа для наименьшего абсолютного сжатия и выбора (LASSO) и регрессии гребня, соответственно, что позволяет лучше анализировать коллинеарные данные, который может быть исключен в регрессии LASSO ³² . Частота, с которой каждая функция была выбрана на протяжении 2000 итераций, использовалась для определения сигнатур с помощью последовательного пошагового алгоритма, который итеративно добавлял одну функцию в модель PLSDA, начиная с функции, которая имела наибольшую частоту выбора, к модели. самая низкая частота отбора.Эффективность прогнозирования модели оценивалась на каждом этапе и оценивалась 10-кратной ошибкой классификации перекрестной проверки. Модель с наименьшей ошибкой классификации в пределах 0,01 разницы между минимальной ошибкой классификации была выбрана в качестве минимальной сигнатуры. Если была выбрана только одна функция, выбирался следующий лучший набор функций. Если все последовательные наборы функций были эквивалентны, выбирался наименьший или наибольший набор функций на основе интерпретируемости

PLSDA .Дискриминантный анализ частичных наименьших квадратов (PLSDA), выполняемый в наборе инструментов Eigenvectors PLS в Matlab, использовался вместе с Elastic-Net, описанным выше, для идентификации и визуализации сигнатур, которые различают когорты. Этот контролируемый метод назначает загрузку каждой функции в пределах данной сигнатуры и определяет линейную комбинацию нагрузок (скрытую переменную), которая наилучшим образом разделяет категориальные группы. Особенность с высокой величиной нагрузки указывает на большую важность отделения групп друг от друга.Затем каждый образец оценивается и наносится на график с использованием измерений индивидуального ответа, выраженного через латентные переменные (LV). Затем оценки и нагрузки могут быть сопоставлены, чтобы определить, какие функции загружены в ассоциации с какими категориальными группами (положительно загруженные функции выше в группах с положительной оценкой и т. Д.). Все модели создаются с 10-кратной перекрестной проверкой, при которой итеративно 10% данных не используются в качестве тестового набора, а остальные используются для обучения модели. Производительность модели измеряется с помощью ошибки калибровки (средняя ошибка в обучающем наборе), а также ошибки перекрестной проверки (средняя ошибка в тестовом наборе), при этом значения, близкие к нулю, являются наилучшими.Все модели были отроногонализированы, чтобы обеспечить четкую визуализацию результатов.

Иерархическая кластеризация . Кластеризация классификации когорт была визуализирована для когорты здоровых и домохозяйств и основана на их выбранных признаках, описанных выше, с использованием неконтролируемой иерархической кластеризации средней связи данных с z-оценкой. Евклидово расстояние использовалось в качестве метрики расстояния.

Программное обеспечение . Модели PLSDA были завершены с использованием набора инструментов Eigenvector PLS в Matlab.Иерархическая кластеризация была завершена с использованием MATLAB 2017b (MathWorks, Натик, Массачусетс). Графики оценок PLSDA и нагрузок были построены в Prism версии 8.0.0.

Проточная цитометрия PBMC и цельной крови

Кровь собирали в пробирки с ЭДТА от каждого участника на 12, 37 и 88 день. Сразу после сбора 100 мкл цельной крови отбирали аликвотами для анализа проточной цитометрией. Оставшиеся образцы крови с ЭДТА преобразовали в плазму и РВМС ³³ . Для анализа образцов цельной крови проточной цитометрией цельную кровь лизировали 1 мл буфера для лизиса эритроцитов в течение 10 мин при комнатной температуре.Клетки промывали 1 мл PBS и центрифугировали при 350 × g в течение 5 мин. После еще двух промывок клетки ресуспендировали в PBS для окрашивания жизнеспособности с использованием красителя для определения жизнеспособности в ближнем инфракрасном диапазоне в соответствии с инструкциями производителя. Для анализа проточной цитометрии свежевыделенных РВМС клетки промывали 1 мл PBS перед окрашиванием жизнеспособности с использованием красителя для определения жизнеспособности BV510 в соответствии с инструкциями производителя. Как для образцов цельной крови, так и для образцов PBMC, реакцию окрашивания жизнеспособности останавливали добавлением буфера FACS (2% термоинактивированной FCS в 2 мМ PBS EDTA), и клетки центрифугировали при 350 × g в течение 5 минут.Затем клетки ресуспендировали в человеческом FC-блоке в соответствии с инструкциями производителя в течение 5 минут при комнатной температуре. К коктейлям цельной крови или антител РВМС (дополнительная таблица 1), полученным при 2-кратной концентрации, добавляли 1: 1 с клетками и инкубировали в течение 30 мин на льду. После окрашивания клетки промывали 2 мл буфера FACS и центрифугировали при 350 × g в течение 5 минут. Затем клетки ресуспендировали в 2% PFA для фиксации на льду в течение 20 минут, промывали и ресуспендировали в 150 мкл буфера FACS для сбора с использованием BD LSR X-20 Fortessa.Для всех экспериментов по проточной цитометрии компенсация выполнялась во время сбора образца с использованием компенсационных шариков. На дополнительном рисунке 1 изображена стратегия ручного стробирования для образцов PBMC и цельной крови.

Результаты были проанализированы (ручное стробирование и анализ tSNE) с использованием программного обеспечения FlowJo Version 10.6. Графики tSNE были созданы из объединенного файла, содержащего 300 000 событий (20 000 случайно выбранных живых одиночных клеток на пациента на момент времени). Результаты, введенные вручную, представлены в виде доли живых клеток или доли родительских ворот (для PBMC) или доли лейкоцитов (для цельной крови).Данные были построены в Prism версии 8.0.0.

Цитокины плазмы

Плазму разводили 1: 2 и 1: 4 для оценки цитокинов с использованием гибких наборов бусин для цитометрии растворимого белка человека (BD Biosciences) в соответствии с инструкциями производителя. Данные цитометрического массива шариков были получены на BD LSR II X-20 Fortessa и проанализированы с использованием программного обеспечения FCAP Array. Были определены следующие 18 цитокинов: IL-1α, IL-1β, IL-6, IFNα, TNFα, MIP-1α, MCP-1, IL-8, RANTES, IL-12p70, IL-10, IL-2, IL -5, IL-5, IL-9, IL-13, IFNγ и IL-17A.Все цитокины, за исключением IL-8, MCP-1 и RANTES, упали ниже предела обнаружения анализа в обоих разведениях и были исключены из будущего анализа. Результаты представлены в пг / мл и нанесены на график с использованием Prism версии 8.0.0.

Этика

Экспериментальная работа на людях проводилась в соответствии с принципами Хельсинкской декларации и Кодексом правил Австралийского национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям. Все доноры или их законные опекуны дали письменное информированное согласие.Исследование было одобрено Комитетом по этике исследований на людях (HREC) Университета Мельбурна (этический идентификатор # 1443389.4, # 2056761, # 1647326, # 2056689, # 1955465) для здоровых взрослых, Tasmanian Health and Medical HREC (H0017479) для здоровых детские доноры. Что касается тематического исследования семьи, этот проект получил этическое одобрение Комитета по этике исследований на людях Королевской детской больницы Мельбурна (HREC): HREC / 63666 / RCHM-2019.

Краткое изложение отчета

Дополнительная информация о дизайне исследования доступна в Резюме отчета об исследовании природы, связанном с этой статьей.

Клинические рекомендации: интерпретация CSF

См. Также

Менингит и энцефалит
Менингококковая инфекция
Люмбальная пункция
Руководство по противомикробным препаратам

Это руководство призвано помочь в интерпретации результатов ЦСЖ с целью диагностики или исключения менингита.Использование спинномозговой жидкости для других целей (включая диагностику конкретных неврологических состояний, субарахноидального кровотечения или злокачественных новообразований) выходит за рамки его компетенции.

Ключевые моменты

1. Нормальные параметры спинномозговой жидкости меняются с возрастом
2. Присутствие нейтрофилов в спинномозговой жидкости необычно для нормальных детей и должно вызывать опасения по поводу бактериального менингита.
3. В случае травматического постукивания правила, основанные на прогнозируемом количестве лейкоцитов в CSF, не являются надежными.
4. Если СМЖ не соответствует норме, безопаснее всего лечить, как если бы это был бактериальный менингит
   

Нормальные значения

	Белый количество ячеек		Биохимия
Возраст	нейтрофилы (x 10 6 / л)	Лимфоциты (x 10 6 / л)	Белок (г / л)	Глюкоза CSF: кровь коэффициент (всего )
<1 месяц	0 *	<22	<1.0	≥0,6 (или ≥2.0 ммоль / л)
> 1 месяца	0	≤5	<0,4	≥0.6 (или ≥2,5 ммоль / л)

* Некоторые исследования показали, что до 5% лейкоцитов у новорожденных без менингита содержат нейтрофилы.

Менингит может развиться у детей при нормальной микроскопии спинномозговой жидкости.

Если есть высокое клиническое подозрение на менингит, у детей с нормальным СМЖ все еще следует лечить внутривенным введением антибиотиков в ожидании посева.

Количество лейкоцитов и уровень белка в спинномозговой жидкости выше при рождении и довольно быстро падают в первые 2 недели жизни.

Толкование аномальных результатов

	Количество лейкоцитов		Биохимия
	нейтрофилы (x 10 6 / л)	Лимфоциты (x 10 6 / л)	Белок (г / л)	Глюкоза (соотношение ЦСЖ: кровь)
Бактериальный менингит	100–10 000 (но может и нормально)	Обычно <100	> 1.0 (но может и нормально)	<0,4 (но может быть нормальным)
Вирусный менингит	Обычно <100	10–1000 (но может и нормально)	0.4–1,0 (но может и нормально)	Обычно нормально
Туберкулезный менингит	Обычно <100	50–1000 (но может и нормально)	1.0–5,0 (но может и нормально)	<0,3 (но может быть нормальным)

• Окраска по Граму может быть отрицательной в 60% случаев бактериального менингита, даже без предшествующих антибиотиков
• Преобладание лимфоцитов не исключает бактериальный менингит
• Нейтрофилы могут преобладать при вирусном менингите даже после первых 24 часов
• Если СМЖ отклоняется от нормы, самым безопасным курсом является лечение бактериального менингит
  

Прочие факторы, влияющие на результаты

Антибиотики до люмбальная пункция

• Антибиотики вряд ли существенно повлияют на количество клеток спинномозговой жидкости или биохимию в взятых образцах. <24 часов после введения
• Антибиотики предшествующего уровня, как правило, предотвращают культивирование бактерий из спинномозговой жидкости

Изъятия

• Занятия не вызывают увеличения количества ячеек CSF

Травматический (кровь морилка) кран

• Самая безопасная интерпретация травматического постукивания — это подсчитать общее количество белых клеток и пренебречь подсчетом красных кровяных телец .Если количество лейкоцитов превышает норму для возраста, то самым безопасным вариантом является лечение.
• Некоторые руководящие принципы предполагают, что при травматических ударах количество лейкоцитов и белка можно скорректировать на основе следующего расчета: 1 лейкоцит на каждые 500–700 эритроцитов и 0,01 г / л белка на каждые 1000 эритроцитов. Однако это ненадежно
• Рассмотреть субарахноидальное кровоизлияние при наличии необъяснимых или стойких эритроцитов в спинномозговой жидкости.
  

Время между отбором пробы и анализ

• Задержки с лабораторным анализом спинномозговой жидкости могут изменить количество клеток в результате лизиса спинномозговой жидкости.Через 4 часа наблюдается прогрессивное снижение нейтрофилов и лимфоцитов.

Дополнительные тесты

PCR

• ПЦР обычно доступна для Neisseria meningitidis , Streptococcus pneumoniae , вирус простого герпеса (ВПГ), энтеровирус и пареховирус
• Поскольку результаты не доступны сразу, они помогают только в принятии решения о прекращении лечения
• Менингококковая ПЦР особенно полезна у пациентов с клинической картиной, соответствующей менингококковому менингиту, но ранее получавших антибиотики
• ПЦР на ВПГ следует запрашивать у пациентов с клиническими признаками энцефалита.Он может быть ложноотрицательным в первые 36–72 часа болезни.