Как делают электрофорез грудничку: Электрофорез для детей в Нижнем Новгороде в клинике Тонус КРОХА, электрофорез для грудничка, электрофорез цена

Содержание

MACROCLINIC – медицинский центр. Профессиональная помощь рядом!

[Bitrix\Main\ArgumentException] 
IblockProperty178 Entity has no `VALUE` field. (100)
/home/bitrix/www/bitrix/modules/main/lib/orm/entity.php:550
#0: Bitrix\Main\ORM\Entity->getField(string)
	/home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/property.php:132
#1: Bitrix\Iblock\Property->getValueEntity(object)
	/home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/iblocktable.php:387
#2: Bitrix\Iblock\IblockTable::compileEntity(string)
	/home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/orm/loader.php:38
#3: Bitrix\Iblock\ORM\Loader::autoLoad(string)
	
#4: spl_autoload_call(string)
	/home/bitrix/www/local/templates/.default/components/bitrix/catalog.element/services/result_modifier.php:21
#5: include(string)
	/home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component_template.php:946
#6: CBitrixComponentTemplate->__IncludeMutatorFile(array, array)
	/home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component_template.php:853
#7: CBitrixComponentTemplate->IncludeTemplate(array)
	/home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.
php:764 #8: CBitrixComponent->showComponentTemplate() /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.php:712 #9: CBitrixComponent->includeComponentTemplate() /home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/component/base.php:4572 #10: Bitrix\Iblock\Component\Base->loadData() /home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/component/base.php:4551 #11: Bitrix\Iblock\Component\Base->initialLoadAction() /home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/component/element.php:271 #12: Bitrix\Iblock\Component\Element->initialLoadAction() #13: call_user_func(array) /home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/component/base.php:4736 #14: Bitrix\Iblock\Component\Base->doAction() /home/bitrix/www/bitrix/modules/iblock/lib/component/base.php:4754 #15: Bitrix\Iblock\Component\Base->executeComponent() /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.php:656 #16: CBitrixComponent->includeComponent(string, array, object, boolean) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/main.
php:1063 #17: CAllMain->IncludeComponent(string, string, array, object) /home/bitrix/www/local/templates/.default/components/bitrix/catalog/services/element.php:210 #18: include(string) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component_template.php:789 #19: CBitrixComponentTemplate->__IncludePHPTemplate(array, array, string) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component_template.php:884 #20: CBitrixComponentTemplate->IncludeTemplate(array) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.php:764 #21: CBitrixComponent->showComponentTemplate() /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.php:712 #22: CBitrixComponent->includeComponentTemplate(string) /home/bitrix/www/bitrix/components/bitrix/catalog/component.php:171 #23: include(string) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.php:605 #24: CBitrixComponent->__includeComponent() /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/component.
php:680 #25: CBitrixComponent->includeComponent(string, array, boolean, boolean) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/classes/general/main.php:1063 #26: CAllMain->IncludeComponent(string, string, array, boolean) /home/bitrix/www/services/index.php:161 #27: include_once(string) /home/bitrix/www/bitrix/modules/main/include/urlrewrite.php:159 #28: include_once(string) /home/bitrix/www/bitrix/urlrewrite.php:2

Электрофорез гемоглобина для диагностики гемоглобинопатий

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5 % гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов): 2α и 2β, каждая из которых связана с гемом. Гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Посредством электрофореза гемоглобина можно проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина.

При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Синонимы английские

Serum Hemoglobin Electrophoresis.

Метод исследования

Электрофорез и денситометрия.

Единицы измерения

Мг/дл (миллиграмм на децилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5 % гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов) — 2α и 2β, — каждая из которых связана с гемом. HbA обеспечивает адекватный газообмен и тканевую оксигенацию. Фракция HbA2 — второстепенная форма гемоглобина, имеет формулу 2α2δ. Также у взрослого допустимо наличие следовых количеств фетального гемоглобина HbF (2α2γ), который является преобладающей фракцией в течение внутриутробного периода. В течение первых 6 месяцев жизни HbF замещается HbA.

Нарушения структуры гемоглобина обычно разделяют на две группы: гемоглобинопатии и талассемии, хотя талассемии являются формой гемоглобинопатии. Талассемии представляют собой нарушения синтеза α-, β- или обеих цепей гемоглобина. Также могут отмечаться нарушения синтеза δ-, γ- цепей. Большинство вариантов α- и β-талассемий сопровождается изменением уровня HbF и HbA2, поэтому определение этих изоформ может быть использовано для скрининга этих состояний.

Остальные гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Наиболее распространённые и клинически значимые аномальные варианты гемоглобина: S, D, E, C. Варианты HbS и HbD  — патологические формы гемоглобина, которые обладают идентичной миграцией в щелочном геле и являются результатом точечных мутаций гена, кодирующего β-глобин. Варианты Е и С при данном методе мигрируют в составе фракции HbA

2, при их наличии фракция HbA2 достигает более 25 %. Наибольшее клиническое значение представляет HbS-вариант, который приводит к серповидноклеточной анемии.

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина. При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Электрофорез является чувствительным методом, с помощью которого можно исключить гемоглобинопатии либо определить тактику дальнейшего обследования для установления точного диагноза заболевания. Метод характеризуется высокой внутрипостановочной (SD

Метод исследования основан на электрофорезе гемоглобина, полученного при лизисе отмытых эритроцитов обследуемого. После разделения гемоглобина на фракции производится окрашивание зон миграции. Содержание гемоглобина в составе фракций измеряется с помощью цифровой денситометрии.

Когда назначается исследование?

  • Скрининг гемоглобинопатий;
  • наличие семейного анамнеза гемоглобинопатий, планирование семьи;
  • микроцитарная анемия, не связанная с дефицитом железа;
  • гемолитическая анемия неустановленной этиологии;
  • обнаружение изменённых эритроцитов (серповидная деформация) при микроскопическом исследовании крови.

Что означают результаты?

Референсные значения

Компонент

Возраст

Референсные значения, %

Гемоглобин HbA

5,9 — 77,2

1 — 3 мес.

7,9 — 92,4

3 — 6 мес.

54,7 — 97,1

6 — 9 мес.

80,0 — 98,0

9 — 13 мес.

86,2 — 98,0

13 — 24 мес.

88,8 — 98,0

> 2 лет

≥ 96,50

Гемоглобин HbA2

0,0 — 2,1

1 — 3 мес.

0,0 — 2,6

3 — 6 мес.

1,3 — 3,1

6 — 24 мес.

2,0 — 3,3

> 2 лет

≤ 3,5

Гемоглобин HbF

22,8 — 92,0

1 — 3 мес.

7,6 — 89,8

3 — 6 мес.

1,6 — 42,2

6 — 9 мес.

0,0 — 16,7

9 — 13 мес.

0,0 — 10,5

13 — 18 мес.

0,0 — 7,9

18 — 24 мес.

0,0 — 6,3

> 2 лет

Аномальные варианты гемоглобина

 

Не обнаружены

Заключение

 

Уровень HbA, HbA2, HbF cоответствует возрастным нормам, патологические формы гемоглобина не выявлены

цены от 300 руб., адреса из 255 клиник, 37008 отзывов, запись онлайн – НаПоправку

БЛАГОДАРНОСТЬ Институту Алмазова! ЭТО ФАБРИКА ЗДОРОВЬЯ!

Я, Бунегин Константин Геннадьевич, был госпитализирован в начале сентября 2016г. в ФГБУ «Северо-западный федеральный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова Минздрава России с диагнозом ДДЗП поясничного отдела позвоночника; секвестрированная грыжа межпозвонкового диска L4-L5, радикулопатия L5, S1 справа. Болел я долго — целых 4 месяца, не мог ходить, потому что очень сильной была боль в правой ноге. За время болезни испробовал разные консервативные методы лечения: и капельницы, и обезболивающее в огромных количествах, и пиявки, и электрофорез, и иглоукалывание.Все оказалось тщетным. Считаю большим счастьем встречу с замечательным нейрохирургом Щербининым Антоном Владимировичем, который правильно по данным МРТ установил мне диагноз и, после всех моих отчаянных попыток встать на ноги, убедил обратиться за помощью в центр им. В.А. Алмазова. Хочу выразить слова признательности ему за это. Антон Владимирович — профессионал своего дела, специалист высокого уровня, очень комфортный в общении человек. Выражаю большую благодарность всему медицинскому персоналу отделения нейрохирургии № 6 (ЛРК № 2) во главе с заведующим Пальцевым Артемом Александровичем, потому что под руководством такого исключительного человека может собраться исключительная команда единомышленников, болеющих за одно дело и старающихся не подводить руководство. Этот медицинский коллектив в целом и каждый работник в отдельности находится на своем месте и своим трудом вносит свою лепту в оздоровление пациентов, находящихся в нейрохирургическом отделении № 6 центра, на каком бы посту они не находились, начиная от начальника и заканчивая уборщицей. Только работая в таком коллективе можно добиться таких высоких профессиональных результатов! Низкий поклон и отдельная безмерная благодарность нейрохирургу Коваленко Роману Александровичу, анестезиологу («Кислородиком подышим!»), операционному координатору (к сожалению, не запомнил фамилию) и другим врачам за их золотые руки, ум, талант, доброту, за проведенную мне операцию 09 сентября 2016 – микрохирургическое удаление грыжи диска! Я на ногах! Хожу без боли! Медицинский центр замечательный! Обслуживание больных нейрохирургического отделения № 6 и поддерживаемая чистота в нем выше всяких похвал, грамотно подобран коллектив высокообразованных врачей-специалистов, бригады медицинских сестер, уборщиц помещений, повара!!! Весь персонал доброжелателен и приветлив. Спасибо огромное и низкий поклон сестричкам, старшей сестре, сестре-хозяйке, санитаркам, буфетчицам за чуткое и внимательное отношение, за доброту и поддержку, за теплые слова и заботу, за приветливые улыбки, за переживание к страждущим. Большое Вам спасибо за то, что Вы есть и так беззаветно и успешно лечите больных людей. Откровенно говоря, поражен такому высокому уровню медицинского обслуживания в нашей стране, в нашем Санкт-Петербурге, который имеет место быть в Вашем нейрохирургическом отделении № 6. Большого Вам человеческого счастья, здоровья, профессионального роста! На Вашем нейрохирургическом отделении работает молодая, динамичная, быстро растущая команда с большим потенциалом. Вы – ФАБРИКА ЗДОРОВЬЯ, которая возвращает людям полноценную жизнь! Пусть в Ваших семьях будет мир и благополучие. Удачи и процветания Вам!

краткое описание процедуры, показания и противопоказания, действие, отзывы

Электрофорез – это метод безопасного и безболезненного введения медицинских препаратов к очагу повреждения. Под воздействием электрических импульсов лекарственные средства превращаются в мельчайшие частицы, называемые ионами, которые впоследствии доставляются в пораженные области. Препараты хранятся в слоях дермы и постепенно с током крови и лимфы расходятся по всему организму.

Как действует электрофорез

Для электрофореза используется гальванический ток – это электрический ток постоянного невысокого напряжения и небольшой силы. Под его воздействием в кожу и слизистые оболочки вводятся частицы лекарственного средства. Самой большой подвижностью обладают ионы тех лекарств, которые растворяется в воде. Оно попадает в эпидермис и накапливается в верхнем слое дермы. Под действием электрического тока медикаменты углубляются до полутора сантиметров, образуя своеобразное хранилище, из которого поступают в клетки и ткани органов.

Основные преимущества электрофореза

Электрофорез с никотиновой кислотой – это движение в электрическом поле заряженных ионов витамина PP. Проникая в ткани различных органов, лекарственное средство равномерно распределяется в межклеточной жидкости и клетках. При выполнении этой процедуры могут использоваться не только гальванические, но и диадинамические, синусоидальные модулированные, флюктуирующие и выпрямленные токи. Сущность процедуры от этого не меняется – никотиновая кислота доставляется в нужное место с помощью электрического тока. Благодаря этой процедуре под кожей создается и хранится запас лекарства, который постепенно расходуется.

Никотиновая кислота продолжительный период медленно поступает в кровоток, улучшая работу больного органа. Благодаря электрическому току ее действие усиливается, поэтому доза препарата вводится незначительная. Кроме этого, выведение лекарства также происходит медленно. Процедура совершенно не причиняет боли, поэтому очень часто врачи назначают грудничкам электрофорез с никотиновой кислотой.

Особенности применения «Эуфиллина»

«Эуфиллин» представляет собой сложный препарат, который используется для:

  • снятия спазмов бронхов;
  • расслабления гладкой мускулатуры;
  • увеличения диуреза;
  • уменьшения тромбообразования;
  • снижения внутричерепного давления;
  • обезболивания;
  • улучшения кровотока.

Электрофорез с эуфиллином противопоказан при проблемах с печенью, почками, сердцем и непереносимостью препарата. Могут возникнуть побочные реакции в виде головной боли, снижения давления, нарушения сна. В процессе манипуляции наблюдаются небольшие покалывания.

Использование никотиновой кислоты для электрофореза

Никотиновая кислота или ниацин – это витамин PP, способствующий улучшению кровообращения. Он содержится в небольших количествах в рыбе, молоке, крупах и фруктах, дрожжах. Искусственные аналоги витамина выпускаются в таблетках. Раствор никотиновой кислоты для электрофореза способствует:

  • Улучшению углеводного обмена. Его используют при заболеваниях сердца, органов пищеварения, печени и сахарном диабете.
  • Заживлению ран на слизистых оболочках и коже.
  • Расширению сосудов.
  • Разжижению крови.
  • Снижению уровня холестерина крови.

Кроме этого, никотиновая кислота оказывает положительное влияние на работу головного мозга и нормализует артериальное давление.

С эуфиллином и никотинкой

Электрофорез с эуфиллином и никотиновой кислотой нередко используется для лечения детей до года при:

  • травмах малыша во время родов;
  • гидроцефальном синдроме;
  • гипо- или гипертонусе мышц.

Для взрослых электрофорез с этими двумя препаратами применяют при:

  • болях в спине;
  • восстановлении кровообращения головного мозга;
  • болезнях шейного отдела позвоночника;
  • нормализации кровотока в конечностях.

Следует помнить, что длительное введение больших доз никотиновой кислоты опасно возникновением жировой дистрофии печени.

Требования к лекарствам для электрофореза

При электрофорезе используют только те препараты, которые под воздействием электрического тока способны проникать в дерму. Они вводятся самостоятельно и в комплексе с использованием других средств для усиления эффекта. Электрофорез можно проводить, если:

  • лекарственный препарат не содержит примесей;
  • раствор приготовлен перед использованием;
  • для приготовления применялась дистиллированная вода;
  • в случае нерастворимости препарата в воде используется медицинский спирт или «Димексид»;
  • готовится раствор ферментов, то растворителем служат буферы;
  • во время всего курса полярность электродов остается неизменной.

Надо отметить, что использовать в качестве растворителя физиологический раствор нельзя. Количество медицинского препарата, который поступает в организм, зависит от:

  • возраста больного;
  • индивидуальных особенностей организма;
  • состояния кожи;
  • площади поверхности электрода;
  • силы и плотности тока;
  • используемого растворителя;
  • продолжительности процедуры;
  • количества препарата.

Электрофорез с никотиновой кислотой грудничку. Отзывы

Часто при различных родовых травмах, внутриутробных отклонениях или возникших заболеваниях грудничкам назначают процедуру электрофореза с никотиновой кислотой. Она расслабляет мышцы малыша, оказывает противовоспалительное и анальгезирующее действие. Ее назначают при следующих патологических состояниях:

  • кривошея, дисплазия суставов;
  • неврологические расстройства;
  • диатез;
  • переломы, вывихи;
  • нарушение мышечного тонуса;
  • болезни пищеварительной системы;
  • воспаления дыхательной и мочевыделительной системы;
  • стоматит;
  • глазные заболевания;
  • родовые травмы;
  • реабилитация после операции.

Электрофорез с никотиновой кислотой для детей является безопасной процедурой и переносится лучше, чем инъекции, но ее нельзя проводить при:

  • почечной и сердечной недостаточности;
  • склонности к аллергии;
  • плохой свертываемости крови;
  • наличии новообразований;
  • бронхиальной астме;
  • гнойничковых высыпаниях;
  • непереносимости электротока;
  • повышенной температуре;
  • повреждениях кожных покровов.

Для грудничков часто используют никотиновую кислоту совместно с эуфиллином. Это дает положительный эффект при нарушении тонуса мышц, родовых травмах и гидроцефалии. Перед процедурой доктор проводит обследование малыша и выявляет противопоказания.

Мнения родителей, детям которых был назначен электрофорез с никотиновой кислотой, неоднозначны. Одни из них считают, что процедуры имеют хороший эффект. Груднички быстрее восстанавливались после родовых травм, особенно если был поврежден шейный отдел. Малыши начали держать головку, переворачиваться и ползать. Другие отмечают, что после нескольких процедур электрофореза с никотиновой кислотой, дети становятся беспокойными, отказываются от груди, у них нарушается сон, появляется аллергическая реакция на коже. Малышам старше четырех месяцев тяжело пролежать без движения весь сеанс.

На самом деле, электрофорез является полезной и безопасной процедурой для грудничков. Лекарство доставляется прямо в пораженные зоны, и ребенок не получает нагрузки на внутренние органы, что очень важно для неокрепшего организма.

Как проводится процедура

Электрофорез выполняется в физиотерапевтическом кабинете специально подготовленным медицинским персоналом. Для лечения детей раннего возраста, как правило, назначается десять сеансов, каждый из которых длится от 5 до 25 минут. Перед процедурой (за полчаса до нее) ребенок должен быть накормлен. Проводят манипуляцию следующим образом:

  • Ребенок находится в горизонтальном положении. В исключительных случаях разрешают держать его на руках.
  • Марлевую салфетку смачивают в составе лекарственного средства и накладывают на область поражения, фиксируя тканевой повязкой.
  • Электроды помещают на салфетку, включают электрический ток и следят за реакцией малыша. Он испытывает легкие покалывания.
  • После завершения сеанса кожу протирают чистой салфеткой и смазывают детским кремом.

В случае необходимости повторный курс лечения проводится не раньше, чем через месяц. А также существуют и другие методики электрофореза с никотиновой кислотой:

  1. Полостная – в полость больного органа (влагалище или прямую кишку) вводят лекарство и один электрод, а второй оставляют на внутренней поверхности тела. Метод применяется при болезнях органов малого таза и толстого кишечника.
  2. Ванночковая – емкость наполняют медикаментозным средством и погружают в нее поврежденную конечность.
  3. Внутритканевая – при помощи инъекции вводят препарат и на эту же область накладывают электроды. Этот метод дает хороший эффект при заболеваниях дыхательной системы: бронхите и ларингите.

Электрофорез шейно-воротниковой зоны

Безопасность и высокая эффективность лечения токами приобрела большую популярность. Электрофорез с никотиновой кислотой на воротниковую зону используется при повреждении челюстно-лицевых мышц. Он нормализует поврежденные ткани и восстанавливает работу мышц.

Для проведения процедуры используют специальный прибор, генерирующий ток. На пациента надевают специальную прокладку, которая закрывает плечи, шею и лопатки. Под нее кладут фильтровальную бумагу, смоченную теплым раствором никотиновой кислоты. Температура раствора доводится до 38 градусов. Один электрод закрепляют на прокладке, а другой кладут между поясницей и крестцом. Расчет дозировки для проведения электрофореза с никотиновой кислотой на воротниковую зону делается индивидуально для каждого пациента. При этом учитывают:

  • плотность тока;
  • размер прокладки;
  • время проведения процедуры;
  • концентрацию кислоты;
  • способность препарата распадаться на ионы;
  • индивидуальные особенности организма к воздействию электрического тока.

Плотность тока зависит от величины прокладки и находится в обратно пропорциональной зависимости. Во время процедуры сила тока постепенно увеличивается. Курс лечения состоит из 15–20 процедур. При необходимости его можно повторить спустя месяц.

Техника электролечения

Для лечения электрофорезом применяют разные техники, имеющие большую эффективность для лечения определенных заболеваний. Вот несколько из них:

  • По Бургиньону (глазнично-затылочный) – на глаз поверх закрытых век кладут маленькую прокладку, пропитанную лекарственным средством. Вторую – помещают на задней поверхности шеи. Манипуляция продолжается полчаса, сила тока 4 мА. Такое лечение действенно при неврите тройничного или лицевого нерва, при воспалениях и травмах сосудов головного мозга.
  • По Ратнеру – применяют при сбое кровообращения в отделе шеи, ДЦП Особенно широко используется электрофорез по Ратнеру с никотиновой кислотой для лечения послеродовых травм у детей.
  • Назальный – тампон с лекарством вставляют в обе ноздри и прикладывают электрод. Второй размещают на задней стороне шеи с прокладкой 8 х 10. При силе тока в 2 мА манипуляция длится от 10 до 20 минут. Этот электрофорез эффективен для лечения головного мозга с сосудистыми, воспалительными и травматическими патологиями, а также при сбое обменных процессов и язвенных поражениях желудка.

Использование электрофореза для лечения глазных заболеваний

В офтальмологической практике нередко применяют электрофорез на закрытые веки по Бургиньону. Этот щадящий метод лечения используется сразу после травм или операций, при изменениях эпителия роговицы, воспалительных процессах, кровоизлияниях в среде глазного яблока. Особенно часто дети в школьном возрасте страдают миопией. Большая зрительная нагрузка во время учебного процесса и постоянная работа на компьютере приводит к снижению кровотока, что провоцирует слабость аккомодации и дистрофию в диске зрительного нерва.

В профилактических целях для приостановки прогрессирования миопии используют препараты для улучшения гемодинамики глаза и усиления обменных процессов в сетчатой оболочке. Одним из таких лекарственных средств и является витамин PP. А электрофорез с никотиновой кислотой для глаз признан эффективной и безболезненной процедурой. Противопоказания к проведению – это повреждение кожи век, слизисто-гнойные выделения, повышенное внутриглазное давление, различные новообразования и индивидуальная непереносимость.

Электрофорез при остеохондрозе шейного отдела позвоночника

Недостаток движения и сидячий образ жизни часто приводит к деформации шейных позвонков, а это вызывает возникновение остеохондроза. Развитию болезни способствует:

  • неправильная поза посадки за столом;
  • несимметричная работа мышц позвоночника;
  • ношение сумки на одном плече;
  • выполнение физических нагрузок без разминки;
  • использование мягких матрасов и подушек;
  • избыточный вес.

Остеохондроз является хроническим заболеванием, излечить недуг полностью невозможно. Однако снять боль в период обострения и облегчить состояние пациента вполне возможно. Для этого врачи часто назначают электрофорез с никотиновой кислотой. Витамин PP положительно влияет на:

  • метаболические процессы, стабилизируя их;
  • улучшение липидного и углеводного обмена;
  • расширяет кровеносные сосуды, в результате нормализуется кислородный обмен и питание тканей хряща.

Процедуры проводятся ежедневно, курс лечения – это десять манипуляций. Остеохондроз – тяжелое заболевание, причиняющие сильные боли. Иногда для облегчения состояния и усиления эффекта применяют электрофорез с эуфиллином и никотиновой кислотой. Такое лечение дает хороший результат, и больной быстро восстанавливается.

Электрофорез в гинекологии и при беременности

В гинекологии электрофорез широко используется для терапии воспалительных хронических процессов. Его используют для лечения эндометриоза и эрозии шейки матки. В этом случае используют метод тканевого электрофореза, когда лекарство проникает прямо в район повреждения. Без острой необходимости беременным женщинам витамин PP не выписывают, он может содержаться только в витаминных комплексах. Дополнительные дозировки препарата и электрофорез с никотиновой кислотой показан при:

  • патологии плаценты;
  • нарушении функционирования печени, спровоцированной беременностью;
  • зависимости беременной женщины от алкоголя и наркотиков;
  • склонности к тромбообразованию;
  • многоплодной беременности.

В результате у рожениц происходит улучшение оттока лимфы и снабжение кислородом плода. Процедура должна проходить строго под наблюдением врача. При грудном вскармливании электрофорез с никотиновой кислотой делать не желательно.

Побочные эффекты

Электрофорез – это одна из самых безопасных процедур, которая не вызывает тяжелых осложнений. Хотя у грудничков отмечают появление следующих побочных эффектов:

  • В месте наложения электродов происходит покраснение дермы.
  • Возможны раздражения кожных покровов.
  • Во время процедуры ребенок ощущает покалывание. Некоторые малыши начинают капризничать и срывать электроды.

У детей постарше и взрослых во время проведения электрофореза с никотиновой кислотой или через определенное время возможно:

  • появление красных пятен, шелушения кожи или волдырей;
  • учащенное сердцебиение;
  • затрудненное дыхание, одышка, кашель;
  • ухудшение общего состояния — появление вялости сонливости, отсутствие аппетита;
  • повышение температуры тела.

При обнаружении вышеописанных симптомов во время сеанса процедура прекращается. Возникновение признаков недомогания дома требует немедленного обращения в больницу, где врач даст соответствующие рекомендации по устранению возникшей ситуации.

Электрофорез с никотиновой кислотой, отзывы о котором в большей степени положительны, очень широко применяется в медицине и косметологии. Хотя есть пациенты, которым пришлось отказаться от процедур из-за аллергических реакций на препарат или электрический ток. Несмотря на это, электрофорез положительно воздействует на организм как грудничков, так и взрослых людей.

Тестирование вашего ребенка на серповидноклеточную анемию во время беременности » Общество серповидноклеточной анемии

Тестирование вашего ребенка на серповидноклеточную анемию во время беременности

Можно проверить гены, которые унаследовал ваш ребенок.

Существует два основных способа проверки вашего ребенка на генетические проблемы, пока он находится в утробе матери. Эти методы называются амниоцентезом и биопсией ворсин хориона (CVS). Мы объясняем, как проводятся тесты, какие аномалии можно обнаружить и каковы риски.

Мы даем только общую информацию. Если вам нужна более подробная информация об этих тестах или ваших личных обстоятельствах, обсудите этот вопрос со своим лечащим врачом или специалистом больницы.

Что такое амниоцентез?

Тест включает введение иглы в матку через брюшную полость женщины (живот) и получение небольшого образца жидкости, в которой плавает ребенок (амниотическая жидкость). Большинство женщин говорят, что тест безболезненный.

Амниоцентез обычно проводится между 16 и 18 неделями беременности и может проводиться в амбулаторных условиях без необходимости пребывания в стационаре на ночь.

В рамках теста проводится ультразвуковое сканирование, чтобы проверить наличие близнецов и определить, где находится плацента и ребенок.

Жидкость содержит клетки, полученные от ребенка, и эти клетки затем выращивают в лаборатории, чтобы на них можно было проводить генетические тесты.

Какие отклонения можно обнаружить?

Могут быть обнаружены аномалии, вызванные дополнительным или отсутствующим хромосомным материалом, наиболее распространенным из которых является синдром Дауна (трисомия 21), когда у младенцев есть дополнительная хромосома 21 в каждой клетке или в их теле.

Также могут быть обнаружены другие хромосомные аномалии. Последствия всех этих условий будут подробно обсуждены с родителями. Многие из этих хромосомных аномалий приводят к серьезным заболеваниям, и прерывание беременности может быть одним из возможных вариантов для родителей.

В некоторых случаях могут быть обнаружены другие нарушения, вызванные одним аномальным геном. В настоящее время тесты на них обычно проводятся только тогда, когда в семье пары есть кто-то с заболеванием, о котором известно, что существует риск рождения ребенка с определенным генетическим заболеванием, таким как кистозный фиброз, серповидно-клеточная анемия или болезнь Тея-Сакса. .

Сама амниотическая жидкость также исследуется для измерения уровня белка, называемого альфафетопротеином (АФП). Уровень высокий, если у ребенка расщепление позвоночника, и этот тест выявляет 95% детей с этим заболеванием. Затем проводится детальное ультразвуковое сканирование, чтобы подтвердить наличие расщепления позвоночника.

Каковы риски амниоцентеза и насколько он надежен?

Анализ амниоцентеза сопряжен с небольшим риском выкидыша, примерно 1 из 100, но другие осложнения очень редки.

Амниоцентез — очень надежный способ исследования хромосом ребенка, но для получения результатов клетки должны начать расти в лаборатории. Иногда этого не происходит, и может потребоваться дополнительная проба.

Когда доступен результат?

В течение трех-четырех недель, если обнаружен аномальный результат и пара решает прервать беременность, это можно сделать примерно на 19-20 неделе беременности.

Что такое биопсия ворсин хориона (CVS)?

Анализ CVS проводится раньше, чем амниоцентез – примерно на 9-10 неделе беременности, и опять же это амбулаторная процедура.Вместо того, чтобы тестировать образец жидкости матки матери, в этом тесте берут очень небольшое количество материала из развивающейся плаценты.

Одним из способов проведения теста является введение тонкой трубки через шейку матки (шейку матки) для получения образца. Большинство женщин говорят, что это лишь слегка неудобно.

Другой метод похож на тест амниоцентеза и включает введение иглы в матку и использование ультразвукового сканера для ее направления.

Какой тип аномалии можно обнаружить с помощью CVS?

Образец содержит клетки того же генетического типа, что и ребенок, и поэтому может выявить те же нарушения, что и амниоцентез. Точно так же CVS может обнаруживать редкие заболевания, вызванные аномальными генами, но эти тесты обычно проводятся только в том случае, если есть семейная связь с конкретным заболеванием. Поскольку амниотическая жидкость не получена, тест нельзя использовать для поиска детей с расщеплением позвоночника.

Каковы риски CVS и насколько он надежен?

Тест CVS имеет несколько более высокую вероятность выкидыша, чем амниоцентез, но его преимущество заключается в том, что его можно проводить на более ранних сроках беременности.

Это относительно новый тест и по достоверности информации не так много, как по амниоцентезу. Есть предположение, что тест CVS может давать запутанный результат в небольшом проценте случаев, может быть, в одном из 100.

В таких случаях это может указывать на аномалию там, где ее нет. Хотя обычно имеется дополнительная информация, которая ясно показывает, что ребенок будет аномальным, при наличии сомнений может потребоваться проведение амниоцентеза на более поздних сроках беременности.

Существует также отдаленная вероятность — примерно 1 из 1000 случаев — что хромосомная аномалия не будет обнаружена.

Когда будут доступны результаты теста?

Обычно через одну-две недели после теста.

Что насчет будущих беременностей?

Если пара решит прервать беременность после амниоцентеза или теста CVS, это не должно повлиять на их фертильность при будущих беременностях. Пара вполне может захотеть, чтобы ее направили в их генетическую клинику, чтобы обсудить риск рождения больного ребенка в следующий раз.

Резус-отрицательные матери

Если группа крови матери имеет отрицательный резус-фактор, ей следует сделать инъекцию после амниоцентеза или БВХ, чтобы защитить текущую и будущую беременность.

Определение типа гемоглобина у ребенка

Тестирование неродившегося ребенка, чтобы определить, какой у него тип гемоглобина, может быть выполнено с использованием любого из этих методов, хотя обычно это делается с помощью CVS, поскольку можно собрать больше клеток. На более поздних сроках беременности это также можно сделать, взяв кровь непосредственно у плода.Клетки, полученные в результате всех этих процедур, могут быть протестированы непосредственно на наличие самого гена серповидного гемоглобина.

Скрининг на носительство генетических заболеваний

, номер 691 (заменяет мнение комитета № 318, октябрь 2005 г.; мнение комитета № 432, май 2009 г.; мнение комитета № 442, октябрь 2009 г.; мнение комитета № 469, октябрь 2010 г.; мнение комитета № 486, апрель 2011 г. Подтверждено в 2020 г.)

Комитет по генетике

Это мнение Комитета было разработано Комитетом по генетике Американского колледжа акушеров и гинекологов в сотрудничестве с членами комитета Бриттоном Ринк, доктором медицины; Стефани Ромеро, доктор медицины; Джозеф Р.Биджио-младший, доктор медицины; Деверо Н. Саллер-младший, доктор медицины; и Роуз Джардин, MS.

Этот документ отражает новые клинические и научные достижения на дату выпуска и может быть изменен. Информация не должна толковаться как диктующая эксклюзивный курс лечения или процедуры, которой необходимо следовать.


РЕЗЮМЕ: Скрининг на носительство — это термин, используемый для описания генетического тестирования, которое проводится на индивидууме, у которого нет явного фенотипа генетического заболевания, но может быть один вариантный аллель в гене (генах), связанный с диагнозом.Информация о скрининге на носительство должна быть предоставлена ​​каждой беременной женщине. Скрининг на носительство и консультирование в идеале следует проводить до беременности, потому что это позволяет парам узнать о своем репродуктивном риске и рассмотреть наиболее полный спектр репродуктивных возможностей. Пациент может отказаться от любого или всего скрининга. Когда обнаруживается, что человек является носителем генетического заболевания, его или ее родственники рискуют стать носителями той же мутации. Пациента следует поощрять информировать своих родственников о риске и возможности скрининга на носительство. Если обнаруживается, что человек является носителем определенного состояния, репродуктивному партнеру пациента следует предложить пройти тестирование, чтобы получить информированное генетическое консультирование о возможных репродуктивных исходах. Если оба партнера являются носителями генетического заболевания, следует предложить генетическое консультирование. Далее следует подробное обсуждение некоторых из наиболее распространенных генетических состояний, для которых рекомендуется скрининг на носительство, по крайней мере, в некоторых сегментах населения.


Рекомендации и заключения

Американский колледж акушеров и гинекологов (Колледж) дает следующие рекомендации и заключения:


Общие рекомендации

  • Информация о скрининге на генетическое носительство должна быть предоставлена ​​каждой беременной женщине.После консультации пациент может отказаться от любого или всего скрининга.

  • Скрининг на носительство и консультирование в идеале следует проводить до беременности.

  • Если обнаруживается, что человек является носителем определенного заболевания, его репродуктивному партнеру следует предложить пройти обследование, чтобы получить информированную генетическую консультацию о возможных репродуктивных исходах. Предлагается одновременный скрининг пациентки и ее партнера, если есть временные ограничения для принятия решения о пренатальной диагностической оценке.

  • Если оба партнера являются носителями генетического заболевания, следует предложить генетическое консультирование. Следует обсудить пренатальную диагностику и передовые репродуктивные технологии для снижения риска рождения больного потомства.

  • Когда обнаруживается, что человек является носителем генетического заболевания, его родственники подвергаются риску носительства той же мутации. Пациента следует поощрять информировать своих родственников о риске и возможности скрининга на носительство.Акушер-гинеколог или другой медицинский работник не должен разглашать эту информацию без разрешения пациентки.

  • Важно получить семейный анамнез пациентки и, если возможно, ее партнера в качестве инструмента скрининга наследственного риска. Семейный анамнез должен включать этническую принадлежность членов семьи, а также любое известное кровное родство. Людям с положительным семейным анамнезом генетического заболевания следует предложить скрининг на носительство конкретного заболевания, и им может быть полезно генетическое консультирование.

  • Скрининг на носительство определенного состояния, как правило, должен проводиться только один раз в жизни человека, а результаты должны быть задокументированы в истории болезни пациента. Из-за быстрого развития генетического тестирования дополнительные мутации могут быть включены в новые панели скрининга. Решение о повторном скрининге пациента должно приниматься только под руководством специалиста-генетика, который может наилучшим образом оценить дополнительную пользу от повторного тестирования на наличие дополнительных мутаций.

  • Пренатальный скрининг на носительство не заменяет скрининг новорожденных, а скрининг новорожденных не заменяет потенциальную ценность пренатального скрининга на носительство.

  • Если пациентка запрашивает скрининг на носительство определенного состояния, для которого тестирование легкодоступно и которое разумно рассматривать в рамках другой стратегии скрининга, запрошенный тест должен быть предложен ей (независимо от этнической принадлежности и семейного анамнеза) после консультации по риски, преимущества и ограничения скрининга.

  • Стоимость скрининга носителей для отдельного состояния может быть выше, чем стоимость тестирования с использованием имеющихся в продаже расширенных панелей скрининга носителей. При выборе метода скрининга на носительство следует учитывать стоимость каждого варианта для пациента и системы здравоохранения.

Рекомендации для особых состояний

Спинальная мышечная атрофия
  • Скрининг на спинальную мышечную атрофию следует предлагать всем женщинам, которые планируют беременность или беременны в настоящее время.

  • У пациентов с семейным анамнезом спинальной мышечной атрофии перед тестированием следует, по возможности, изучить отчеты о молекулярном тестировании пострадавшего человека и тестировании носителя родственного родителя. Если отчеты недоступны, для партнера с низким уровнем риска следует рекомендовать тестирование на удаление SMN1 .

Кистозный фиброз
  • Скрининг на носительство кистозного фиброза следует предлагать всем женщинам, которые планируют беременность или беременны в настоящее время.

  • Полный анализ гена CFTR с помощью секвенирования ДНК не подходит для рутинного скрининга носителей.

  • Для пар, в которых оба партнера здоровы, но один или оба имеют семейный анамнез муковисцидоза, следует провести генетическое консультирование и просмотреть медицинскую документацию, чтобы определить, доступен ли анализ мутации CFTR у больного члена семьи.

  • Если репродуктивный партнер женщины страдает муковисцидозом или явно изолированным врожденным двусторонним отсутствием семявыводящих протоков, пара должна пройти последующую генетическую консультацию у акушера-гинеколога или другого поставщика медицинских услуг с опытом генетики для анализа мутаций. и консультации.

Гемоглобинопатии
  • Общий анализ крови с индексами эритроцитов должен быть выполнен у всех беременных женщин, чтобы оценить не только риск анемии, но и оценить риск гемоглобинопатии. В идеале, это тестирование также должно быть предложено женщинам до беременности.

  • Электрофорез гемоглобина следует проводить в дополнение к общему анализу крови, если есть подозрение на гемоглобинопатию по этническому признаку (африканское, средиземноморское, ближневосточное, юго-восточное азиатское или западно-индийское происхождение).Если индексы эритроцитов указывают на низкий средний корпускулярный гемоглобин или средний корпускулярный объем, также следует провести электрофорез гемоглобина.

Синдром ломкой Х-хромосомы
  • Скрининг на носительство премутации ломкой Х-хромосомы рекомендуется женщинам с семейным анамнезом заболеваний, связанных с ломкой Х-хромосомой, или умственной отсталостью, свидетельствующей о синдроме ломкой Х-хромосомы, и которые планируют беременность или беременны в настоящее время.

  • Если у женщины до 40 лет наблюдается необъяснимая недостаточность или отказ яичников или повышенный уровень фолликулостимулирующего гормона, рекомендуется скрининг на носительство ломкой Х-хромосомы, чтобы определить наличие у нее премутации FMR1 .

  • Всем идентифицированным лицам с промежуточными результатами и носителям премутации ломкой Х-хромосомы или полной мутации следует предоставить последующее генетическое консультирование для обсуждения риска наследования расширенной полной мутации аллеля ломкой Х-хромосомы для их потомства и обсуждения аллеля ломкой Х-хромосомы. -сопутствующие заболевания (преждевременная недостаточность яичников и синдром ломкого Х-тремора/атаксия).

  • Пренатальное диагностическое тестирование на синдром ломкой Х-хромосомы следует предлагать известным носителям премутации ломкой Х-хромосомы или полной мутации.

  • Молекулярный анализ на основе ДНК (например, Саузерн-блоттинг и полимеразная цепная реакция) является предпочтительным методом диагностики синдрома ломкой Х-хромосомы и определения числа триплетных повторов FMR1 (например, премутаций). В редких случаях размер триплетного повтора и статус метилирования не коррелируют, что затрудняет прогнозирование клинического фенотипа. В случае такого несоответствия пациента следует направить к специалисту-генетику.

Генетические заболевания у лиц восточно- и центральноевропейского еврейского происхождения
  • Если только один партнер имеет еврейское происхождение ашкенази, этому человеку следует предложить скрининг в первую очередь.Если установлено, что этот человек является носителем, другому партнеру следует предложить обследование. Тем не менее, супружеская пара должна быть проинформирована о том, что частота носительства и уровень выявления у лиц нееврейского происхождения для большинства этих заболеваний неизвестны, за исключением болезни Тея-Сакса и муковисцидоза. Поэтому трудно точно предсказать риск рождения ребенка с расстройством у пары.

Болезнь Тея-Сакса
  • Скрининг на болезнь Тея-Сакса следует предложить при рассмотрении вопроса о беременности или во время беременности, если кто-либо из членов пары имеет еврейское, франко-канадское или каджунское происхождение. Людям с семейным анамнезом, соответствующим болезни Тея-Сакса, также следует предложить скрининг.

  • Если один из членов пары относится к группе высокого риска (т. е. имеет еврейское происхождение ашкенази, франко-канадское или каджунское происхождение или имеет семейный анамнез, соответствующий болезни Тея-Сакса), а другой партнер не относится к группе высокого риска, партнеру по риску должен быть предложен скрининг. Если выясняется, что партнер из группы высокого риска является носителем, другому партнеру также следует предложить обследование.

  • Тестирование ферментов у беременных женщин и женщин, принимающих оральные контрацептивы, должно проводиться с использованием теста на лейкоциты, поскольку тестирование сыворотки связано с повышенным уровнем ложноположительных результатов в этих группах населения.

  • Если скрининг болезни Тея-Сакса проводится как часть панэтнического расширенного скрининга на носительство, важно понимать ограничения скрининговых мутаций при выявлении носительства в общей популяции. При наличии семейного анамнеза болезни Тея-Сакса расширенные панели скрининга носителей не являются лучшим подходом к скринингу, если семейная мутация не включена в панель.

  • Направление к акушеру-гинекологу или другому специалисту в области генетики может быть полезным в случаях неубедительных результатов ферментативного тестирования или при обсуждении тестирования на носительство человека неашкеназской еврейской национальности, чей репродуктивный партнер является известным носителем болезни Тея-Сакса.


Введение

Скрининг на носительство — это термин, используемый для описания генетического тестирования, которое проводится на индивидууме, у которого нет какого-либо явного фенотипа генетического заболевания, но может быть один вариантный аллель в гене (генах), связанном с диагноз. Информация о скрининге генетического носительства должна быть предоставлена ​​каждой беременной женщине. После консультации пациент может отказаться от любого или всего скрининга. Скрининг на носительство и консультирование в идеале следует проводить до беременности, потому что это позволяет парам узнать о своем репродуктивном риске и рассмотреть наиболее полный спектр репродуктивных возможностей, включая возможность забеременеть или нет, а также использование передовых репродуктивных технологий, таких как преимплантационная генетическая диагностика или использование донорских гамет.Знание во время беременности позволяет пациенткам рассмотреть варианты пренатальной диагностики и ведения беременности в случае поражения плода.

Если обнаруживается, что человек является носителем определенного заболевания, его репродуктивному партнеру следует предложить пройти обследование, чтобы получить информированную генетическую консультацию о возможных репродуктивных исходах. Предлагается одновременный скрининг пациентки и ее партнера, если есть временные ограничения для принятия решения о пренатальной диагностической оценке.Если оба партнера являются носителями генетического заболевания, следует предложить генетическое консультирование. Следует обсудить пренатальную диагностику и передовые репродуктивные технологии для снижения риска рождения больного потомства. Пренатальный скрининг на носительство не заменяет скрининг новорожденных, равно как и скрининг новорожденных не заменяет потенциальную ценность пренатального скрининга на носительство.

Когда обнаруживается, что человек является носителем генетического заболевания, его родственники подвергаются риску носительства той же мутации.Пациента следует поощрять информировать своих родственников о риске и возможности скрининга на носительство. Акушер-гинеколог или другой медицинский работник не должен разглашать эту информацию без разрешения пациентки.

Важно получить семейный анамнез пациентки и, если возможно, ее партнера в качестве инструмента скрининга наследственного риска. Семейный анамнез должен включать этническую принадлежность членов семьи, а также любое известное кровное родство (союз между двумя людьми, являющимися троюродными или близкими родственниками) 1*. Людям с положительным семейным анамнезом генетического заболевания следует предложить скрининг на носительство конкретного заболевания, и им может быть полезно генетическое консультирование. В идеале информация о конкретной мутации должна быть доступна для тестирования и консультирования.

Скрининг на носительство определенного состояния, как правило, должен проводиться только один раз в жизни человека, а результаты должны быть задокументированы в истории болезни пациента. Из-за быстрого развития генетического тестирования дополнительные мутации могут быть включены в новые панели скрининга.Решение о повторном скрининге пациента должно приниматься только под руководством специалиста-генетика, который может наилучшим образом оценить дополнительную пользу от повторного тестирования на наличие дополнительных мутаций.

Несмотря на то, что несколько различных стратегий скрининга доступны и рассмотрены в Мнении Комитета № 690, Скрининг на носительство в эпоху геномной медицины , в этом документе делается попытка предоставить информацию о различных состояниях, для которых пациентка может обратиться за скринингом на носительство до беременности. Если пациент запрашивает скрининг на носительство определенного состояния, для которого тестирование легкодоступно и которое разумно было бы рассмотрено в рамках другой стратегии скрининга, запрошенный тест должен быть предложен ей (независимо от этнической принадлежности и семейного анамнеза) после консультации о рисках, преимуществах. и ограничения скрининга. Стоимость скрининга носителей для отдельного состояния может быть выше, чем стоимость тестирования с помощью имеющихся в продаже расширенных панелей скрининга носителей.При выборе метода скрининга на носительство следует учитывать стоимость каждого варианта для пациента и системы здравоохранения.

Далее следует подробное обсуждение некоторых из наиболее распространенных генетических состояний, для которых рекомендуется скрининг на носительство, по крайней мере, в некоторых сегментах населения. В различных разделах собраны темы, которые ранее обсуждались в отдельных мнениях Комитета, чтобы показать, как вышеупомянутые общие принципы используются и отражаются в скрининге носителей конкретных генетических состояний.


Спинальная мышечная атрофия

Спинальная мышечная атрофия, также известная как СМА, представляет собой аутосомно-рецессивное заболевание, характеризующееся дегенерацией двигательных нейронов спинного мозга, что приводит к атрофии скелетных мышц и общей слабости. Заболевание вызвано мутацией в гене, известном как ген выживания мотонейрона ( SMN1 ), который отвечает за выработку белка, необходимого для функционирования мотонейрона. Из-за тяжести и относительно высокой частоты носительства возрастает интерес к скринингу носительства спинальной мышечной атрофии в общей пренатальной популяции 3.Генетика спинальной мышечной атрофии сложна, и из-за ограничений доступных молекулярных диагностических методов точное предсказание фенотипа пораженного плода может оказаться невозможным.

Спинальная мышечная атрофия встречается примерно от 1 на 6000 до 1 на 10 000 живорождений, и сообщается, что это заболевание является основной генетической причиной младенческой смертности. Частота носителей в большинстве популяций оценивается от 1 из 40 до 1 из 60, но частота носителей, по-видимому, ниже в латиноамериканском населении (1:117) 4.Частота носительства и остаточные риски представлены в таблице 1 в зависимости от этнической принадлежности. Приблизительно 2% случаев спинальной мышечной атрофии являются результатом мутации нового гена. Эффективного лечения заболевания не существует.

Риск носительства на основе этнической принадлежности и остаточного риска при отрицательных результатах теста

Существует несколько типов спинальной мышечной атрофии в зависимости от возраста на момент появления симптомов. Более раннее начало коррелирует с более тяжелыми проявлениями. Наиболее тяжелая и наиболее распространенная форма заболевания, тип I (Вердниг-Гоффман), имеет симптоматическое начало в возрасте до 6 месяцев и вызывает смерть от дыхательной недостаточности в течение первых 2 лет жизни.Спинальная мышечная атрофия II типа имеет среднюю степень тяжести, обычно начинается в возрасте до 2 лет. Больные дети могут сидеть, но немногие могут стоять или ходить без посторонней помощи. Дыхательная недостаточность является частой причиной смерти в подростковом возрасте; однако продолжительность жизни больных спинальной мышечной атрофией II типа варьирует от 2 лет до третьего десятилетия жизни. Более 80% случаев спинальной мышечной атрофии относятся к типу I или типу II, оба из которых являются летальными формами. Более легкая форма, тип III (Кугельберга-Веландера), имеет типичное симптоматическое начало после 18-месячного возраста.Однако профиль симптомов весьма вариабелен. Пораженные люди обычно достигают всех основных моторных вех, но функции варьируются от потребности в инвалидной коляске в детстве до полностью самостоятельного передвижения во взрослом возрасте с незначительной мышечной слабостью. Многие пациенты имеют нормальную продолжительность жизни. Тип IV начинается во взрослом возрасте. Предлагается дополнительный тип 0, который начинается во внутриутробном периоде.

Молекулярная генетика

У человека присутствуют два почти идентичных гена двигательных нейронов выживания, известных как SMN1 и S MN2 . SMN1 считается активным геном выживаемости белка двигательных нейронов, и более 98% пациентов со спинальной мышечной атрофией имеют аномалии обоих генов SMN1 , которые могут быть вызваны делецией (95%) экзона 7. или другая мутация. Обычно имеется одна копия SMN1 на хромосому, но иногда две могут быть расположены на одной и той же хромосоме. Может присутствовать различное количество копий гена SMN2 (от нуля до трех), но ген SMN2 продуцирует лишь небольшое количество белка функционального выживания двигательных нейронов.Более высокое число копий SMN2 коррелирует с более легкими клиническими фенотипами, но точное предсказание фенотипа спинальной мышечной атрофии на основе числа копий SMN2 невозможно 5.

Диагноз по сравнению с обнаружением носительства у ребенка или взрослого достаточно просто обнаружить классическую делецию
SMN1 с помощью анализа ДНК в обоих аллелях SMN1 . Это примерно 95% чувствительность (100% специфичность) для пациентов с клиническими признаками, подозрительными на спинальную мышечную атрофию. Однако этого подхода недостаточно для выявления гетерозиготных пациентов или носителей делеции SMN1 . Тестирование носительства требует количественного анализа полимеразной цепной реакции, который обеспечивает измерение количества копий SMN1 . Обнаружение единственной нормальной копии SMN1 укажет на состояние носителя (рис. 1). Однако существуют ограничения на использование этого анализа для определения статуса носителя. Приблизительно 3–4% населения в целом имеют две копии SMN1 на одной хромосоме и ни одной копии на другой, и с помощью этого подхода они не будут идентифицированы как носитель спинальной мышечной атрофии.Эти люди являются носителями, поскольку в одной из их хромосом отсутствует аллель SMN1 . Отсутствующий аллель SMN1 , по-видимому, более преобладает у афроамериканцев и снижает уровень обнаружения носителей примерно до 71% в этой группе. В других этнических группах более 90% носителей выявляются при анализе доз SMN1 . Еще 2% населения в целом имеют мутации SMN1 , которые не обнаруживаются при анализе дозировки. Следовательно, при консультировании пациентов, прошедших тестирование на носительство, необходимо учитывать остаточный риск, присутствующий при отрицательных результатах скрининга на носительство, особенно у пациентов из семей, страдающих спинальной мышечной атрофией.

Ген SMN1 в нормальном, носительском и пораженном состояниях

Скрининг на носительство

Скрининг на спинальную мышечную атрофию следует предлагать всем женщинам, которые рассматривают возможность беременности или беременны в настоящее время и прошли соответствующие консультации относительно возможного диапазона тяжести, носительства скорость и скорость обнаружения. Послетестовое консультирование должно подтвердить остаточный риск после отрицательного скрининга на основании количества присутствующих копий SMN1 . У пациентов с семейным анамнезом спинальной мышечной атрофии следует, по возможности, просмотреть отчеты о молекулярном тестировании пораженного лица и тестировании носителя родственного родителя перед тестированием, чтобы определить остаточный риск для пациента с отрицательным результатом скрининга. Если отчеты недоступны, для партнера с низким уровнем риска следует рекомендовать тестирование на удаление SMN1 . Если будет установлено, что этот человек является носителем, пару следует направить на дальнейшее генетическое консультирование и рассмотреть возможность дальнейшего генетического тестирования партнера с высоким риском.


Муковисцидоз

Скрининг муковисцидоза до беременности и пренатальный скрининг на носительство муковисцидоза, также известный как CF, был введен в рутинную акушерскую практику в 2001 г. муковисцидоз, который определяется значительным поражением легких и панкреатической недостаточностью.Кистозный фиброз чаще встречается среди неиспаноязычного белого населения по сравнению с другими расовыми и этническими группами населения; однако из-за возрастающих трудностей с определением индивидуальной этнической принадлежности в 2005 году Американский колледж акушеров и гинекологов рекомендовал предлагать скрининг на носительство муковисцидоза всем пациентам.

Муковисцидоз является наиболее распространенным опасным для жизни аутосомно-рецессивным заболеванием среди белого неиспаноязычного населения. Заболеваемость составляет 1 на 2500 человек среди белого неиспаноязычного населения и значительно меньше среди других этнических групп.Это прогрессирующее мультисистемное заболевание, которое в первую очередь поражает легочную, поджелудочную и желудочно-кишечную системы, но не влияет на интеллект. Текущая медиана прогнозируемой выживаемости составляет примерно 42 года, при этом дыхательная недостаточность является наиболее частой причиной смерти 7. Более 95% мужчин с муковисцидозом имеют первичное бесплодие с обструктивной азооспермией, вторичной по отношению к врожденному двустороннему отсутствию семявыводящих протоков. Кистозный фиброз вызывается мутациями гена трансмембранного регулятора муковисцидоза (CFTR) , расположенного на хромосоме 7.Две копии вредных мутаций в этом гене вызывают кистозный фиброз.

Чувствительность скринингового теста различается среди этнических групп. Таблица 2: от менее 50% у лиц азиатского происхождения до 94% у еврейского населения ашкенази 8. Таким образом, скрининг наиболее эффективен у неиспаноязычных белых и евреев-ашкенази населения. Поскольку скрининг предлагается только для наиболее распространенных мутаций, отрицательный результат скринингового теста снижает, но не устраняет вероятность того, что вы являетесь носителем муковисцидоза и имеете пораженное потомство.Следовательно, если пациент проходит скрининг на муковисцидоз и имеет отрицательный результат теста, у нее все еще остается остаточный риск быть носителем. Наиболее распространенные частоты носительства муковисцидоза, а также показатели остаточного риска носительства после отрицательного результата теста перечислены в таблице 2 по расовым и этническим группам. для кистозного фиброза

Как и при любом скрининге на носительство, как правило, более выгодно и практично проводить первоначальный скрининг на носительство только для пациента.Скрининг на носительство муковисцидоза должен быть предложен всем женщинам, которые планируют беременность или беременны в настоящее время. Если пациентка является носителем муковисцидоза, то ее партнер должен пройти обследование. Во время беременности предлагается одновременный скрининг пациентки и ее партнера, если есть временные ограничения для принятия решений относительно пренатальной диагностической оценки. Учитывая, что скрининг на муковисцидоз является рутинной частью репродуктивного здоровья женщин с 2001 года, целесообразно определить, проходила ли пациентка ранее скрининг, прежде чем назначать повторный скрининг на муковисцидоз.Если пациент проходил скрининг ранее, результаты скрининга на муковисцидоз должны быть задокументированы, но тест не следует повторять. Хотя некоторые панели мутаций были расширены за последнее десятилетие, дополнительный эффект от добавления этих мутаций для большинства пациентов невелик. Перед повторным тестированием клинический сценарий следует обсудить с акушером-гинекологом или другим медицинским работником, имеющим опыт в области генетики.

Ниже приведены различные сценарии скрининга на носительство с соответствующими рекомендациями по ведению:

  • Женщина является носителем муковисцидоза, а ее партнер недоступен для тестирования или отцовство неизвестно . Рекомендуется генетическое консультирование для оценки риска рождения больного ребенка, а также вариантов и ограничений пренатального тестирования.

  • Пренатальная диагностика проводится по другим показаниям, и статус носителя муковисцидоза неизвестен . Скрининг на муковисцидоз можно проводить одновременно у пациента и партнера. Ворсинки хориона или амниоциты могут поддерживаться в культуре диагностической лабораторией до получения результатов скрининга на муковисцидоз для пациента или пары.Если оба партнера являются носителями, диагностическое тестирование на муковисцидоз может проводиться на ворсинах хориона или амниоцитах.

  • Оба партнера являются носителями муковисцидоза . Генетическое консультирование рекомендуется для рассмотрения пренатального тестирования и репродуктивных возможностей. Пренатальная диагностика должна быть предложена для конкретных известных мутаций пары.

  • Оба партнера здоровы, но один или оба имеют семейный анамнез муковисцидоза . Необходимо провести генетическое консультирование и просмотреть медицинскую документацию, чтобы определить, доступен ли анализ CFTR на мутацию у пострадавшего члена семьи. Скрининг на носительство следует предложить обоим партнерам, обращая внимание на то, чтобы семейная мутация была включена в оценку.

  • Репродуктивный партнер женщины страдает муковисцидозом или явно изолированным врожденным двусторонним отсутствием семявыносящего протока . Пара должна получить последующую генетическую консультацию у акушера-гинеколога или другого поставщика медицинских услуг, имеющего опыт генетики, для анализа мутаций и консультации.

  • Индивид имеет две мутации муковисцидоза, но ранее ему не ставили диагноз муковисцидоз . У человека обычно легкая форма заболевания, и его следует направить к специалисту для дальнейшего обследования. Рекомендуется консультация генетика.

CFTR Панели мутаций

На сегодняшний день выявлено более 1700 мутаций муковисцидоза 9. Текущие рекомендации, пересмотренные Американским колледжем медицинской генетики и геномики в 2004 г., рекомендуют использовать панель, которая содержит: как минимум 23 наиболее распространенные мутации.Руководство было разработано после оценки начального опыта внедрения скрининга на муковисцидоз в клиническую практику 10. Ряд расширенных мутационных панелей в настоящее время коммерчески доступны, и их можно рассматривать как повышающие чувствительность при выявлении носителей, особенно в неевропеоидных этнических группах. . Скрининг муковисцидоза также может идентифицировать варианты 5T/7T/9T в гене CFTR . Хотя сами по себе эти варианты не являются болезнетворными, они могут быть связаны с более легкими формами заболеваний и мужским бесплодием у лиц, гетерозиготных по определенным мутациям гена CFTR .Генетическое консультирование важно, чтобы определить, вызовет ли сочетание мутаций и вариантов классический или атипичный муковисцидоз.

Полный анализ гена CFTR с помощью секвенирования ДНК не подходит для рутинного скрининга носителей. Этот тип тестирования обычно предназначен для пациентов с муковисцидозом, пациентов с отрицательным результатом скрининга на носительство, но с семейным анамнезом муковисцидоза (особенно если результаты семейного теста недоступны), мужчин с врожденным двусторонним отсутствием семявыводящих протоков или новорожденных с положительный результат скрининга новорожденных, когда тестирование мутаций (с использованием стандартной панели из 23 мутаций) дает отрицательный результат.Поскольку скрининг на носительство выявляет большинство мутаций, анализ последовательности следует рассматривать только после обсуждения со специалистом-генетиком, чтобы определить, добавит ли он ценности стандартному скринингу, который проводился ранее.

Все штаты включают скрининг на муковисцидоз как часть панели скрининга новорожденных. Однако панели скрининга новорожденных не заменяют скрининг перед беременностью или пренатальное носительство. Поскольку эти программы скрининга обычно выявляют больных новорожденных, отрицательный результат теста у здоровых новорожденных не дает информации о статусе носителей у родителей. Таким образом, важно, чтобы скрининг на муковисцидоз по-прежнему предлагался женщинам, которые планируют забеременеть или беременны в настоящее время.


Гемоглобинопатии

Структура гемоглобина

Гемоглобин состоит из четырех взаимосвязанных полипептидных цепей, к каждой из которых присоединена молекула гема. Гемоглобин взрослого человека состоит из двух α-цепей и двух β-цепей (гемоглобин А), двух γ-цепей (гемоглобин F) или двух δ-цепей (гемоглобин А 2 ). Производство цепи альфа-глобина начинается в первом триместре и является важным компонентом фетального гемоглобина F, гемоглобина A и гемоглобина A 2 .Гемоглобин F является основным гемоглобином плода с 12 до 24 недель беременности. В третьем триместре выработка гемоглобина F снижается, так как начинается выработка β-цепей и гемоглобина А.

Серповидно-клеточная анемия

Серповидно-клеточная анемия относится к группе аутосомно-рецессивных заболеваний, которые связаны с аномальным гемоглобином (гемоглобин S). Гемоглобин S отличается от нормального гемоглобина А из-за замены одного нуклеотида в β. -ген глобин ; это изменение вызывает замену валина на глутаминовую кислоту в положении номер шесть полипептида β-глобина.Считается, что бессимптомные люди с гетерозиготным генотипом гемоглобина S (носители) имеют признак серповидно-клеточной анемии. Наиболее тяжелая форма заболевания, гемоглобин SS (гомозиготный гемоглобин S), называется серповидноклеточной анемией.

Серповидно-клеточные аномалии обнаруживаются не только у пациентов с генотипом гемоглобина SS, но также у пациентов с гемоглобином S и другой аномалией структуры β-глобина или продукции β-глобина. Наиболее распространенными из них являются гемоглобиновая SC болезнь и гемоглобиновая S/β-талассемия.В гемоглобине С изменен тот же нуклеотид, который участвует в мутации гемоглобина S, но изменение нуклеотида приводит к замене аминокислоты лизина на глутаминовую кислоту. Этот и другие аномальные гемоглобины при наследовании с гемоглобином S могут вызывать клинически значимые вазоокклюзионные явления и гемолитическую анемию, сходную с гемоглобином SS.

Серповидноклеточная анемия чаще всего встречается у лиц африканского происхождения. Примерно 1 из 10 афроамериканцев имеет признак серповидно-клеточной анемии 11.У одного из каждых 300–500 новорожденных афроамериканцев есть какая-либо форма серповидно-клеточной анемии. Гемоглобин S также часто встречается в других популяциях, таких как греки, итальянцы (особенно сицилийцы), турки, арабы, южные иранцы и азиатские индейцы 12.

Классическая клиническая картина пациентов с серповидноклеточной анемией наблюдается в снижение напряжения кислорода, при котором эритроциты деформируются и принимают различные формы, некоторые из которых напоминают серпы. Искаженные эритроциты приводят к повышению вязкости, гемолизу и анемии и дальнейшему снижению оксигенации.Когда серповидность возникает в мелких кровеносных сосудах, это может привести к нарушению кровоснабжения жизненно важных органов (вазоокклюзионный криз). Повторяющиеся вазоокклюзионные кризы приводят к обширной микрососудистой обструкции с нарушением нормальной перфузии и функции нескольких органов, включая селезенку, легкие, почки, сердце, и мозг. Эти кризисы чрезвычайно болезненны и обычно требуют госпитализации и медикаментозного лечения. В течение жизни у пациентов с серповидно-клеточной анемией, перенесших повторные кризы, часто развивается толерантность к опиоидным препаратам, и им могут потребоваться большие дозы для облегчения боли при остром вазоокклюзионном кризе.Также у этих больных часто присутствует элемент хронической боли и им может потребоваться ежедневное обезболивание даже при отсутствии острого криза. Взрослые с СС гемоглобина функционально аспленичны, так как в подростковом возрасте перенесли аутоспленэктомию. Отсутствие селезенки способствует увеличению заболеваемости и тяжести инфекции у пациентов с серповидно-клеточной анемией.

Наиболее серьезную угрозу для пациентов с серповидно-клеточной анемией представляет острый грудной синдром. Острый грудной синдром характеризуется легочным инфильтратом с лихорадкой, что приводит к гипоксемии и ацидозу.Инфильтраты не являются инфекционными по происхождению, а возникают вследствие окклюзии сосудов из-за серповидности или эмболизации костного мозга из длинных костей, пораженных серповидностью 13.

Диагноз гемоглобинопатии, включая серповидно-клеточную анемию, ставится с помощью электрофореза гемоглобина. При гомозиготной форме серповидно-клеточной анемии почти весь гемоглобин представляет собой гемоглобин S с небольшими количествами гемоглобина A 2 и гемоглобина F. Гетерозиготный признак серповидноклеточной анемии (гемоглобин AS) определяется большим процентным содержанием гемоглобина A и бессимптомным течением. .Тесты на растворимость сами по себе недостаточны для диагностики серповидно-клеточной анемии, потому что они не могут отличить гетерозиготный генотип AS от гомозиготного генотипа SS. Тесты на растворимость бесполезны для скрининга из-за невозможности идентифицировать другие патологические варианты, такие как гемоглобин C, гемоглобин E и признак β-талассемии.

Талассемии

Талассемии представляют собой широкий спектр гематологических нарушений, характеризующихся сниженным синтезом цепей глобина, что приводит к микроцитарной анемии.Талассемии классифицируют в соответствии с пораженной цепью глобина, причем наиболее распространенными типами являются α-талассемия и β-талассемия 14. α-глобин ген. Делеция одного гена α-глобина (α-/αα) клинически не распознается, и лабораторные исследования дают нормальные результаты. Делеция двух генов α-глобина вызывает α-талассемию, легкую бессимптомную микроцитарную анемию.Делеции могут быть на одной и той же хромосоме или в цис (αα/—), или на каждой хромосоме или в транс (α-α-).

Лица с делециями этих генов называются носителями и имеют повышенный риск рождения детей с более тяжелой формой талассемии, вызванной делециями трех или четырех копий гена α-глобина (большая α-талассемия) . Возможные генетические комбинации приведены в таблице 3.

Классификация альфа-талассемий

Признак альфа-талассемии (α-талассемия малая) распространен среди лиц юго-восточного азиатского, африканского и западно-индийского происхождения, а также среди лиц средиземноморского происхождения.Лица с происхождением из Юго-Восточной Азии с большей вероятностью несут две делеции гена в цис или на одной и той же хромосоме (—αα) и подвергаются повышенному риску потомства с болезнью гемоглобина Барта или гемоглобина Н. Болезнь гемоглобина H, вызванная делецией трех генов α-глобина , обычно связана с гемолитической анемией легкой и средней степени тяжести. Большая альфа-талассемия (гемоглобин Барта) приводит к отсутствию α-глобина (—/—), что связано с водянкой плода, внутриутробной гибелью и преэклампсией 12.

Бета-талассемия

Бета-талассемия является результатом мутации гена β-глобина , которая вызывает недостаточную или отсутствующую продукцию β-цепи, что, в свою очередь, вызывает отсутствие гемоглобина А. Лица Средиземноморья, Азии, Ближневосточное, латиноамериканское и западно-индийское происхождение с большей вероятностью несет мутации β-талассемии. Классификация β-талассемий основана на описании молекулярной мутации или на клинических проявлениях. Лица, гетерозиготные по этой мутации, имеют малую β-талассемию.Те, кто является гомозиготным, имеют большую β-талассемию (анемия Кули) или более легкую форму, называемую промежуточной талассемией. Существует множество мутаций, связанных с β-талассемией, и каждая мутация может по-разному влиять на количество продуцируемой β-цепи. Из-за множества различных мутаций многие люди с большой β-талассемией на самом деле являются составными гетерозиготами, несущими две разные мутации. Большая бета-талассемия характеризуется тяжелой анемией с результирующим экстрамедуллярным эритропоэзом, задержкой полового развития и плохим ростом.Повышенный уровень гемоглобина F у лиц с большой β-талассемией частично компенсирует отсутствие гемоглобина А; однако смерть обычно наступает в возрасте 10 лет, если лечение не начинается рано с периодических переливаний крови. При переливании тяжелая анемия устраняется, а экстрамедуллярный эритропоэз подавляется. У гомозигот с менее тяжелыми мутациями β+-талассемии, часто называемыми промежуточной β-талассемией, продуцируются различные, но уменьшенные количества β-цепей, и в результате продуцируются различные количества гемоглобина А.Некоторые люди могут наследовать мутацию гемоглобина S от одного родителя и мутацию β-талассемии от другого. Выражение результирующей гемоглобиновой S/β-талассемии определяется типом мутации β-талассемии 15. талассемии или серповидно-клеточной анемии. Для обеспечения точной идентификации гемоглобина, что необходимо для генетического консультирования, полный анализ крови с индексами эритроцитов должен быть выполнен у всех беременных женщин, чтобы оценить не только риск анемии, но и оценить риск гемоглобинопатии. .Если индексы эритроцитов указывают на низкий средний корпускулярный гемоглобин или средний корпускулярный объем, также следует провести электрофорез гемоглобина. Электрофорез гемоглобина следует проводить в дополнение к общему анализу крови, если есть подозрение на гемоглобинопатию по этническому признаку (африканское, средиземноморское, ближневосточное, юго-восточное азиатское или западно-индийское происхождение). В идеале, это тестирование также должно быть предложено женщинам до беременности. Если доступны результаты предыдущего электрофореза гемоглобина, повторный электрофорез гемоглобина не требуется для оценки статуса.

Для первичного скрининга использовались несколько тестов, в том числе тест на растворимость (например, тест на присутствие гемоглобина S), изоэлектрическое фокусирование и высокоэффективная жидкостная хроматография. Однако тесты на растворимость неадекватны для скрининга и не позволяют выявить важные трансмиссивные аномалии генов гемоглобина, влияющие на исход плода (например, признак гемоглобина С, признак β-талассемии, признак гемоглобина Е). Многие люди с этими генотипами протекают бессимптомно, но если их партнеры имеют признак серповидно-клеточной анемии или другие гемоглобинопатии, они могут производить потомство с более серьезными гемоглобинопатиями, такими как гемоглобиновая S/β-талассемия и гемоглобиновая серповидно-клеточная анемия.

Для оценки риска α-талассемии или β-талассемии рекомендуется определять средний корпускулярный объем. Пациенты с низким средним корпускулярным объемом (менее 80 фл) могут иметь один из признаков талассемии, и им следует провести электрофорез гемоглобина, если он не был проведен ранее. У этих людей также может быть железодефицитная анемия, и рекомендуется измерение уровня ферритина в сыворотке. Бета-талассемия связана с повышенным уровнем гемоглобина F и гемоглобина А 2 (более 3. 5%). Ни электрофорез гемоглобина, ни тест на растворимость не могут идентифицировать людей с чертой α-талассемии; только молекулярно-генетическое тестирование может идентифицировать это состояние. Если средний объем эритроцитов ниже нормы, железодефицитная анемия исключена, а электрофорез гемоглобина не соответствует признаку β-талассемии (т. е. нет повышения Hb A 2 или Hb F), следует использовать тестирование для выявления делеций гена α-глобина, характерных для α-талассемии.Гематологические особенности некоторых распространенных гемоглобинопатий показаны в таблице 4. Если оба партнера идентифицированы как носители гена аномального гемоглобина, рекомендуется генетическое консультирование.

Гематологические особенности основных гемоглобинопатий

Варианты пренатального генетического тестирования

Парам, подверженным риску рождения ребенка с гемоглобинопатией, может быть полезно генетическое консультирование для оценки их риска, естественного течения этих заболеваний, перспектив лечения и излечения, доступности пренатальное генетическое тестирование и репродуктивные возможности. Широко доступны пренатальные диагностические тесты на мутацию, ответственную за серповидно-клеточную анемию. Тестирование на α-талассемию и β-талассемию возможно, если мутации и делеции ранее были выявлены у обоих родителей. Эти тесты на основе ДНК можно проводить с использованием ворсин хориона, полученных путем отбора проб ворсин хориона, или с использованием культивированных клеток амниотической жидкости, полученных с помощью амниоцентеза. Для некоторых пар преимплантационная генетическая диагностика в сочетании с экстракорпоральным оплодотворением может быть желательной альтернативой, позволяющей избежать прерывания беременности.Преимплантационная генетическая диагностика успешно проводится при серповидно-клеточной анемии и большинстве типов β-талассемии.


Синдром ломкой Х-хромосомы

Синдром ломкой Х-хромосомы является наиболее распространенной наследственной формой умственной отсталости. Синдром встречается примерно у 1 из 3600 мужчин и у 1 из 4000–6000 женщин из разных этнических групп. Умственная отсталость или нарушения варьируются от пограничных, включая трудности в обучении, до тяжелых, проявляющихся когнитивными и поведенческими нарушениями, включая аутизм с умственной отсталостью; Синдром дефицита внимания и гиперактивности; или оба.Большинство пострадавших мужчин имеют значительную умственную отсталость. Синдром ломкой Х-хромосомы является широко известной причиной аутизма или расстройства аутистического спектра с умственной отсталостью, при этом диагноз встречается примерно у 25% больных людей 16. Другие ассоциированные фенотипические аномалии включают отличительные черты лица у мужчин (включая длинное, узкое лицо и оттопыренные уши), увеличенные яички (макроорхизм), дряблость суставов и кожи, гипотония, пролапс митрального клапана, задержка речи, задержка крупной и мелкой моторики.Аномальные черты лица незаметны в младенчестве и становятся более заметными с возрастом, что затрудняет фенотипическую диагностику, особенно у новорожденных. Пораженные женщины могут иметь более мягкий фенотип, и иногда трудно установить диагноз только на основании клинических данных.

Синдром ломкой Х-хромосомы передается как Х-сцепленное заболевание. Однако молекулярная генетика синдрома сложна. Нарушение вызвано экспансией повторяющегося тринуклеотидного сегмента ДНК, цитозин-гуанин-гуанин, что приводит к изменению транскрипции хрупкого гена X FMR1 .Число повторов цитозин-гуанин-гуанин различается у разных людей и в зависимости от размера повтора подразделяется на четыре группы: 1) неизмененные (5–44 повтора), 2) промежуточные (45–54 повтора), 3) премутации (55 повторов). –200 повторов) и 4) полная мутация (более 200 повторов) 17 18 при повышенном риске синдрома тремора/атаксии, связанного с ломкой Х-хромосомой (также известного как FXTAS), и преждевременной недостаточности яичников, связанной с FMR1 .Когда присутствует более 200 повторов, у человека возникает полная мутация, которая приводит к полному выражению синдрома ломкой Х-хромосомы у мужчин и вариабельной экспрессии у женщин. Большое количество повторов в аллеле с полной мутацией приводит к метилированию и инактивации гена FMR1 .

Передача вызывающей болезнь мутации плоду зависит от пола родителя, передающего мутацию, и количества цитозин-гуанин-гуаниновых повторов, присутствующих в родительском гене.Повторы очень редко расширяются во время сперматогенеза у мужчин, так что только больной мужчина может передать полную мутацию своему потомству женского пола. Однако повторы у женщин могут увеличиваться во время оогенеза, так что женщины с премутацией могут передавать полную мутацию, что приводит к рождению больного ребенка. Чем больше размер премутационного повтора, тем больше вероятность того, что произойдет расширение до полной мутации. Таблица 5. Женщины с промежуточным числом триплетных повторов (45–54) не передают полную мутацию своим потомкам мужского и женского пола, хотя у их потомков может быть распространение премутационного аллеля.Диагноз размера мутации может различаться на целых 3 или 4 повтора. Сообщается, что частота носителей премутационного аллеля (размер повтора более 54) в популяции достигает 1 на 157 в крупном израильском исследовании женщин (более 36 000 человек) без семейной истории умственной отсталости или аномалий развития. 19. Самые последние данные о распространенности в Соединенных Штатах показали, что частота носительства составляет 1 из 86 для лиц с семейным анамнезом умственной отсталости и 1 из 257 для женщин без известных факторов риска синдрома ломкой Х-хромосомы 20.

Предбеременность или пренатальный скрининг на носительство

Скрининг на носительство премутации ломкой Х-хромосомы рекомендуется женщинам с семейным анамнезом заболеваний, связанных с ломкой Х-хромосомой, или умственной отсталостью, свидетельствующей о синдроме ломкой Х-хромосомы, и которые рассматривают возможность беременности или беременны в настоящее время. Если у женщины в возрасте до 40 лет наблюдается необъяснимая недостаточность или недостаточность яичников или повышенный уровень фолликулостимулирующего гормона, рекомендуется скрининг на носительство ломкой Х-хромосомы, чтобы определить, есть ли у нее премутация FMR1 .Хотя соблюдение этих рекомендаций не позволит выявить большинство носителей премутации в популяции, они нацелены на группу с более высокой распространенностью на основе текущих данных о частоте носителей. Если пациент без семейного анамнеза требует скрининга ломкой Х-хромосомы, разумно предложить скрининг после информированного согласия. Всем выявленным лицам с промежуточными результатами и носителям премутации ломкой Х-хромосомы или полной мутации следует предоставить последующее генетическое консультирование для обсуждения риска для их потомства унаследовать расширенную полную мутацию аллеля ломкой Х-хромосомы и обсудить расстройства, связанные с ломкой Х-хромосомой. преждевременная недостаточность яичников и синдром ломкой Х-тремор/атаксия).

Пренатальная диагностика

Пренатальная диагностика синдрома ломкой Х-хромосомы должна предлагаться известным носителям премутации ломкой Х-хромосомы или полной мутации. Анализ ДНК плода при амниоцентезе или биопсии ворсин хориона надежно определяет количество триплетных повторов. Однако есть оговорки в интерпретации результатов биопсии ворсин хориона: в некоторых случаях анализ метилирования гена FMR1 в полных мутациях из проб ворсин хориона может быть неточным, и для точного определения статус метилирования гена 21. Эти ограничения следует обсудить с акушером-гинекологом или другим поставщиком медицинских услуг, обладающим необходимой квалификацией в области генетики, прежде чем назначать какие-либо анализы. Молекулярный анализ на основе ДНК (например, Саузерн-блоттинг и полимеразная цепная реакция) является предпочтительным методом диагностики синдрома ломкой Х-хромосомы и определения количества триплетных повторов FMR1 (например, премутаций). В редких случаях размер триплетного повтора и статус метилирования не коррелируют, что затрудняет прогнозирование клинического фенотипа.В случае такого несоответствия пациента следует направить к специалисту-генетику.


Генетические состояния у лиц восточно- и центральноевропейского еврейского происхождения

Ряд клинически значимых аутосомно-рецессивных заболеваний чаще встречается у лиц ашкеназского еврейского (восточноевропейского и центральноевропейского) происхождения. Большинство людей еврейского происхождения в Северной Америке происходят из еврейских общин ашкенази и, таким образом, подвергаются повышенному риску иметь потомство с одним из этих заболеваний. Если только один партнер имеет еврейское происхождение ашкенази, ему следует сначала предложить обследование. Если установлено, что этот человек является носителем, другому партнеру следует предложить обследование. Тем не менее, супружеская пара должна быть проинформирована о том, что частота носительства и уровень выявления у лиц нееврейского происхождения для большинства этих заболеваний неизвестны, за исключением болезни Тея-Сакса и муковисцидоза. Поэтому трудно точно предсказать риск рождения ребенка с расстройством у пары.

Американский колледж акушеров и гинекологов ранее рекомендовал проводить скрининг на носительство четырех заболеваний у населения ашкенази:

  1. Болезнь Канавана — тяжелое дегенеративное неврологическое заболевание. Фенотип довольно вариабелен, но у пациентов в первые несколько месяцев жизни, как правило, отмечается задержка моторных вех (например, контроль головы и сидение). У них будут проявляться макроцефалия, гипотония и умственная отсталость. Ожидаемая продолжительность жизни варьируется, но многие люди умирают в детстве или в подростковом возрасте.Лечение в первую очередь поддерживающее, потому что лекарства нет. Заболевание вызывается мутациями в гене аспартоацилазы, которая участвует в метаболизме N-ацетил-L-аспарагиновой кислоты.

  2. Кистозный фиброз обсуждается в другом месте этого документа.

  3. Семейная дисавтономия, расстройство сенсорной и вегетативной нервной системы, связано со значительной заболеваемостью. Клинические признаки включают аномальные трудности при сосании и кормлении, эпизодическую рвоту, аномальное потоотделение, нечувствительность к боли и температуре, лабильный уровень артериального давления, отсутствие слезотечения и сколиоз.Доступно лечение, которое может улучшить продолжительность и качество жизни, но в настоящее время лекарства нет. В 2001 году был идентифицирован ген семейной дисавтономии. По крайней мере, две мутации в гене семейной дизавтономии, IKBKAP , были идентифицированы у пациентов еврейского происхождения ашкенази с семейной дисавтономией. Одна из мутаций, IVS20(+6T->C), обнаруживается более чем у 99% пациентов с семейной дизавтономией. Это происходит почти исключительно у лиц еврейского происхождения ашкенази; частота носительства (1 из 32) аналогична болезни Тея-Сакса и муковисцидозу 22.

  4. Болезнь Тея-Сакса обсуждается в другом месте этого документа.

Некоторые эксперты выступают за более комплексную панель скрининга лиц ашкеназского происхождения, включая тесты на несколько менее распространенных заболеваний (частота носительства от 1 из 15 до 1 из 168). Ниже приводится список аутосомно-рецессивных состояний, для выявления которых следует рассмотреть возможность скрининга лиц ашкеназского происхождения:

  • Синдром Блума характеризуется низким ростом, кожной сыпью при воздействии солнца и повышенным риском развития рака любого типа.Пострадавшие люди часто имеют высокий голос, отличительные черты лица, трудности в обучении, повышенный риск диабета и хронической обструктивной болезни легких. Это вызвано мутациями в гене BLM , который кодирует семейство белков, известных как хеликазы RecQ.

  • Семейный гиперинсулинизм — это состояние, при котором поджелудочная железа вырабатывает слишком много инсулина, что приводит к снижению уровня сахара в крови, вызванному мутациями в гене ABCC8 .

  • Анемия Фанкони может быть вызвана мутациями не менее чем в 15 различных генах, но 80–90% случаев обусловлены мутациями в одном из трех генов: 1) FANCA , 2) FANCC и 3) FANCG .У пострадавших может развиться недостаточность костного мозга; повышенный риск развития рака, включая лейкемию и солидные опухоли; и структурные дефекты, такие как низкий рост, изменения пигментации кожи, аномалии нервной системы (включая пороки развития центральной нервной системы), аномалии развития глаз и ушей и потеря слуха, аномалии скелета, в частности затрагивающие большой палец или предплечья, желудочно-кишечные аномалии (включая воздействие на полость рта). ), и другие. Следует отметить, что 25–40% больных не имеют каких-либо физических отклонений 23.

  • Болезнь Гоше вызывается мутациями в гене GBA , кодирующем фермент бета-глюкоцереброзидазу; этот фермент отвечает за метаболизм глюкоцереброзида в глюкозу и церамид. Есть несколько типов. Тип 1 является наиболее распространенным и не влияет на центральную нервную систему. Симптомы могут варьироваться от легких до тяжелых и могут не проявляться до совершеннолетия. У лиц с гепатоспленомегалией, анемией, тромбоцитопенией, заболеваниями легких и аномалиями костей.Болезнь Гоше типа 2 и типа 3 вызывает вышеупомянутые симптомы и признаки и влияет на центральную нервную систему, включая аномальное движение глаз, судороги и повреждение головного мозга. Люди с типом 2 могут испытывать опасные для жизни проблемы в раннем возрасте. Существует также перинатальная летальная форма, которая может вызывать осложнения, проявляющиеся до рождения или в раннем грудном возрасте. Наконец, есть сердечно-сосудистый тип, для которого характерно обызвествление сердечных клапанов.

  • Болезнь накопления гликогена I типа (также известная как болезнь фон Гирке) вызывается накоплением гликогена в клетках организма, особенно в печени, почках и тонком кишечнике, и приводит к нарушению работы этих органов.Признаки и симптомы проявляются в раннем возрасте, примерно в возрасте 3–4 месяцев.

  • Синдром Жубера вызывается мутациями в генах, связанных со структурой и функцией ресничек. Проявления включают признак «коренного зуба» на магнитно-резонансной томографии головного мозга, который указывает на аномальное развитие ствола мозга и червя мозжечка; у младенцев также могут быть гипотония и атаксия, необычно быстрое или медленное дыхание, умственная отсталость и задержка развития.

  • Мочевая болезнь кленового сиропа вызывается мутациями в генах BCKDHA, BCKDHB и DBT , которые кодируют белки, необходимые для расщепления аминокислот лейцина, изолейцина и валина.Моча больных детей имеет характерный сладковатый запах. Пораженные люди проявляют плохое питание, вялость и задержку развития. Без лечения это состояние может привести к летальному исходу.

  • Муколипидоз IV типа вызывается мутациями MCOLN1 гена, участвующего в функционировании лизосом; дисфункция этого гена приводит к накоплению липидов и белков в лизосомах. У больных наблюдаются серьезные психомоторные задержки и нарушения зрения.

  • Болезнь Ниманна-Пика может проявляться по-разному, при этом у пораженных лиц проявляется различная степень тяжести. Существует четыре основных типа: 1) A, 2) B, 3) C1 и 4) C2. У людей с типом А есть вишнево-красное пятно в глазу; у них часто наблюдается задержка развития, и примерно в возрасте 1 года начинается психомоторная регрессия и обширное поражение легких. Большинство из них не доживают до раннего детства. Тип А является наиболее распространенной формой среди еврейского населения. Типы B, C1 и C2 не такие тяжелые, как тип A, и проявляются позже в детстве, хотя все три могут проявляться заболеванием легких.У людей с типами C1 и C2 развиваются неврологические нарушения, которые в конечном итоге мешают способности есть и интеллектуальной функции.

  • Синдром Ушера характеризуется нарушениями зрения, равновесия и слуха. Пигментный ретинит является основной причиной потери зрения у этих пациентов. Тип 1F и тип III, по-видимому, наиболее распространены среди еврейского населения.

Распространенность этих заболеваний среди нееврейского населения, за исключением болезни Тея-Сакса и муковисцидоза, неизвестна, а чувствительность этих тестов на носительство среди нееврейского населения не установлена.Поскольку мутации в других популяциях могут различаться, консультирование по остаточному риску после скрининга на отрицательное носительство может быть затруднено у лиц нееврейского происхождения. Для пар, в которых один партнер является носителем, а другой имеет нееврейское происхождение, генетическое консультирование может быть полезным для определения наилучшего подхода к оценке риска. Некоторые люди выступают за скрининг дополнительных состояний среди еврейского населения ашкенази, но включение в этот список ограничено состояниями, которые соответствуют критериям, установленным в Мнении Комитета 690, Скрининг носительства в эпоху геномной медицины .


Болезнь Тея-Сакса

Болезнь Тея-Сакса — тяжелое прогрессирующее нейродегенеративное заболевание. Это аутосомно-рецессивная лизосомная болезнь накопления, при которой ганглиозиды GM2 накапливаются по всему телу из-за функционального дефицита фермента гексозаминидазы А. Накопление этих ганглиозидов в центральной нервной системе вызывает смерть в раннем детстве. Поскольку носители этого тяжелого заболевания более распространены среди населения еврейского происхождения ашкенази, он хорошо подходит для скрининга носителей по этническому признаку.Три мутации гексозаминидазы А составляют большинство (до 98%) аллелей болезни Тея-Сакса в этой популяции 24. 30; частота носительства среди неевреев оценивается как 1 на 300. Однако у лиц франко-канадского и каджунского происхождения частота носительства также выше, чем в общей популяции (примерно 1 на 50) 25.Скрининг на болезнь Тея-Сакса следует предлагать при рассмотрении вопроса о беременности или во время беременности, если кто-либо из членов пары имеет еврейское, франко-канадское или каджунское происхождение. Людям с семейным анамнезом, соответствующим болезни Тея-Сакса, также следует предложить скрининг. Когда один из членов пары находится в группе высокого риска (т. е. имеет еврейское происхождение ашкенази, франко-канадское или каджунское происхождение или имеет семейный анамнез, соответствующий болезни Тея-Сакса), а другой партнер — нет, партнер с высоким риском должен быть предложил скрининг.Это особенно важно, если есть неопределенность в отношении происхождения или если есть семейный анамнез, соответствующий болезни Тея-Сакса. Если выясняется, что партнер из группы высокого риска является носителем, другому партнеру также следует предложить обследование. Если скрининг болезни Тея-Сакса проводится как часть панэтнического расширенного скрининга носителей, важно признать ограничения скрининговых мутаций при выявлении носителей в общей популяции. При наличии семейного анамнеза болезни Тея-Сакса расширенные панели скрининга носителей не являются лучшим подходом к скринингу, если семейная мутация не включена в панель.

Тестирование на носительство можно проводить с помощью ДНК-анализа (анализ мутаций) или тестирования ферментативной активности гексозаминидазы в сыворотке или лейкоцитах 26. Лаборатории сообщают об уровнях гексозаминидазы А в процентах от общей активности гексозаминидазы. Уровни гексозаминидазы А можно использовать для различения больных, носителей и неносителей. Ферментный анализ выявляет примерно 98% носителей, независимо от этнической принадлежности. Тестирование ферментов у беременных женщин и женщин, принимающих пероральные контрацептивы, должно проводиться с использованием теста на лейкоциты, поскольку тестирование сыворотки связано с повышенным уровнем ложноположительных результатов в этих группах населения.Хотя молекулярное тестирование очень эффективно в этнических группах с самым высоким риском, частота выявления носителей в общей популяции более ограничена из-за возможности редких мутаций. Направление к акушеру-гинекологу или другому поставщику медицинских услуг с опытом генетики может быть полезным в случаях неубедительных результатов тестирования ферментов или при обсуждении тестирования на носительство человека неашкеназской еврейской национальности, чей репродуктивный партнер является известным носителем болезни Тея-Сакса. болезнь.

Если установлено, что оба партнера являются носителями болезни Тея–Сакса, следует предложить генетическое консультирование и пренатальную диагностику. Болезнь Тея-Сакса можно диагностировать пренатально путем измерения активности гексозаминидазы в образцах, полученных с помощью амниоцентеза, отбора проб ворсин хориона или анализа мутаций.


Для получения дополнительной информации

Американский колледж акушеров и гинекологов определил дополнительные ресурсы по темам, связанным с этим документом, которые могут быть полезны акушерам-гинекологам, другим поставщикам медицинских услуг и пациентам.Вы можете просмотреть эти ресурсы по адресу www.acog.org/CarrierScreening.

Эти ресурсы предназначены только для информации и не претендуют на полноту. Ссылка на эти ресурсы не означает одобрения Американским колледжем акушеров и гинекологов организации, веб-сайта организации или содержания ресурса. Ресурсы могут быть изменены без предварительного уведомления.

Набор задач для криминалистики ДНК

Набор задач по криминалистике ДНК 1

Проблема 3: Профиль отца

На рисунке показаны результаты анализа отпечатков пальцев ДНК с помощью зонда с одним локусом для мужчины и его четырех разных детей.В какой полосе находится ДНК отца?

Руководство

Прогнозирование результата
Как упоминалось в учебнике по задаче 2, каждый родитель передает один набор аллелей каждому ребенку. Авторадиограмма выше содержит ДНК четырех детей и одного отца. Каждый ребенок разделит одну полосу (аллель) с отцом. Вы можете использовать процесс исключения, чтобы определить, какая дорожка содержит ДНК отца.

Процесс устранения
4 аллеля, которые появляются на этой авторадиограмме, были помечены A, B, C и D. Посмотрите на полосы на дорожках 2 и 5. Дорожка 2 содержит аллели C и D, тогда как дорожка 5 содержит аллели A и B. Поскольку эти дорожки не имеют общих полос, ни одна из полос не может содержать ДНК отца. Помните, что каждый ребенок будет иметь одну общую полосу с отцом и одну с матерью, чья ДНК не указана на этой авторадиограмме.
Посмотрите на полосы на дорожках 1 и 4. Опять же, совпадающих аллелей нет, поэтому эти дорожки не содержат ДНК отца. Имейте в виду, что братья и сестры не обязательно наследуют одни и те же аллели от своих родителей и обычно имеют разные профили ДНК друг от друга.

Исключив 4 из 5 полос, легко определить полосу отца. Проверьте свою работу, сопоставив полосу отца с каждой полосой для четырех детей.Опять же, одна полоса от отца должна соответствовать хотя бы одной полосе для каждого ребенка.


Биологический проект
Университет Аризоны
Пересмотрено: сентябрь 2000 г.
Связаться с командой разработчиков

http://www.biology.arizona.edu
Авторское право на все содержимое © 1996-2000.Все права защищены.

Электрофорез гемоглобина – обзор

489.2

Признак серповидно-клеточной анемии (гемоглобин AS)

Распространенность признака серповидно-клеточной анемии различается по всему миру; в США заболеваемость составляет 7–10% афроамериканцев. Поскольку все государственные программы скрининга новорожденных включают серповидно-клеточную анемию, у большинства детей признак серповидно-клеточной анемии впервые определяется при обследовании новорожденных. Информация о статусе признаков серповидно-клеточной анемии от младенчества до юношеского возраста для пострадавшего человека, семьи и медицинских работников часто непоследовательна, и многие молодые люди не знают о своем статусе признаков серповидно-клеточной анемии.

На продукцию HbS влияет количество присутствующих генов α-талассемии и количество HbS. По определению, среди лиц с признаками серповидно-клеточной анемии уровень HbS составляет <50%. Продолжительность жизни людей с серповидно-клеточной анемией нормальная, а серьезные осложнения возникают крайне редко. Общий анализ крови в пределах нормы (рис. 489.5 B ). Анализ гемоглобина является диагностическим, выявляя преобладание HbA, обычно >50%, и HbS <50%. Могут существовать редкие осложнения признака серповидно-клеточной анемии, но опубликованные данные не подтверждают эту озабоченность, в основном из-за плохо спланированных клинических исследований.Сообщается, что признак серповидно-клеточной анемии связан с рабдомиолизом при физической нагрузке у новобранцев и, возможно, с внезапной смертью во время тяжелых физических упражнений. Однако остается неясным, устанавливают ли эти отчеты признак серповидно-клеточной анемии как фактор риска, не поддающийся изменению другими генетическими факторами. Другие осложнения серповидно-клеточной анемии включают инфаркт селезенки на большой высоте, гематурию, гипостенурию, тромбоз глубоких вен и предрасположенность к прогрессирующему поражению глаз после гифемы (таблица 489.5). Медуллярная карцинома почки встречается почти исключительно у лиц с серповидно-клеточной анемией и встречается преимущественно у молодых людей.

Детям с признаками серповидно-клеточной анемии не требуются ограничения физической активности. Внезапная смерть у лиц с признаками серповидно-клеточной анемии во время тренировки в экстремальных условиях, скорее всего, связана со вторым генетическим фактором и/или факторами окружающей среды, а не с наличием самой черты серповидно-клеточной анемии. Однако при выявлении рабдомиолиза при физической нагрузке следует рассмотреть возможность оценки метаболизма и кардиологии.Никакой причинный путь не был вовлечен в наличие признаков серповидно-клеточной анемии и внезапную смерть. Все пациенты с признаками серповидно-клеточной анемии, которые участвуют в тяжелых спортивных мероприятиях, должны получать максимальную гидратацию и соответствующий отдых во время нагрузки, как и меры предосторожности для всех спортсменов, особенно при работе в жарких и влажных условиях. Наличие признака серповидно-клеточной анемии никогда не должно быть причиной для исключения человека из занятий спортом, а скорее должно служить указанием на то, что необходимо тщательное наблюдение для обеспечения надлежащей гидратации и предотвращения истощения от жары или других напряженных упражнений.Если спортсменам необходимо пройти скрининг на наличие признаков серповидно-клеточной анемии, подходящей процедурой является тестирование с использованием электрофореза гемоглобина с последующим генетическим консультированием, наряду со знанием того, что генетическая информация может дать возможность оспорить отцовство. Такие ситуации обычно рассматриваются педиатром или гематологом, привыкшим обеспечивать сбалансированный подход к генетическому консультированию и решению проблем, связанных с отцовством.

Электрофорез гемоглобина | HealthLink до н.э.

Обзор испытаний

Электрофорез гемоглобина — это анализ крови, проводимый для проверки различных типов гемоглобина в крови.Гемоглобин — это вещество в красных кровяных тельцах, которое переносит кислород.

Наиболее распространенными типами нормального гемоглобина являются:

  • Гемоглобин A. Это наиболее распространенный тип гемоглобина, обычно обнаруживаемый у взрослых. Некоторые заболевания, такие как тяжелые формы талассемии, могут вызывать снижение уровня гемоглобина А и повышение уровня гемоглобина F.
  • Гемоглобин F (фетальный гемоглобин). Этот тип обычно обнаруживается у плодов и новорожденных.Гемоглобин F заменяется гемоглобином А (взрослым гемоглобином) вскоре после рождения; только очень небольшое количество гемоглобина F производится после рождения. Некоторые заболевания, такие как серповидно-клеточная анемия, апластическая анемия и лейкемия, имеют аномальные типы гемоглобина и более высокое содержание гемоглобина F.
  • Гемоглобин А2. Это нормальный тип гемоглобина, обнаруживаемый в небольших количествах у взрослых.

Существует более 350 типов аномального гемоглобина. сноска 1 Наиболее распространенные:

  • Гемоглобин С. Этот тип гемоглобина присутствует при серповидноклеточной анемии.
  • Гемоглобин C. Этот тип гемоглобина плохо переносит кислород.
  • Гемоглобин E. Этот тип гемоглобина встречается у людей выходцев из Юго-Восточной Азии.
  • Гемоглобин D. Этот тип гемоглобина присутствует при некоторых заболеваниях серповидно-клеточной анемии.

Электрофорез использует электрический ток для разделения нормальных и аномальных типов гемоглобина в крови. Типы гемоглобина имеют разные электрические заряды и движутся с разной скоростью. Измеряют количество каждого типа гемоглобина в потоке.

Аномальное количество нормального гемоглобина или аномальный тип гемоглобина в крови может означать наличие заболевания. Аномальные типы гемоглобина могут присутствовать без каких-либо других симптомов, могут вызывать легкие заболевания, не имеющие симптомов, или вызывать заболевания, которые могут быть опасными для жизни.Например, гемоглобин S обнаруживается при серповидно-клеточной анемии, которая представляет собой серьезную аномалию крови и вызывает серьезные проблемы.

Почему это делается

Электрофорез гемоглобина проводится для:

  • Найдите каждый тип гемоглобина в крови. Это может быть использовано для диагностики некоторых видов анемии (например, талассемии).
  • Проверьте лечение заболеваний, которые имеют аномальные типы гемоглобина в крови.
  • Помогите парам выяснить, насколько вероятно, что у них будет ребенок с определенными формами анемии, которые могут передаваться от родителей к ребенку (по наследству).

Как это делается

Медицинский работник сдает кровь:

  • Оберните эластичную ленту вокруг плеча, чтобы остановить поток крови. Это делает вены под полосой больше, поэтому иглу легче ввести в вену.
  • Протрите место иглы спиртом.
  • Вставьте иглу в вену. Может потребоваться более одной иглы.
  • Подсоедините трубку к игле, чтобы наполнить ее кровью.
  • Снимите повязку с руки, когда соберется достаточно крови.
  • Поместите марлевый или ватный тампон на место иглы, когда игла будет удалена.
  • Надавите на место, а затем наложите повязку.

Каково это

Образец крови берется из вены на вашей руке. Эластичная лента обвивается вокруг вашего плеча. Это может быть тесно. Вы можете вообще ничего не почувствовать от иглы, или вы можете почувствовать быстрый укол или пощипывание.

Риски

Очень мала вероятность возникновения проблем при взятии образца крови из вены.

  • На этом месте может появиться небольшой синяк. Вы можете снизить вероятность появления синяков, удерживая давление на месте в течение нескольких минут.
  • В редких случаях вена может опухнуть после взятия образца крови. Эта проблема называется флебит. Для лечения можно использовать теплый компресс несколько раз в день.

Результаты

Электрофорез гемоглобина — это анализ крови, проводимый для проверки различных типов гемоглобина в крови. Результаты готовы через несколько дней.

Обычный

Приведенные здесь нормальные значения, называемые референсным диапазоном, являются ориентировочными. Эти диапазоны варьируются от лаборатории к лаборатории, и ваша лаборатория может иметь другой нормальный диапазон. Ваш лабораторный отчет должен содержать диапазон, который использует ваша лаборатория. Кроме того, ваш врач оценит ваши результаты на основе состояния вашего здоровья и других факторов. Это означает, что значение, выходящее за пределы перечисленных здесь нормальных значений, может оставаться нормальным для вас или вашей лаборатории.

Высокие и низкие значения
  • Более высокое, чем обычно, количество гемоглобина A2 и гемоглобина F может означать наличие легкой формы талассемии.Очень низкий уровень гемоглобина А и высокий уровень гемоглобина F могут означать более тяжелую форму талассемии. Высокий уровень гемоглобина F может наблюдаться при редком состоянии, называемом наследственной персистенцией фетального гемоглобина.
  • Гемоглобин S в умеренных количествах может означать наличие признака серповидно-клеточной анемии. Гемоглобин S в больших количествах означает серповидно-клеточную анемию.
  • Небольшое количество гемоглобина С может означать наличие признака гемоглобина С. Гемоглобин С в больших количествах означает болезнь гемоглобина С, которая вызывает анемию и увеличение селезенки.
  • Типы гемоглобина S и C означают болезнь гемоглобина S-C, которая вызывает легкую или умеренную форму серповидно-клеточной анемии.
  • Гемоглобин Е в малых количествах означает наличие признака гемоглобина Е. Гемоглобин E в больших количествах означает болезнь гемоглобина E, которая вызывает анемию и меньшие, чем обычно, эритроциты.
  • Типы гемоглобина, отличные от S, C, D и E, встречаются редко. Но было обнаружено более 350 типов аномального гемоглобина. сноска 2

Что влияет на тест

Причины, по которым вы не сможете пройти тест или почему результаты могут оказаться бесполезными, включают:

  • Переливание крови за последние 3 месяца.
  • Наличие железодефицитной анемии. Это может привести к ложно заниженным результатам гемоглобина А2.

О чем думать

Если вы планируете иметь детей и у вас обнаружены аномальные типы гемоглобина в крови, вы можете обратиться за консультацией к генетику. Это может помочь вам и вашему партнеру понять, насколько вероятно, что у вас будут дети с определенными наследственными формами анемии (такими как серповидно-клеточная анемия или талассемия).

Ссылки

Цитаты

  1. Fischbach FT, Dunning MB III, ред.(2009). Руководство по лабораторным и диагностическим исследованиям , 8-е изд. Филадельфия: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс.
  2. Fischbach FT, Dunning MB III, ред. (2009). Руководство по лабораторным и диагностическим исследованиям , 8-е изд. Филадельфия: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс.

Прочие работы, консультационные услуги

  • Чернецкий CC, Бергер Б.Дж. (2008). Лабораторные тесты и диагностические процедуры, 5-е изд. Сент-Луис: Сондерс.
  • Fischbach FT, Dunning MB III, ред.(2009). Руководство по лабораторным и диагностическим исследованиям, 8-е изд. Филадельфия: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс.
  • Пагана К.Д., Пагана Т.Дж. (2010). Руководство Мосби по диагностическим и лабораторным тестам, 4-е изд. Сент-Луис: Мосби Эльзевир.

Кредиты

Актуально на:
23 сентября 2020 г.

Автор: Healthwise Staff
Медицинский обзор:
E. Gregory Thompson MD — Internal Medicine
Brian D.О’Брайен, доктор медицины, внутренние болезни
Адам Хасни, доктор медицины, семейная медицина
Мартин Дж. Габика, доктор медицины, семейная медицина
Джозеф О’Доннелл, доктор медицины, гематология, онкология

Актуально на: 23 сентября 2020 г.

Автор: Healthwise Staff

Медицинское обозрение: E. Грегори Томпсон, доктор медицинских наук, внутренние болезни, и Брайан Д. О’Брайен, доктор медицинских наук, внутренние болезни, и Адам Хасни, доктор медицинских наук, семейная медицина, и Мартин Дж. Габика, доктор медицинских наук, семейная медицина, и Джозеф О’Доннелл, доктор медицинских наук, гематология, онкология

.

Важность капиллярного электрофореза в скрининге гемоглобинопатий у новорожденных – Блог | Trivitron Healthcare Solutions

Технология капиллярного электрофореза:

Капиллярный электрофорез

— одна из самых передовых технологий в области здравоохранения, которая используется во всем мире.Технология электрофореза предлагает полную автоматизацию, полную автоматизацию и высокую производительность, что имеет жизненно важное значение для большинства клинических лабораторий. При электрофорезе сложные молекулы дифференцируются на основе электрического заряда, который они несут в капилляре из диоксида кремния, и количественно определяются непосредственно при длине волны 415 нм.

Технология капиллярного электрофореза внедряется большинством клинических лабораторий и патологий по всему миру и находится на пути активного развития. Технология капиллярного электрофореза обеспечивает более высокую эффективность, более высокую клиническую ценность и пропускную способность для клинических лабораторий любого размера.

 

Гемоглобинопатии:

Гемоглобинопатии — это генетические состояния, которые влияют на количество или форму эритроцитов в организме. Эти условия могут отличаться друг от друга. Некоторые гемоглобинопатии могут вызывать серьезные симптомы, в то время как другие не вызывают проблем со здоровьем или даже симптомов заболевания. Легкие случаи гемоглобинопатии могут не требовать лечения. Однако, когда тяжелые случаи остаются без лечения, они могут вызвать анемию, повреждение органов или даже смерть.К счастью, при выявлении тяжелых гемоглобинопатий и начале лечения в раннем возрасте больные дети могут вести здоровый образ жизни.

 

Важность скрининга новорожденных на гемоглобинопатии:

Преимущества скрининга новорожденных на гемоглобинопатии можно разделить на пять категорий:

  1. Профилактика заболеваемости пораженных новорожденных
  2. Ретроспективная первичная профилактика для родителей, входящих в группу риска и имеющих больного ребенка
  3. Проспективная первичная профилактика для пар, входящих в группу риска и имеющих ребенка-носителя
  4. NBS при гемоглобинопатиях может быть полезным при выявлении анемического носителя и помочь в предотвращении несчастных случаев, особенно во время анестезии для носителей HbS
  5. Долгосрочная информация для здоровых носителей для тестирования будущих партнеров и репродуктивного выбора.

 

Скрининг гемоглобина компанией Capillary Technology:

Значительный процент младенцев страдает редкими генетическими состояниями, которые могут быть опасными для жизни, но поддаются лечению. Целью скрининга новорожденных является помощь в выявлении некоторых основных нарушений гемоглобина до того, как они могут неблагоприятно повлиять на ребенка. Скрининг новорожденных — это быстрый и простой способ дать вашему ребенку здоровое начало жизни.

Обнаружение вариантов структурного гемоглобина (Hb) и диагностика талассемии у новорожденных приобретают все большее значение.Раннее обнаружение вариантов гемоглобина, таких как HbS, имеет важные терапевтические последствия в раннем возрасте и может привести к соответствующему началу профилактических мероприятий. Количественное определение HbA2 является сложной задачей, поскольку он встречается на очень низком уровне и лишь незначительно повышается у носителей b-талассемии, что требует высокой точности.

До недавнего времени разделение фракций Hb осуществлялось по традиционным технологиям. Капиллярный электрофорез в настоящее время широко применяется для разделения фракций гемоглобина и идентификации предполагаемых вариантов гемоглобина.В этой технологии гемоглобины разделяются и подсчитываются с точностью и точностью. Предположительная идентификация варианта Hb производится путем сравнения положения его миграции с конкретными зонами миграции известных вариантов Hb, обнаруженных в библиотеке.

Большинство вариантов гемоглобина выделяются по этой технологии без каких-либо помех. Прямое обнаружение обеспечивает точное относительное количественное определение отдельных фракций гемоглобина, особенно гемоглобина HbA2 для диагностики бета-талассемии.Кроме того, высокая разрешающая способность этой технологии позволяет идентифицировать Hb S из Hb D и Hb E из Hb C. Количественное определение Hb A2 также можно проводить при наличии гемоглобина E.

Таким образом, капиллярная технология играет жизненно важную роль в скрининге вариантов гемоглобина у новорожденных и является общепризнанной технологией скрининга гемоглобина во всем мире.

Технические и юридические аспекты экспериментального исследования в Германии с участием 38 220 человек

Серповидно-клеточная анемия (SCD) не встречается у коренного населения Германии, но с ростом числа иммигрантов из стран с высоким риском гемоглобинопатий возникает вопрос: в любом случае в Германии не следует запускать программу скрининга новорожденных (NBS) на ВСС.Недавно мы показали, что в Берлине, городе с очень большим количеством иммигрантов, заболеваемость ВСС значительна, но наших данных недостаточно, чтобы принять решение по стране в целом. В этой статье мы покажем, что большой объем эпидемиологических данных может быть получен за относительно короткий период времени с очень высокой степенью точности и при относительно небольших затратах — результат, который может побудить другие рабочие группы начать такой пилотный проект. проект локально. Мы исследовали ранее собранные сухие карты крови возрастом до шести месяцев, используя высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) в качестве первого метода и капиллярный электрофорез (КЭ) в качестве второго метода.Один лаборант, работающий неполный рабочий день, обработал 38 220 проб за 162 рабочих дня. Общие затраты на образец, включая все непредвиденные расходы (а также затраты на оплату труда), составили 1,44 евро.

1. Введение
1.1. Серповидноклеточная анемия

ВСС является одним из наиболее распространенных моногенетических заболеваний во всем мире. Хотя это наиболее распространено в Африке, в некоторых частях восточного Средиземноморья и Азии, в результате миграции распространенность также постоянно увеличивается в Центральной и Северной Европе.ВСС включает группу аутосомно-рецессивных β -гемоглобинопатий, общим признаком которых является появление патогномоничных вариантов гемоглобина гемоглобина S (HbS). Его генетическим коррелятом является мутация HBB:c20A>T, которая обнаруживается у всех пациентов и может встречаться в гомозиготном или сложном гетерозиготном состоянии в сочетании с рядом других мутаций (например, HbC или β -талассемия). По сравнению со взрослым гемоглобином А (HbA) в молекуле HbS имеется аминокислотная замена на валин вместо глутаминовой кислоты в положении 6 полипептидной цепи β -глобина.Если содержание HbS в эритроците превышает критическую концентрацию, это приводит при определенных условиях к полимеризации деоксигенированных молекул HbS — центральному патофизиологическому событию ВСС. В результате сложного процесса это приводит к острому и хроническому гемолизу, а также к рецидивирующим вазоокклюзионным явлениям, вызывающим боль, ишемически-реперфузионное повреждение и, наконец, хроническое повреждение органов [1].

1.2. Скрининг новорожденных на серповидно-клеточную анемию

Многочисленные исследования дают четкие доказательства того, что опасные для жизни ранние осложнения ВСС (например,г., сепсис, селезеночный секвестрационный криз и др.) можно в значительной степени избежать, если диагноз поставить рано, т. е. по возможности в первые три-шесть месяцев жизни. Простые, но очень эффективные профилактические меры (например, вакцинация, профилактика пенициллином и т. д.) могут быть начаты достаточно рано. Это может значительно снизить заболеваемость и смертность [2–10]. Таким образом, во многих странах SCD является установленным компонентом национальных программ NBS. Во многих других странах, в которых нет национальных программ NBS, есть хотя бы некоторые региональные проекты и пилотные исследования [11–30].

Физико-химические свойства HbS отличаются от свойств нормального HbA. Это явление используется для диагностики. Все физиологические гемоглобины, а также все варианты гемоглобина демонстрируют характерные, но не однозначные модели миграции во всех установленных методах разделения. Поскольку в каждом методе имеются гемоглобины с одинаковыми или сравнимыми миграционными характеристиками, невозможно окончательно установить, какой гемоглобин присутствует в конкретном случае. Это означает, что результаты как минимум двух разных методов должны быть объединены, чтобы иметь возможность идентифицировать присутствующий гемоглобин с достаточной точностью [31–34].Это правило также применяется к NBS для SCD, чтобы избежать ложноположительных результатов. Методами, наиболее часто используемыми в NBS для SCD для разделения гемоглобинов в высушенных образцах крови, являются ВЭЖХ, изоэлектрическое фокусирование (IEF) и CE [32, 35-37].

1.3. Немецкая программа скрининга новорожденных

В Германии все новорожденные по закону имеют право участвовать в национальной (так называемой расширенной) программе NBS [38]. Однако участие является добровольным. Расширенный NBS включает 14 врожденных эндокринных и метаболических нарушений.Он не включает SCD. Кроме того, всех новорожденных проверяют на дефекты слуха. Список заболеваний, подлежащих скринингу в рамках немецкой программы NBS, составляет Объединенный федеральный комитет («Gemeinsamer Bundesausschuss», G-BA). G-BA издает руководящие принципы для фондов обязательного медицинского страхования (GKV), охватывающих более 70 миллионов застрахованных лиц в Германии. В нем указывается, какие услуги по медицинскому обслуживанию возмещаются ГКВ. Если новое заболевание должно быть включено в расширенную программу NBS, оно должно соответствовать критериям Вильсона-Юнгнера в модификации Andermann et al.[39, 40], чтобы соответствовать особым условиям немецкой системы здравоохранения. В частности, должно быть достаточно эпидемиологических данных и должно быть продемонстрировано, что раннее выявление рассматриваемого заболевания связано с медицинской и/или экономической выгодой.

1.4. Серповидноклеточная анемия в Германии

В Германии практически отсутствуют эпидемиологические данные о заболеваемости и распространенности ВСС. Таким образом, SCD до настоящего времени не воспринималась как серьезная проблема в системе здравоохранения Германии.В Берлине, городе с предположительно высокой заболеваемостью, мы провели пилотный проект, до сих пор единственный в Германии, в котором все новорожденные, родившиеся в период с 1 сентября 2011 г. по 30 ноября 2012 г., сдавшие образцы крови в рамках расширенной программы NBS, ретроспективно были дополнительно обследованы. протестирован на ВСС [41]. Возраст образцов представлял собой методологическую проблему. Однако две более ранние публикации показали, что возможно хранение не менее шести недель при комнатной температуре или 13 месяцев при -20°С [42, 43].В дополнение к получению эпидемиологических данных, дальнейшая цель проекта заключалась в том, чтобы выяснить, можно ли хранить высушенные образцы крови дольше шести недель при комнатной температуре и как их нужно обрабатывать после более длительного хранения, чтобы получить достоверные результаты. измерения. Это важные параметры для планирования подобных эпидемиологических пилотных исследований.

В этой статье мы сообщаем о технических аспектах нашего исследования и более подробно обсуждаем особую правовую ситуацию в Германии.

2. Методы
2.1. Этика и согласие

Комитет по этике университетской больницы Шарите одобрил исследование 28 сентября 2011 г. (номер ссылки EA2/088/11). Родители всех обследованных новорожденных дали письменное информированное согласие на повторный анализ крови до забора.

2.2. Дизайн исследования и популяция

Настоящее исследование представляет собой ретроспективное перекрестное исследование невыбранной когорты новорожденных. Все дети, родившиеся в Берлине в период с 1 сентября 2011 г. по 30 ноября 2012 г., считались подходящими для участия в этом проекте при условии, что они принимали участие в расширенной программе NBS.Берлин — столица Германии и второй по численности населения город в Европейском Союзе после Лондона. На 31 декабря 2010 г. в Берлине проживало 3 460 725 человек, из которых 864 065 (24,97%) имели миграционное происхождение. Из них не менее половины иммигрировали из стран с высокой распространенностью гемоглобинопатий [44].

Всего за исследуемый период родилось 39 249 детей. Из них 95 родителей или опекунов не дали согласия на участие в расширенной НБС. Еще 422 младенца не были включены в исследование, поскольку родители или опекуны не давали согласия на хранение образцов их детей сверх времени, необходимого для регулярного скрининга.В 126 случаях не было дано согласия на использование образцов в научном проекте, а в 386 случаях было слишком мало материала для дополнительного тестирования на ВСС после регулярного скрининга, так что в итоге можно было протестировать 38 220 образцов.

2.3. Целевые условия

Основными целевыми условиями данного исследования были SCD-S/S, SCD-S/C, SCD-S/, SCD-S/E, SCD-S/Lepore, SCD-S/, SCD-S/ β -талассемия, SCD-S/ δ β -талассемия и SCD-S/HPFH (наследственная персистенция фетального гемоглобина).Вторичными целевыми условиями были гетерозиготность по HbS, тяжелая талассемия и все варианты гемоглобина, кроме HbS в гетеро- или гомозиготной форме.

2.4. Забор проб крови и логистика

Образцы для скрининга обычно собирали у новорожденных в родильном доме или дома в возрасте от 36 до 72 часов жизни и в тот же день отправляли в берлинскую лабораторию NBS в виде высушенных карт капель крови (Ahlstrom 226, ID Biological Systems, Гринвилл, Южная Каролина, США). Берлинская лаборатория NBS (Лаборатория 1) — одна из 11 лабораторий NBS в Германии (http://www.screening-dgns.de/screening-3.php), которая анализирует образцы в контексте расширенной программы NBS, и является единственной лабораторией NBS в Берлине.

У новорожденных с гестационным возрастом менее 32 недель за первоначальным скринингом последовал второй скрининг в скорректированном возрасте 32 недели беременности. Другими причинами повторного скрининга были проведение переливаний крови или кортикостероидной или дофаминовой терапии перед сбором образцов для первого скрининга [45]. У пациентов, обследованных более одного раза, тест на ВСС проводился с последним полученным образцом.

После завершения регулярного скрининга в рамках расширенной программы NBS образцы хранились при комнатной температуре в лаборатории NBS. Через 42-171 день они были отправлены на экспертизу в рамках нашего проекта.

2.5. Методы измерения

Все образцы сначала исследовали с помощью ВЭЖХ. Образцы с профилями ВЭЖХ, соответствующими ВСС, признаку серповидно-клеточной анемии, β -талассемии или вариантным гемоглобинам, отличным от HbS, впоследствии анализировали с помощью КЭ в качестве подтверждающего метода [41] (рис. 1).


2.6. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

ВЭЖХ проводили на системе скрининга новорожденных VARIANT nbs (Bio-Rad Laboratories, Мюнхен, Германия) с использованием программы VARIANT nbs Sickle Cell. Если прямо не указано иное, мы следовали рекомендациям производителя. Колонки и все реагенты, такие как буферы, праймеры и маркеры времени удерживания, были приобретены у производителя.

Диск диаметром 1/8’’ (3,2 мм) вырезали из карты высушенной крови и помещали в лунку 96-луночного планшета.На выбитый диск добавляли 240  мкл л дистиллированной воды и инкубировали образец в течение 21 часа (ночь) при 4–6°С. Затем элюат центрифугировали в течение 10 минут при 1200 g для удаления твердых элементов (диск, сгустки крови, остатки целлюлозы и т. д.), оставшихся в образце. Осадок оставляли в образце, а надосадочную жидкость измеряли с защитой от испарения.

Система скрининга новорожденных VARIANT nbs оснащена двухволновым детектором, который измеряет оптическую плотность компонентов образца при 415 нм.Фоновый шум снижается за счет дополнительного измерения каждого образца на длине волны 690 нм. Затем данные поглощения передаются с детектора на подключенный ПК и преобразуются с помощью программного обеспечения GDM 3.0 (Bio-Rad Laboratories, Мюнхен, Германия) в хроматограмму в реальном времени, на которой измеренные напряжения (ось -) отображаются в зависимости от времени ( -ось). Программное обеспечение полностью автоматически анализирует хроматограммы, используя принцип интегрирования долины к долине.

Кроме того, все хроматограммы были проверены визуально.

Контрольные пробы с водой служили в качестве отрицательного контроля и включались в каждый анализ. В качестве контроля преаналитического процесса и автоматизированного интегрирования и количественного определения пиков мы использовали элюаты с высушенных карт пятен крови с носителей HbS и HbC и маркеры времени удерживания, предоставленные производителем. Определяли межсерийные коэффициенты вариации (CV).

2.7. Капиллярный электрофорез (КЭ)

Для КЭ диск диаметром 3,8 мм вырезали из карты высушенной капли крови и помещали в лунку 8-луночного стрип-пробирки.После добавления 50  мкл л дистиллированной воды образец инкубировали в камере влажности CAPILLARYS при 4–6°С не менее двух и не более 72 часов. Затем добавляли 0,6 мл гемолизирующего раствора. Затем проводили измерение гемолизата на системе CAPILLARYS 2 CE. В каждом цикле измеряли контроли с гемоглобинами A, F, S и C, предоставленными производителем. Сбор, управление и анализ данных проводились с помощью программного обеспечения PHORESIS 6.51. Все материалы для СЕ были закуплены в Себиа, Фульда, Германия.

2.8. Обработка результатов

Если и ВЭЖХ, и КЭ анализ крови ребенка указывали на ВСС, с семьей связывались и направляли в наше отделение детской гематологии, где предполагаемый диагноз подтверждался по образцу свежей крови с помощью молекулярно-генетического анализа. Телефонные номера и адреса были извлечены из обычной базы данных NBS. Состояния носительства не сообщались, как того требует наш местный комитет по этике.

3. Результаты

В день измеряли не более четырех 96-луночных планшетов, а 455 планшетов измеряли за 180 циклов.В течение всего исследования использовали шесть партий колонок. Всего с помощью ВЭЖХ было проверено 38 220 образцов, 34 084 из которых подлежали оценке. 4236 образцов пришлось исключить, поскольку соответствующие хроматограммы показали низкую общую AUC. Как и ожидалось, процент образцов с низкой AUC положительно коррелировал с возрастом образца (рис. 2). Более старые образцы показали более сильное разрушение гемоглобина, что привело к большему фоновому шуму и меньшему количеству анализируемого материала. Более старые образцы также содержали больше ворса фильтровальной бумаги, что мешало анализу, вызывая технические проблемы, такие как повышение давления или ошибки детектора.В одном случае мы наблюдали сдвиг времени удерживания. С 74 из наших самых старых 84 образцов (88,1%) мы получили хроматограммы с AUC > 900 000  мк Vs, хотя они были взяты с карточек высушенной крови 171 днем ​​ранее. Таким образом, образцы соответствовали минимальным критериям тестирования, которые мы определили как «адекватное качество». Тем не менее доля непригодных для использования результатов значительно возрастала, когда высушенным картам крови было более трех месяцев (рис. 2).


3.1. Новорожденные с положительным результатом скрининга

Из 34 084 включенных образцов 14 образцов показали картину ВЭЖХ, соответствующую диагнозу ВСС. 10 из которых были интерпретированы как FS; то есть предполагалось присутствие только гемоглобинов F и S. Паттерн FS указывает на гомозиготность по HbS, а также на сложную гетерозиготность по HbS и β -талассемию или δ β -талассемию или HPFH, соответственно. У четырех новорожденных мы обнаружили паттерн FSC; то есть у этих детей присутствовали только гемоглобины F, S и C.Это можно объяснить только компаундной гетерозиготностью по HbS и HbC, клинически приводящей к SCD-S/C (рис. 3).

КЭ использовали для подтверждения результатов ВЭЖХ. Во всех 14 случаях картины КЭ соответствовали соответствующим результатам ВЭЖХ. Следовательно, эти новорожденные считались «положительными при скрининге» и направлялись в нашу педиатрическую гематологическую амбулаторную клинику для окончательного подтверждения диагноза (таблица 1). Ложноположительных результатов мы не наблюдали.

9


1
1 9 1160 # 9 (Западноафриканский)
1

Номер пациента (Этническое происхождение) Узор скрининга HPLC / CE Молекулярный генетический результат


# 1 (Западноафриканский) FSA / FS SCD-S / S
# 2 (Западноафриканский) # 2 (Западноафриканский) F5SAB / FS SCD-S / S
# 3 (Ближний Восток) FSA5B / FS SCD-S / S / β β

8 0 Thalassemia

# 4 (Западноафриканский) FACS / FSC SCD-S / C
# 5 (Ближний Восток) F4SA / FS SCD-S / S
# 6 (Западноафриканский) # 6 (Западноафриканский) FSCA / FSC SCD-S / C
# 7 (Ближний Восток) FSA5 / FS SCD-S / S
# 8 (Западная Африка) FSaB/FS SCD-S/S
fs4a / fs SCD-S / S
# 10 (Западноафриканский) FS5AB / FS SCD-S / S
# 11 (Западноафриканский ) FCSA / FSC
0
SCD-S / C
# 12 (Западноафриканский) FSA2B / FS SCD-S / S
# 13 (West African) FSA2B / FS SCD-S / S # 14 (Западноафриканский) # 14 (Западноафриканский) FCS1 / FSC SCD-S / C 5
3.2. Новорожденные с отрицательным результатом скрининга

У оставшихся 34 070 новорожденных были обнаружены образцы гемоглобина без признаков какого-либо фенотипа ВСС, и поэтому они были классифицированы как «отрицательные при скрининге». Среди них мы идентифицировали в общей сложности 236 новорожденных, которые были гетерозиготными по варианту гемоглобина. Это был HbS в 165 случаях, HbE в 27, HbC в 23 и HbD в 11. Еще в десяти случаях был вариант, отличный от HbS, E, C или D. В случаях, интерпретируемых как гетерозиготность по HbS, HbS : Соотношение HbA было <2.0.

До сих пор мы не обратили внимания на то, что кому-либо из этих детей с отрицательным результатом скрининга впоследствии был поставлен диагноз ВСС. Однако сейчас этим детям от 14 до 28 месяцев, и последующее наблюдение не организовано систематически. Таким образом, возможно, что скрининг ложноотрицательных субъектов, например, детей, страдающих более легкими подтипами ВСС, такими как талассемия ВСС-S/ β + , был пропущен.

3.3. Точность ВЭЖХ

Маркеры времени удерживания (RTM) были предоставлены производителем.RTM представляют собой лиофилизированные контроли, содержащие гемоглобины F, A, E и S и гемоглобины F, A, D и C соответственно, для контроля точного разделения вышеупомянутых гемоглобинов с помощью прибора ВЭЖХ [46]. RTM помогает обнаруживать нестабильность давления в насосе или состава градиента, что является обязательным требованием для правильной аналитической работы, поскольку необработанные данные обрабатываются в электронном виде, а правильная интерпретация и интеграция пиков, появляющихся в определенных временных окнах, требуют полной функциональности аппаратного обеспечения.

Если RTM указывал на функциональное расстройство ВЭЖХ-аппарата, мы повторяли прогоны, которые, вероятно, были затронуты. В таблице 2 показаны наши результаты нескольких измерений () маркеров времени удерживания в сравнении со спецификациями производителя. Наши данные показывают высокую точность времени удерживания (CV ≤ 1,5%). Максимальное отклонение от среднего времени удерживания для HbS составило ±0,042 мин.


Hemoglobin Хемоглобин Время удержания RTM означает (диапазон) [min] CV% Спецификации производителя (диапазон) [MIN]



Ф 0.494 (0.471-0.510) 1.5 0.53090 0.530 (0.470-0.590)
A 0,792 (0.770-0.804) 0.9 0.800 (0.730-0.870)
E / A2 0,954 (0,919-0,970) 1.0 1.0 0,970 (0,930-1.010)
D 1.042 (1.005-1.072) 1.1 1.060 (1.010-1.110)
S 1.158 ( 1,116–1,183) 1,2 1.190 (1.130-1.250)
C 1.663 (1.634-1.684) 0,663 (1.690 0,6 1,680 (1.610-1.750)


Таблица 3 показывает среднее значение и диапазон времени удерживания различных гемоглобинов, обнаруженных в высушенных образцах пятен крови нашей исследовательской популяции. Ретроспективный анализ этих времен удерживания дает информацию о стабильности системы ВЭЖХ в течение всего периода исследования этого сложного материала.CV был ≤ 1% для всех основных гемоглобинов (A, S, E, D и C).

+ Вмененное гемоглобина
1
1

Время удерживания среднее (диапазон) [мин] CV%

0.800 (0.785-0.816) 0,8 100 100 1
E 0,952 (0,936-0,968) 0,8 26 26
D 1.044 (1.028-1.060) 1.0 11 11
S 1.154 (1.190-1.130) 0,9 100
C 1.660 (1.647-1.670) 0,4 23

Поскольку на результаты анализов могут повлиять многие факторы, образцы высушенной крови пяти новорожденных, которые оказались гетерозиготными по HbS или HbC, соответственно, были использованы в качестве дополнительного контроля качества .Эти образцы были случайным образом объединены в несколько циклов, включая все этапы от предварительной до постаналитической, чтобы включить все влияющие факторы. В таблице 4 показаны результаты повторных анализов этих образцов контроля качества, которые, как известно, являются гетерозиготными по HbS (A) или HbC (B) в разные рабочие дни.

(A)
+


1
HBF Среднее значение CV% HBA Среднее значение CV% HBS Значит% CV% CV%

Управление 1 37.3 2,9 8,9 5,3 3,6 6,3 11
Контроль 2 40,1 4,8 1,9 27 1,0 50 8

(б)
+ + + + + +

HbF среднее% CV% гликозилированного среднее% CV% HbC среднее% CV %

Контроль 3 39.6 5.7 5.7 1.7 22 22 22 28 11 11


1
Точность было уменьшено, если определенные фракции гемоглобина присутствовали в порядке, близком к пределу обнаружения 1 % от общей AUC.
3.4. Точность CE

В качестве контроля качества жидких контрольных образцов CE, содержащих гемоглобины F, A, S и C, использовали в каждом цикле в разные рабочие дни (таблица 5).

+ +

HBF Среднее значение CVA% HBA Среднее значение CV% HBS Среднее значение CVC% HBC означает% CV% CV% CV% CV%

управления FASC 18,8 4,8 35,5 2,0 14,5 4,3 5,4 7,7 5

3.5. Затраты

Всего мы исследовали образцы от 38 220 новорожденных, 37 970 только с помощью ВЭЖХ, 250 дополнительно с помощью КЭ, поскольку образцы показали аномальную картину гемоглобина в ВЭЖХ. На обследование всей когорты мы понесли затраты в размере 55 000 евро. Большую часть этой суммы (чуть менее 50%) составляли затраты на оплату труда. Однако в эту сумму входят также расходы на аренду инструмента, расходные материалы и т.д. Это означает, что стоимость одного образца составляет 1,44 евро (1,97 доллара США).

4. Обсуждение

На сегодняшний день практически отсутствуют эпидемиологические данные о распространенности и заболеваемости ВСС в Германии [41, 47, 48].Осторожные оценки, сделанные до сих пор, предполагают цифру от 3000 до 4000 пациентов во всей стране. Эти пациенты без исключения имеют иммигрантское происхождение [47].

В течение более года мы проверили без предварительного отбора по признаку этнического происхождения 87% всех детей, родившихся в Берлине (34 084 из 39 249), на наличие ВСС и выявили 14 с этим заболеванием [41]. Таким образом, частота ВСС (4,11/10 000) среди обследованных детей была выше, чем частота любого другого эндокринного или метаболического расстройства, проверяемого в контексте немецкой расширенной программы NBS.Поэтому SCD следует включить в NBS, по крайней мере, в Берлине. Чтобы решить, есть ли необходимость в национальной программе NBS по ВСС, нам теперь нужны данные из других регионов, особенно из районов с предполагаемой низкой распространенностью.

Результаты, представленные в этой статье, показывают, что такие эпидемиологические данные могут быть получены с относительно небольшими затратами времени и денег, поскольку нет необходимости ежедневно исследовать свежие образцы. Вместо этого можно ретроспективно анализировать большое количество образцов.Понятно, что затраты на образец (1,44 евро) в контексте нашего пилотного исследования не будут сопоставимы с расходами в контексте национальной программы скрининга. Хотя затраты на расходные материалы и т. д., вероятно, будут немного ниже из-за значительно большего числа пациентов, потребуются значительные дополнительные расходы на административные цели, такие как обеспечение качества. Дальнейшие дополнительные расходы возникнут на обучение персонала и на всю инфраструктуру, которая должна быть доступна во время фактического тестирования.

В этом исследовании удовлетвори- тельные результаты были получены при высушивании карточек пятен крови возрастом до шести месяцев. Тем не менее, очень старые образцы представляют собой особую проблему, поскольку частицы целлюлозы, которые отрываются от высушенных карточек крови вместе с кровью, могут значительно мешать измерению. Они оседают в тонких капиллярах измерительных приборов, закупоривая их или создавая дополнительные неспецифические измерительные сигналы. Непрерывно возрастающая деградация гемоглобина также приводит к дополнительным измерительным сигналам, особенно к увеличению фонового шума, а также к уменьшению количества анализируемого материала.В худшем случае можно даже пропустить серьезное заболевание из-за неправильной интерпретации пика, напоминающего HbA; например, большой паттерн β -талассемии можно спутать с физиологическим паттерном FA, а гомозиготность по HbS можно спутать с SCT. Поэтому подготовка проб имеет решающее значение.

Факторы, которые могут повлиять на качество образца, следующие. (1) Концентрация гемоглобина в гемолизате. Это зависит от объема образца крови, то есть от насыщения фильтрующей карты и от степени деградации гемоглобина.Последнее существенно зависит от возраста и условий хранения образца. Другими важными параметрами являются объем элюирования и время элюирования. (2) На работу прибора существенно влияет состояние карты высушенной капли крови. Это, в свою очередь, также зависит от возраста образца и условий хранения. В случае более старых карт частицы целлюлозы удаляются с карты вместе с кровью и могут мешать измерению.

Увеличение времени элюирования увеличивает концентрацию гемоглобина в гемолизате, а также вероятность отделения частиц целлюлозы от фильтрующей карты.Условия элюирования, описанные в разделе методов, учитывают оба явления и представляют собой необходимый компромисс.

Проведение пилотных исследований такого рода требует наличия высокопроизводительного метода. По нашему опыту, ВЭЖХ и КЭ одинаково подходят. Электрофореграммы КЭ показались нам более легкими для интерпретации, чем хроматограммы ВЭЖХ, поскольку в первых было меньше неспецифических сигналов. Какой бы метод ни был выбран, крайне важно, чтобы аналитическая лаборатория обладала специальными знаниями в отношении интерпретации необработанных измерений с помощью ИТ.

Программы скрининга заболеваний характеризуются тем, что определенных людей обследуют на наличие определенного заболевания просто потому, что они принадлежат к определенной популяции. Субъектов обследуют или тестируют независимо от того, есть ли какая-либо конкретная причина подозревать наличие целевого заболевания. Подавляющее большинство обследованных субъектов абсолютно здоровы. В связи с этим возникают особые этические, юридические, технические и экономические вопросы.

Немецкий закон о генетическом тестировании (GenDG) вступил в силу 2 января 2010 г. и является предметом постоянных дискуссий из-за его очень строгих правил [49].Он контролирует генетическое тестирование людей и использование генетических образцов и данных. В GenDG указывается, в частности, что анализы продуктов нуклеиновых кислот (анализы генных продуктов) также считаются генетическими анализами и, следовательно, юридически приравниваются к исследованию числа и структуры хромосом и молекулярной структуры ДНК и РНК. Это означает, что тестирование гемоглобинопатии с использованием методов разделения белков, таких как ВЭЖХ или КЭ, подпадает под действие GenDG.

Конечной целью GenDG является предотвращение потенциальных опасностей и дискриминации, связанных с изучением генетических признаков человека.Одним из важнейших принципов является право личности на информационное самоопределение. Это право, которое пользуется уникальной международной защитой в Германии, включает в себя право знать и, что более важно в этом контексте, право не знать. Его наиболее важным следствием является то, что нам в Германии не разрешено сообщать о признаках серповидно-клеточной анемии.

GenDG различает генетические тесты, проводимые в медицинском контексте, и тесты, проводимые в исследовательском контексте, и применяется только к тестам, заказанным в медицинском контексте.Различают также диагностические тесты и прогностические тесты. Кроме того, GenDG регулирует генетический скрининг, который будет включать NBS для SCD. Законодательство Германии требует создания независимой междисциплинарной Комиссии по генетическому тестированию (GEKO), которая была создана в Институте Роберта Коха и, среди прочего, устанавливает требования к проведению генетических скрининговых тестов [49]. Эти требования основаны на конкретных критериях генетического скрининга, разработанных Andermann et al.на основе скрининговых критериев ВОЗ Wilson и Jungner [39, 50]. GEKO прямо заявило, что результаты исследований, проведенных в других странах с другими системами здравоохранения и другими структурами населения, не обязательно могут быть экстраполированы на Германию [51]. Например, некоторые критерии отбора основаны на местных условиях, которые отсутствуют в Германии или, по крайней мере, не во всех частях страны. В частности, пациентам с серповидноклеточной анемией не везде в Германии можно предложить современную медицинскую помощь.Незлокачественная гематология почти полностью игнорировалась при обучении всех групп медицинских работников в прошлом, и гемоглобинопатии в целом до сих пор не рассматриваются в Германии как проблема. Однако в настоящее время разрабатывается национальная стратегия профилактики и лечения ВСС. Общество детской онкологии и гематологии (GPOH) заказало создание реестра пациентов, справочных центров и руководства по лечению. Это важно, потому что программа скрининга новорожденных, если она имеет какой-то смысл, требует не только выявления больных детей, но и функционирующей инфраструктуры, которая гарантирует, что больные дети также получат надлежащую помощь после постановки диагноза.Это включает в себя как медицинскую, так и психосоциальную помощь, а также достаточные ресурсы для консультирования пациентов и их родителей.

5. Выводы

Наш пилотный проект показывает, что имеет смысл, по крайней мере, на региональном уровне, подумать о введении какой-либо программы NBS для SCD в Германии, какую бы конкретную форму она ни принимала. Необходимые для этого пилотные проекты должны быть начаты уже сейчас. В дополнение к предполагаемым регионам с высокой распространенностью, таким как Берлин, Гамбург, Рурская область или Франкфурт, эпидемиологические данные также следует собирать из регионов с предполагаемой низкой распространенностью (например,г., сельская Бавария и Баден-Вюртемберг).

Наши данные показывают, что организация и реализация таких пилотных проектов относительно беспроблемны и недороги, поскольку образцы можно собирать в течение нескольких месяцев, а затем анализировать вместе. Тем не менее, мы рекомендуем, чтобы образцы не были старше трех месяцев на момент анализа. Крайне важно, чтобы Закон о генетическом тестировании не распространялся на такие пилотные проекты, поскольку они включают генетическое тестирование в контексте исследований.

Конфликт интересов

Stephan Lobitz, Claudia Frömmel и Oliver Blankenstein получили исследовательский грант от Novartis Oncology GmbH (Нюрнберг, Германия) для проведения этого исследования.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.